Proces bakteriální identifikace Část 1: Příprava API systému
Destilovaná voda Fyziologická sterilní voda (zkumavka 5ml) Olej Agarová Petriho miska API system with box and lid Sterilní pipety kapátko Materials avaliable
1. Příprava Bakteriální suspenze
1.1. Sterilní očkovací smyčkou naneste bakteriální kolonie na agarovou petriho misku Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci
1.2 Vytvořte suspenzi této kolonie ve sterilním fyziologickém roztoku (5ml) - ve vodě třete očkovací smyčkou o stěnu zkumavky tak, aby se bakterie dobře rozptýlily. Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci
1.3 Ručně vytvořenou suspenzi zhomogenizujte mírným kroužením a poklepáváním zkumavky. Poté ji označte písmenem “S”. S
2.Příprava API systemu
2.1 Naplňte dna dutinek v boxu destilovanou vodou tak, aby hladina vody zakryla všechny jamky. 2.2 Krouživým pohybem boxu rozptýlíte vodu do všech jamek. Poté odeberte kapátkem veškerou přebytečnou vodu nad jamkami.
2.3 Pomocí kleštiček umístěte API system na box 2.4 Box zakryjte víčkem a do plastového štítku napište číslo vašeho stolu.
2.Naplnění API systemu
Úvod Nepodtržený test Podtržený test Ohraničený test Příklady: mikrozkumavka kalíšek
3.1 Otevřete box, podložte ho víčkem tak, aby byl v nakloněné poloze.
3.2 Zhomogenizujte vaši suspenzi krouživými pohyby Sterilní pipetou odeberte 2ml suspenze ze zkumavky s označením “S”. S Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci
3.3 Naplňte mikrozkumavky suspenzí podle následujících pokynů: Pro podržený nebo nepodtržený test (např.: ONPG or ADH), naplňte jen mikrozkumavky Pro test v rámečku (např. CIT), naplňte mikrozkumavku i kalíšek.Kalíšek mikrozkumavka
3.4 Sterilní pipetou přidejte olej do 5 kalíšků na podtržených testech - ADH, LDC, ODC, H2S, URE. kalíšek
3.5 Zavřete box a nechte inkubovat po dobu 16 hodin při 37°C. API box v inkubátoru
4. Analýza vašich výsledků Druhý den po dokončení inkubace identifikujte bakterii (viz. potokol 2)