Artémia salina – žábronožka solná

Prezentace na téma: "Artémia salina – žábronožka solná"— Transkript prezentace:

1 Artémia salina – žábronožka solná
- Žábronožky jsou drobní korýši, kteří obývají lokality se zvýšeným obsahem soli. Nejčastěji se jedná o vnitrozemská solná jezera a přímořské laguny. Tyto lokality - příliš extrémní pro jejich predátory (ryby). Světová distribuce se však neomezuje pouze na tropické nebo subtropické klimatické pásmo. žábronožky jsou velice efektivními všežravými filtrátory (částice menší než 40 – 60 μm -  nevláknité řasy, rozsivky, detrit, prvoci, bakterie atd. Vylíhlá nauplia potravu nepřijímají a jsou živena ze svého žloutkového váčku. Prvním stádiem přijímajícím potravu je tzv. metanauplium. Optimální růst žábronožek při pozorován zpravidla mezi 25 – 30 °C Základní vývojová stádia žábronožek. A Cysta (po hydrataci); B Líhnoucí se nauplium, tzv. „umbrella“; C Nauplium; D Metanauplium; E Dospělec. Měřítko A = 178 μm, B = 177 μm , C = 150 μm , D = 250 μm, E = 3,5 mm.

2 Artémia salina – žábronožka solná
Dva způsoby rozmnožování: bisexuální rozmnožování za přispění samců i samic partenogeneze Vhodné podmínky prostředí - z vajíček se přímo líhnou živé plovoucí larvy ovoviviparní = vejcoživorodé rozmnožování samice vyprodukuje až 50 – 250 nauplií v jednom reprodukčním cyklu Nepříznivé podmínky prostředí - velmi nízká nebo velmi vysoká salinita nízká koncentrace kyslíku (jeho výkyvy) nedostatek potravy - vývoj vajíček se zastavuje ve stádiu gastruly u samic dochází k produkci trvalých vajíček – cyst. cysty jsou pomocí specializovaných žláz v těle matky obaleny několika ochrannými vrstvami a uvolněny do vodního prostředí. jedná se tedy o oviparní = vejcorodé rozmnožování.

3 Artémia salina – žábronožka solná
Cysty - splývají na hladině, jsou větrem vyhazovány na břeh, kde hromadně vysychají. V tomto stavu jsou neaktivní a zastavují svůj vývoj (období diapauzy, anhydrobiózu – kryptobiózu způsobenou extrémním nedostatkem vody vedoucí k vyschnutí organismu). jsou pak velmi rezistentní vůči parametrům vnějšího prostředí. toho se využívá při jejich skladování, kdy ani několikaleté skladování nemá negativní dopad na jejich líhnivost. otevřené balení cyst však musí být uloženo na suché místě a spotřebováno v co nejkratším čase. případné zvlhnutí cyst (dlouhodobě postačuje i pouhá vzdušná vlhkost) může být příčínou až nulové líhnivosti. cysta velikost 200 – 270 μm a hmotnost 3,5 μg, ve které je embryo chráněno několika vrstvami.

4 Artémia salina – žábronožka solná
Obal cyst - kortikální vrstva a alveolární vrstva: ochrana vajíčka proti mechanickému poškození a UV záření (různé lipoproteiny, chitin a hematin (derivát hemoglobinu), způsobuje různě intenzivní hnědé zabarvení vajíčka tyto struktury jsou rozpustné v roztoku chlornanu sodného při procesu takzvané dekapsulace následuje kutikula embrya se svou vnější a vnitřní membránou (odolné vůči chloraminu).

5 Artémia salina – žábronožka solná
- trvalé cysty jsou metabolicky neaktivní optimální podmínky: slaná voda (cysty ji rychle absorbují), vhodná teplota vody, dostatek kyslíku, přítomností osvětlení, zvýšeným pH aktivují vývoj embrya výše popsané podmínky se v podstatě simulují pří líhnutí artémií pro chovatelské využití cca po 20 hodinách inkubace dochází k prasknutí ochranných vrstev vajíčka a objeví se líhnoucí, membránou obklopené, embryo (umbrela) po krátké době se membrána protrhne a dochází k vylíhnutí volně plavajícího nauplia. v případě nasazení dekapsulovaných cyst je inkubace kratší a líhnutí je více synchronizované. nauplia jsou 400 – 500 μm velká a nepřijímají vnější potravu. - jsou živena ze zásob svého žloutkového váčku (lecitotrofní výživa), který jim propůjčuje oranžové zbarvení.

6 Artémia salina – žábronožka solná
pod mikroskopem je dobře patrné červené (naupliové) oko, tykadélka (senzorická funkce), tykadla (pohybová a filtrační funkce) a kusadla (budoucí příjem potravy) za 6 – 12 hodin se svléká do druhého vývojového stádia – metanauplia, které začíná pomocí filtrace neselektivně přijímat potravu o velikosti částic 1 – 50 μm

7 Artémia salina – žábronožka solná
- žábronožky procházejí až patnácti svlékání (poté dosahují pohlavní dospělosti), Vlastní vývoj  formace páru složených očí desáté vývojové stádium první pohlavní dimorfismus - přeměna tykadel samců na specializované háky (fixace samic při páření) - samci mají párový penis - samice  redukce tykadel, dospělé samice přítomnost dělohy s vajíčky či cystami velikost dospělců je obvykle 1 – 1,2 cm samice větší než samci (samice nese v průběhu kopulace přichyceného samce) růst stádií atrémií - velký význam z pohledu chovatele - různá vývojová stádia vhodná pro různě velký plůdek

8 Artémia salina – žábronožka solná

9 Využití žábronožky v akvakultuře
při chovu larev značného počtu rybích druhů a korýšů užití dekapsulovaných cyst a především nauplií žábronožek. využití další vývojových stádií či dospělců nutriční obsah artémií bílkovina: 50 – 56 % tuk: 12 – 23 % sacharidy: 4 – 17 %. složení kolísá v závislosti na lokalitách a stádií žábronožek.

10 Využití žábronožky v akvakultuře
Dlouhodobé používání: nutriční hodnota artémií plně nepokrývá živinové nároky ryb živinový profil žábronožek však může být vylepšen použitím tzv. bioencapsulačních technik.

11 Využití žábronožky v akvakultuře
Cena artémií: 1000 Kč/1 kg – 3000 Kč/ 1 kg na trhu jsou nabízené cysty v různých cenových relacích - cena je ovlivněna kvalitou (líhnivostí), masovostí líhnutí a velikostní vyrovnaností cyst.

12 Využití žábronožky v akvakultuře
Sanders Artémia Značka artémií: sera ARTEMIA INVE Artémia EASY FISH Artémia Golden Sea Aquaculture Co. Ltd Artemia Marine - USA

13 Dekapsulace artémie v akvakultuře
odstranění vrchní vrstvy cysta se stává stravitelnou používá se krátkodobá expozice hydratovaných cyst v roztoku chlornanu sodného SAVO). – výhody: cysty jsou dezinfikované, snadné skladování, dekapsulace je levnější, rychlejší a méně pracná než líhnutí nepřímé využití jako krmivo - možno klasicky odlíhnout vyšší líhnivosti u cyst s nízkou líhnivostí (až 50 % produkce artémií), nutriční hodnota těchto cyst není dotčena - nevýhoda: nepohyblivá potrava, méně atraktivní pro larvy ryb, (rychle klesají na dno) dekapsulované cysty – energeticky výživnější v porovnání s čerstvě vylíhlými nauplii o % těžší a jejich energetický obsah je vyšší o % nejvhodnější využít čerstvě dekapsulovaných cyst, možnost i sušení dekapsulovaných cyst (dlouhodobé skladování).

14 Vlastní dekapsulace artémií
čtyři fáze: hydratace, dekapsulace, proplachování a dezaktivace Pomůcky nutné pro vlastní dekapsulaci: 1) Inkubační láhev 2) Provzdušňovací zařízení s aeračním kamínkem. 3) Váhy a odměrný válec - váživost do 100 g ±0,1 g. 4) Sítko Pro scezení a proplachování cyst používáme sítka s velikostí ok 125 μm. Dekapsulované cysty jsou velké přibližně μm a příliš hrubou tkaninou by mohly unikat.

15 Vlastní dekapsulace artémií
5) Chemikálie pro vlastní dekapsulaci: Savo original je 4,7 – 5,0 % roztok chlornanu sodného (NaClO) stabilizovaného ve zředěném roztoku hydroxidu sodného. Krystalický hydroxid sodný (NaOH) je velmi reaktivní silně zásaditá látka, která je nejčastěji dodávána ve formě čoček nebo perliček. Je silně hydroskopický a proto by měl být skladován na suchém místě. Tato látka je silně dráždivá a může způsobit těžké poleptání!

16 Vlastní dekapsulace artémií
Chemikálie pro dezaktivaci: Kyselina chlorovodíková je ve své koncentrované podobě (35 %) silně žíravá, působí poleptání a dráždí dýchací orgány. Zásady bezpečnosti je třeba dodržovat především při přípravě 0,1 M roztoku, který získáme smícháním 9 ml koncentrované kyselina a 991 ml vody. V provozních podmínkách není nutné lpět na vodě destilované. Je však nezbytné, abychom nalévali kyselinu do vody a ne naopak!

17 Pracovní postup při dekapsulaci
1. krok - hydratace Suché cysty hydratujeme ve 20 – 25 °C teplé vodě po dobu 1 h při maximální hustotě 100 g cyst na 1 litr. Po celou dobu areace cyst V průběhu hydratace si do dvou kádinek (nádobek) odměříme stanovené objemy vody a Sava. V roztoku Sava necháme pozvolna rozpustit navážený hydroxid sodný – pozor, tento roztok je vůči tkáním velmi agresivní. - Obě kádinky umístíme do mrazáku nebo alespoň lednice. Při procesu vlastní dekapsulace se uvolňuje teplo, překročení teploty 40 °C snížení kvality cyst - Hydratované cysty scedíme připraveným sítkem a propláchneme vodou.

18 Pracovní postup při hydrataci
1 g dekapsulovaných cyst připadá: 0,5 g chlornanu sodného (Savo original), 0,15 g krystalického NaOH vlastní dekapsulační roztok je doplněn vodou tak, aby bylo dosaženo konečného poměru 14 ml roztoku na 1 g cyst.

19 Pracovní postup při dekapsulaci
Vlastní dekapsulace - Sítko s cystami obrátíme nad sedimentační válec (plastovou láhev) a opatrně je ze sítka vypláchneme roztokem Sava s hydroxidem - Vychlazenou vodou spláchneme zbytky cyst ze sítka a stěn válce (láhve). - Stejně, jako v průběhu hydratace udržujeme cysty v suspenzi vzduchováním a to po dobu 5 – 15 min. Nejlépe je volit průměrnou expozici 10 min, kterou lze v případě potřeby prodloužit. Dlouhá expozice však může způsobit snížení životaschopnosti nauplií (v případě následného líhnutí). - Dekapsulované cysty scedíme připraveným sítkem. V této fázi by měly mít cysty oranžovou barvu. U některých druhů cyst je zbarvení jasně žluté.

20 Pracovní postup při dekapsulaci - hydrataci
Hmotnost cyst (g) NaOH (g) Savo original (ml) Voda (ml) 1 0.15 11 3 2 0.30 21 6 0.45 32 10 4 0.60 43 13 5 0.75 53 16 0.90 64 19 7 1.05 74 22 8 1.20 85 26 9 1.35 96 29 1.50 106 1.65 117 35 12 1.80 128 39 1.95 138 42 14 2.10 149 45 15 2.25 160 48 20 3.00 213 25 3.75 266 80 30 4.50 319 5.25 372 112 40 6.00 426 6.75 479 145 50 7.50 532 161 60 9.00 638 193 70 10.50 745 225 12.00 851 257 90 13.50 957 289 100 15.00 1064 321

21 Pracovní postup při dekapsulaci
Proplachování Cysty proplachujeme pitnou vodou až do vymizení zápachu chloru (obvykle po 3 – 10 min). Dezaktivace Případných reziduí chloru ulpěných na samotných cystách se lze zbavit ponořením sítka s vajíčky do roztoku 0,1 M HCl po dobu méně než 1 minuty. Cysty opět propláchneme vodou a spodní část sítka otřeme savým papírem (např. papírovými ručníky), čímž zbavíme vajíčka přebytečné vody. Tím jsou cysty připravené k dalšímu užití.

22 ZPŮSOBY VYUŽITÍ DEKAPSULOVANÝCH CYST
Přímé zkrmení čerstvě dekapsulovaných cyst odchovávaným živočichům - nejjednodušší a praktický způsob – odkrm drobného plůdku, velikost dekapsulovaných cyst je poloviční oproti s čerstvě vylíhnutími artémiemi Nasazení cyst na líhnutí - dekapsulované cysty je možno nasadit na líhnutí. kratší doba potřebná k vylíhnutí, líhnutí je více synchronizované, není třeba oddělovat vylíhlá nauplia od nevylíhlých vajíček či prázdných obalů. energetický obsah nauplií vyšší v porovnání s nauplii vylíhlými z nedekapsulovaných cyst. Rovněž je možné zkrmovat směs vylíhlých nauplií a cyst. Krátkodobé skladování v chladničce uchování v chladničce při teplotě 0 – 4 °C a to po dobu až několika dní (ne déle než 4 dny), uzavíratelná nádoba (omezení osychání cyst). Následně je možné cysty přímo zkrmit nebo nasadit na líhnutí. Dlouhé skladování cyst v solném roztoku několikaměsíční skladování, nutnost dekapsulované cysty opět dehydratovat 1 g cyst do 10 ml silně koncentrovaného solného roztoku (koncentrace 330 g NaCl na 1 l vody). Cysty v této fázi udržujeme v suspenzi pomocí vzduchování. Po 24 hodinách je nutné tento roztok vyměnit a takto ošetřené cysty umístit do chladničky (4 °C). Sušení dekapsulovaných cyst - dekapsulované cysty – sušení – plovoucí cysty. - sušárna, teplota 35 – 40 °C po dobu 6 – 24 hodin, obsah vody nižší než 10%.

23 Základní vývojová stádia žábronožek
Základní vývojová stádia žábronožek. A Cysta (po hydrataci); B Líhnoucí se nauplium, tzv. „umbrella“; C Nauplium; D Metanauplium; E Dospělec. Měřítko A = 178 μm, B = 177 μm , C = 150 μm , D = 250 μm, E = 3,5 mm. (Gostling a kol., 2009; upraveno).

24 LÍHNUTÍ NAUPLIÍ - za 24 hodin - velmi bezpečné krmivo prosté nemocí
- žábronožky odolné vůči různorodým podmínkám prostředí a manipulaci - potrava výživově relativně bohatá - pohybově velice atraktivní - životnost ve sladké vodě několik hodin - zdroj trávicích enzymů

25 Pomůcky pro inkubaci nauplií
1) Inkubační láhev a akvárium PET láhve s uříznutým dnem vložené do akvária inkubační láhve s kónickým dnem 2) Akvaristické topítko, osvětlení a čerpadlo optimální teplota vody 26 °C, 24 hodinové osvětlení 3) Provzdušňovací zařízení nutno udržovat cysty a líhnoucí se nauplia v suspenzi. 4) Sedimentační láhev oddělení vylíhnutých nauplií a obalů (skořápek) 5) Digitální váhy navážení potřebných množství cyst a chemikálií (soli) 6) Sítko sítko. Velikost ok 125 – 150 μm, na scezení vylíhnutých naplií 7) Chemická činidla kuchyňskou sůl bez přídavku jódu (NaCl) a jedlou sodu – hydrogenuhličitan sodný (NaHCO3).

26

27 Základní vývojová stádia žábronožek
Základní vývojová stádia žábronožek. A Cysta (po hydrataci); B Líhnoucí se nauplium, tzv. „umbrella“; C Nauplium; D Metanauplium; E Dospělec. Měřítko A = 178 μm, B = 177 μm , C = 150 μm , D = 250 μm, E = 3,5 mm. (Gostling a kol., 2009; upraveno).

28 - Přímé zkrmení čerstvě vylíhlých nauplií odchovávaným živočichům
ZPŮSOBY VYUŽITÍ NAUPLIÍ - Přímé zkrmení čerstvě vylíhlých nauplií odchovávaným živočichům - Krátkodobé skladování nauplií v chladničce - Dlouhodobé skladování v mrazáku - Nasazení k dalšímu odkrmu

29 ODKRM ŽÁBRONOŽEK - získání vhodné potravy pro odrůstající plůdek ryb
- relativně rychle rostoucí živočichové, kteří dosahují své pohlavní dospělosti již za dva až tři týdny a mají vysokou plodnost - v kontrolovaných podmínkách je odchov na kulturách různých řas, mouka, šrot či otruby různých zemědělských plodin či kvasnic Nevýhoda značná pracnost, časová náročnost, značná spotřeba energií a prostor, nutnost kultivovat řasy Výhoda - odchovem lze vylepšovat výživný profil žábronožky pomocí krmiv - 24 hodinové odkrmy, žábronožky jsou neselektivními filtrátory a přijímají prakticky jakoukoliv předloženou potravu s vhodnou velikostí částic. - metody tzv. bioenkapsulace: obohacování o požadované živiny, pigmenty, léčiva a profylaktika, o polynenasycené mastné kyseliny (esenciální kyselinu eikosapentaenovou a dokosahexaenovou), o vitamíny C a E

30 ODKRM ŽÁBRONOŽEK - metody tzv. bioenkapsulace: obohacování o požadované živiny, pigmenty, léčiva a profylaktika, o polynenasycené mastné kyseliny (esenciální kyselinu eikosapentaenovou a dokosahexaenovou), o vitamíny C a E