Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Cystickáfibrosa Cystická fibrosa. dědičné-autosomálně recesivní (AR) onemocnění závažná a chronicky progredující choroba střední délka života 36,8 let.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Cystickáfibrosa Cystická fibrosa. dědičné-autosomálně recesivní (AR) onemocnění závažná a chronicky progredující choroba střední délka života 36,8 let."— Transkript prezentace:

1 Cystickáfibrosa Cystická fibrosa

2 dědičné-autosomálně recesivní (AR) onemocnění závažná a chronicky progredující choroba střední délka života 36,8 let Multiorgánovépostižení: Multiorgánové postižení: - Dýchací cesty: - Dýchací cesty: hustý hlen vede k obstrukci dýchacích cest infekce a sekundární zánětlivý proces progresivní destrukce plic. - Pankreas: - Pankreas: pankreatická insuficience tuková a proteinová malabsorpci - Játra: - Játra: jaterní léze, fokální biliární cirhóza - Intestinum: - Intestinum: obstrukce střeva, Meconiový illeus (15-20% dětí) - Reprodukční trakt: a - Reprodukční trakt: absence vas deferens, infertilita (95% mužů) - Kůže: - Kůže: malfunkce potních žláz, zvýšený obsah soli v potu

3 Příčinacystickéfibrosy Příčina cystické fibrosy NBD -nucleotid vázající domény (ATP) R NBD1 NBD2 TM1 TM2 Cl - - mutace v genu CFTR - CFTR kóduje chloridový kanál: cystic fibrosis transmembrane conductance regulator – transport Cl - přes plasmatickou membránu epiteliáních buněk výstelky dýchacích cest a jiných žláz - cAMP regulovaný chloridový kanál R -regulační doména (cAMPdep.) TM - transmembránové domény lumen cytoplasma

4 MutaceCFTRgenu Mutace CFTR genu mutace jsou germinální (ve všech buňkách jedince) somatické nebyly dosud popsány ancestrální povaha mutací přenášeny z generace na generaci mutace de novo – velmi vzácně distribuce mutací je populačně specifická

5 F508del nejčastější mutace v české populaci ~70% delece tří bází v exonu 10 výpadek methioninu 508 v proteinu R NBD1 NBD2 TM1 TM2 Cl - … E N I I F G V S Y D… …..GAA AAT ATC ATC TTT GGT GTT TCC TAT GAT…. …..GAA AAT ATC ATT GGT GTT TCC TAT GAT…. … E N I I G V S Y D…

6 VyšetřenímutaceF508del Vyšetření mutace F508del O becný primer (C) Normal specific primer (N) Mutation specific primer (M) M C TARGET SEQUENCE N

7 VyšetřenímutaceF508del Vyšetření mutace F508del PCR reakce probíhá ve dvou zkumavkách: PCR Mix 0 obsahuje primer obecný a „normální“ PCR Mix 1 obsahuje primer obecný a „mutovaný“ O/N O/M Homozygo t bez mutace Heterozygo t přenašeč Homozygo t s mutací

8 VyšetřenímutaceF508del Vyšetření mutace F508del STS gen (P3,4) – kontrola průběhu PCR CFTR gen (P0,2) – obecný primer – primer specifický na sekvenci bez mutace STS gen (P3,4) – kontrola průběhu PCR CFTR gen (P1,2) – obecný primer – primer specifický na sekvenci s mutací PCR Mix 1PCR Mix 1 PCR Mix 0PCR Mix 0 NK DNA marker Pacient

9 PCRprotokol-vyšetření mutaceΔF508 PCR protokol-vyšetření mutace ΔF508 Detekce mutace způsobující cystickou fibrózu v CFTR genu pomocí sekvenčně specifických primerů PCR Mix 0 / Mix 1: Voda8,5µl Pufr2,0µl dNTP mix4,0µl Mg 2+ (MgCl 2 )2,0µl Primery M0 / M11,2µl DNA2,0µl Taq polymeráza 0,4 µl (na ledu)


Stáhnout ppt "Cystickáfibrosa Cystická fibrosa. dědičné-autosomálně recesivní (AR) onemocnění závažná a chronicky progredující choroba střední délka života 36,8 let."

Podobné prezentace


Reklamy Google