Kultury rostlin in vitro Základní pojmy

Kultura rostlin in vitro A) Způsob kultivace rostlinného materiálu In vitro = ve skle B) Označení vlastního rostlinného materiálu kultivovaného tímto způsobem

Explantát Fragment odebraný z intaktní rostliny nebo z již existující kultury za účelem kultivace in vitro Nikoliv intaktní rostliny v kultuře in vitro Primární explantát – část odebraná z intaktní rostliny kultivované in vivo či in vitro Kultury primárních explantátů – primokultury či primární kultury

Kultury in vitro (KIV) Explantátové kultury – významově užší termín než KIV Kultura intaktních rostlin Kultury embryí Orgánové kultury (kořenové, nodální, meristémové, prašníkové apod.)

Další KIV Kultury tkáňové Kultury tumorové Kultury kalusové Kultury suspenzní Buněčné kultury Protoplastové kultury

Jiné dělení KIV Kultury organizované – obsahují celé či téměř celé rostliny Kultury neorganizované – tvořené jen neorganizovanými pletivy, buněčnými agregáty či jednotlivými buňkami Kultury smíšené – obsahují neuspořádané soubory buněk i uspořádané organizované struktury

Subkultivace Pasážování – přenos kultury či její části na čerstvé médium za sterilních podmínek Subkultivační interval – doba mezi dvěma po sobě jdoucími pasážemi Subkultivační číslo – udává, kolikrát byla kultura pasážována od svého založení

Totipotence Základní předpoklad růstu a vývoje explantátových kultur Schopnost somatické buňky dát vzniknout všem typům buněk rostlinného organismu Projevy totipotence - regenerace

Regenerační procesy Hojení ran Reprodukce Tvorba adventivních orgánů (regenerace v užším smyslu)

Živná média - složení Voda Anorganické látky – makroelementy Anorganické látky – mikroelementy Organické látky přesně definované – aminokyseliny, vitaminy, cukry, růstové regulátory Organické látky méně přesně definované – kokosová voda, kvasničné extrakty, enzymové hydrolyzáty apod. Ztužovací agens – agar, agarosa, gelrite

Fyzikální faktory kultivace in vitro Průměrná teplota 20-25 °C Fotoperioda 16 h světlo a 8 h tma, někdy tma Intenzita osvětlení 2 000 – 3 000 lx Zdroj světla: zářivky, sodíkové výbojky, LED žárovky Vlhkost v kultuře 80-90 % Nutné spolehlivé chladicí zařízení

Využití kultur in vitro Mikropropagace Ozdravování od viróz Indukce změn Genetické manipulace Studium fyziologických procesů a vztahů Produkce sekundárních metabolitů