Kvalita laboratorních zvířat Požadavky AnLab Ltd.

KVALITA LZ Souhrn vlastností laboratorního zvířete který je určován vnitřními a vnějšími (environmentálními) faktory působícími v chovné populaci

INTERNÍ EXTERNÍ Genetické Mikrobiální Iatrogenní Fyzikální Chemické Makrobiologické Mikrobiologické

KVALITA LZ Charakterizace zvířat laboratorním vyšetřením Požadované parametry ověřuji laboratorním vyšetřením Definované zvíře Opakované ověření požadovaných parametrů laboratorním vyšetřením Standardní zvíře

Míra definovanosti a standardnosti zvířete závisí Rozsahu požadovaných parametrů Kvalitě vyšetřující laboratoře a její dostupnosti Ekonomických faktorech

Základní nepominutelné požadavky na kvalitu laboratorních zvířat Genetická integrita + zdravotní stav

ZDRAVOTNÍ KONTROLA Health Monitoring Retrospektivní (diagnostická) multidisciplinární Prospektivní (pravidelná)

FELASA Recommendations for the health monitoring of mouse, rat, guinea pig and rabbit breeding colonies (November 1992) změna Recommendations for the health monitoring of rodent and rabbits colonies in breeding and experimental units (June 2001)

Sestavení zdravotního programu Výběr mikroorganismů které budou sledovány (patogenní, oportunní, ostatní) Velikost vzorku,stáří vyšetřovaných zvířat Intervaly vyšetření

Důležité faktory pro výběr testovaných mikroorganismů Je mikroorganismus primárním patogenem pro příslušný druh? Je schopný epizooticky infikovat příslušný druh s přímým i nepřímým průkazem v signifikantní části populace? Způsobí enzootická infekce klinické nebo histologické změny u signifikantní části populace? Je příslušný druh primárním/preferovaným hostitelem? Je stanoven patogenní potenciál mikroorganismu?

Kalkulace počtu zvířat na vyšetření (1) Předpoklady: 1. obě pohlaví jsou infikována stejně 2. početnost vyšetřované populace >100 zvířat 3. náhodný výběr vzorků (zvířat) 4. náhodný výskyt infekce v populaci Pak je možno použít následující vzorec pro výpočet velikosti vzorku: log 0,05 log N (N= procento neinfikovaných zvířat; 0,05=95% pravděpodobnost záchytu)

Velikost vzorku při různých hladinách pravděpodobnosti (2) Předpokládané % výskytu onemocnění 95% 99% 99,9% 10 29 44 66 20 14 21 31 30 13 40 6 50 5 7

Doporučená minimální frekvence vyšetření a velikosti vzorku pro laboratorní hlodavce a králíky FELASA 2001 Frekvence Stáří Počet zvířat ________________________________________ Každé 3 měsíce > 8 týdnů 10 ks Rozsah vyšetření: bakteriologie parazitologie patologie virologie (serologie)

Mikrobiologická jednotka Microbiological unit, Self-contained microbiological entity Celé zvěřincové zařízení Místnosti v různých budovách Klasická barierová jednotka (SPF) s několika místnostmi Samostatná místnost Isolátor IVC popřípadě systém IVC

BAKTERIOLOGIE FELASA 2001 (1) Bakterie Metoda M R Gp H Rb Bordetella bronchiseptica Kultura ■■ Citrobacter rodentium Clostridium piliforme ELISA,Pathol ■ Corynebacterium kutscheri Chlamydia psittaci ELISA, KFR Mycoplasma spp. ELISA, Kult. Mycoplasma pulmonis Pasteurella spp.

BAKTERIOLOGIE FELASA 2001 (2) Bakterie Metoda M R Gp H Rb Pasteurella pneumotropica Kultura ■■ Pasteurella multocida Salmonella spp. Streptococci β-haemolyt. (bez skupiny D) Streptococcus pneumoniae Helicobacter spp. (hepaticus, bilis,typhlonicus) PCR ■ Streptobacillus moniliformis Yersinia pseudotuberculosis + veškeré oportunní mikroorganismy pokud jsou spojeny s lézemi (Staphylococcus aureus, Klebsiella sp., Pseudomonas aeruginosa, atd.)

MYKOLOGIE FELASA 2001 Agens Metoda M R Gp H Rb Dermatofyta Kultura mikroskopie ■■ Pneumocystis carinii* PCR Histologie ■ ■■ vyšetření každé 3 měsíce; ■ vyšetření 1x ročně; * u immunodeficientních zvířat

VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001 (1) Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb Mouse hepatitis virus Coronaviridae (RNA) MHV ELISA IFA ■■ Rat corona virus/ Sialodacryoadenitis virus RCV SDA Mouse Rota virus Reoviridae (RNA) EDIM Reovirus 3 REO3 ■ Rabbit Rota virus Rb ROTA Sendai virus Paramyxoviridae (RNA) SEND

VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001(2) Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb Pneumonia virus of mice PVM ELISA IFA ■■ Kilham Rat virus Parvoviridae (DNA) KRV Toolan‘s virus H-1 H-1 Minute virus of mice MVM Mouse parvovirus MPV Rat parvovirus RPV

VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA (3) Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb Theiler‘s murine encephalomyelitis virus Picornaviridae (RNA) GD 7 TMEV ELISA IFA ■■ Lymphocytic choriomeningitis virus Arenaviridae (RNA) LCMV ■ Mouse cytomegalovirus Herpesviridae (DNA) MCMV Guinea pig cytomegalovirus GpCMV Ectromelia virus Poxviridae (DNA) ECTRO

VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001 (4) Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb Mouse adenovirus (FL+K87) Adenoviridae (DNA) MAD 1+2 ELISA IFA ■ Guinea pig adenovirus GpAD ■■ Hantaan virus Bunyaviridae (RNA) HANT Rabbit haemorhagic disease virus Caliciviridae (RNA) RHDV ■■ vyšetření každé 3 měsíce ■ vyšetření 1x ročně

PARAZITOLOGIE FELASA 2001 Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb Ektoparazité Ecto Mikrosk. ■■ Protozoa ELISA PCR Červi Helm Filtrace Flotace