Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Interakce 2,4-D a etylénu v růstu tabákové BY-2 suspenze Vedoucí práce: Ing. RNDr. Marek Klemš, Ph.D. Kateřina Muselíková Mendelova univerzita v Brně březen.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Interakce 2,4-D a etylénu v růstu tabákové BY-2 suspenze Vedoucí práce: Ing. RNDr. Marek Klemš, Ph.D. Kateřina Muselíková Mendelova univerzita v Brně březen."— Transkript prezentace:

1 Interakce 2,4-D a etylénu v růstu tabákové BY-2 suspenze Vedoucí práce: Ing. RNDr. Marek Klemš, Ph.D. Kateřina Muselíková Mendelova univerzita v Brně březen 2012

2 1)studium hormonální regulace růstu BY-2 buněčné suspenze 2)určení významu vybraných růstových regulátorů a fytohormonů (2,4-D a etylénu) 3)hodnocení působení 2,4-D na buněčnou suspenzi z hlediska: a)růstu suspenze b)morfologických změn a znaků apoptózy c)viability buněk d)indukce tvorby etylénu a prekurzoru etylénu (ACC) (pro posouzení vzájemných interakcí) e) stanovení obsahu 2,4-D v buňkách a médiu v průběhu kultivace Cíl práce

3 BY-2 tabáková buněčná suspenze

4 3 fáze růstu buněčné suspenze Lag fáze Růstová fáze Stacionární fáze

5 Studium BY-2 suspenze - experiment výchozí suspenze – mezofyl listů tabáku odrůdy „Bright Yellow“ subkultivace suspenze probíhala do tekutého média LS (LINSMAYER A SKOOG, 1964), 30 g/l sacharóza, 1 μM 2,4-D, pH 5, 7 6-denní kultivace na LS médiu, na třepačce INFORS AG CH-4103 při 96 rpm každodenní hodnocení určených parametrů 4 koncentrace 2,4-D v tekutém médiu Experimentální: 0,1 µM; 10 µM; 100 µM Kontrolní: 1 µM

6 Závislost růstu BY-2 suspenze na koncentraci 2,4-D v médiu a době jejího působení

7 Stanovení životnosti buněk po 24 h 0,1 µM 2,4-D 1 µM 2,4-D - kontrola 10 µM 2,4-D100 µM 2,4-D zv x

8 Morfologie buněk po 48 h 1 µM - kontrola zv. 100x 0,1 µM zv. 100x 10 µM zv. 100x 100 µM zv. 100x

9 Morfologie buněk po 72 h 0,1 µM zv. 100x, 400x 1 µM - kontrola zv. 100x, 400x 10 µM zv. 100x, 400x100 µM zv. 100x, 400x

10 Stanovení životnosti buněk po 72 h 0,1 µM 2,4-D 1 µM 2,4-D - kontrola 10 µM 2,4-D100 µM 2,4-D zv x

11 Morfologie buněk po 6 dnech 0,1 µM zv. 100x 1 µM - kontrola zv. 100x 10 µM zv. 100x 100 µM zv. 100x

12 Buňky BY-2 ve stacionární fázi 0,1 µM zv.400x 1 µM - kontrola zv. 400x 10 µM zv. 400x 100 µM zv.400x Lag fáze Růstová fáze Stacionární fáze

13 hypotéza V průběhu kultivace suspenze BY-2 odvozené z mezofylu listů tabáku odrůdy „Bright Yellow“ dochází k akumulaci amorfního materiálu v buněčných stěnách a k jejich zesílení v závislosti na koncentraci 2,4-D (0,1; 1; 10 a 100 μM)(viz. fotografie níže). Hypoteticky lze předpokládat možný vliv 2,4-D na tvorbu a akumulaci pektinových polysacharidů ve střední lamele. Nepřetržité promíchávání suspenze, přítomná sacharóza v médiu a slabě kyselé pH média mohou být faktory, které současně podporují jejich želírovací schopnost a tvorbu charakteristických buněčných řetízků. Zvýšená tvorba pektinových oligomerů může být dále zkoumána specifickými barvícími technikami (např. ruthenium red, nebo jiné), nebo může být stanovena kolorimetricky.

14 Morfologie buněk po 6 dnech 0,1 µM zv. 100x 1 µM zv. 100x 10 µM zv. 100x 100 µM zv. 100x

15 Stanovení životnosti buněk po 6 dnech 0,1 µM 2,4-D 1 µM 2,4-D - kontrola 10 µM 2,4-D 100 µM 2,4-D zv x

16 Vztah mezi růstem a PCD buněk BY-2 k 1 – rychlost růstu buněk BY-2 k 2 – rychlost PCD 0,1  M 2,4-D k 1 = k 2 = 0 1 a 10  M 2,4-D k 1 > k  M 2,4-D k 1 = k 2 ≠ 0

17 Stimulace etylénu působením 2,4-D Nízké koncentrace auxinu stimulují tvorbu etylénu Vysoké koncentrace auxinu inhibují tvorbu etylénu Obecné jevy:

18 Obsah ACC a etylénu v buňkách BY-2

19 Shrnutí, diskuse a vize do budoucna 2,4-D má v agronomii duální charakter (auxin/herbicid) koncentrace 2,4-D je důležitým faktorem pro její působení v rostlině 4 studované koncentrace 2,4-D vykazují 3 různé efekty koncentrace 2,4-D ovlivňují metabolickou dráhu syntézy etylénu realizace experimentů přinesla spousty dalších otázek ke studovanému systému možnosti a návrhy nových experimentů k upřesnění pochodů ve studovaném systému

20 Poděkování


Stáhnout ppt "Interakce 2,4-D a etylénu v růstu tabákové BY-2 suspenze Vedoucí práce: Ing. RNDr. Marek Klemš, Ph.D. Kateřina Muselíková Mendelova univerzita v Brně březen."

Podobné prezentace


Reklamy Google