Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Laboratorní diagnostika chlamydiových infekcí a její interpretace Naděžda Sojková a kol. Zdravotní ústav se sídlem v Praze Oddělení virologie.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Laboratorní diagnostika chlamydiových infekcí a její interpretace Naděžda Sojková a kol. Zdravotní ústav se sídlem v Praze Oddělení virologie."— Transkript prezentace:

1 Laboratorní diagnostika chlamydiových infekcí a její interpretace Naděžda Sojková a kol. Zdravotní ústav se sídlem v Praze Oddělení virologie

2 Unikátní biologické vlastnosti : nitrobuněční „energetičtí parazité“  bez schopnosti syntetizovat ATP Struktura podobná G- bakteriím, ale liší se:  nemají ve stěně k. muramovou  mají více lipidů  rigidní buněčná stěna  LPS méně toxický a imunologicky méně účinný při indukci zánětu Chlamydie

3 Růstový cyklus I. Optimální růstové podmínky infekční elementární tělísko (EB, nm)  vstup do buněčného fagosomu  inhibice fagolysosomální funkce  EB se zvětší a transformují v metabolicky aktivní : neinfekční retikulární tělísko (RB, nm)  binární dělení ( po hod)  spotřeba ATP hostitelské b. a kondenzace opět v EB  za hod je cytoplasma naplněna EB a praská (popř.exocytóza)  výsev infekčních částic

4

5 II. Zhoršené růstové podmínky (Chybná strategie léčby, produkce prozánětlivých cytokinů- IFNgama) Přerušení vývojového cyklu vznik aberantních tělísek s alterovanou expresí genů  zejména cHSP- exprimován na úkor MOMP, OMP..  vznik chronických (perzistentních) infekcí (deregulace imunity - fibroproduktivní zánět, reaktivita pacienta- genetika)  EB z chronicky infikovaných buněk se uvolňují exocytózou

6

7 Chlamydiacae – 2 rody: Chlamydia Chlamydia trachomatis (1907) – 18 sérotypů  Urogenitální trakt: lymfogr. venereum (L1-3), negonokoková urethritis, epididymitis, cervicitis, endometritis, salpingitis, periadnexitis (D-K)  Oko: trachom, inkluzní konjunktivitis (A-C)  Neonatální infekce: konjunktivitida, otitida, pneumonie Projevy chronické infekce: chronický urogenitální zánět, poruchy reprodukce, akutní perihepatitida, chronická proktitida, chlamydiová a postchlamydiová reaktivní artritida, Reiterův syndrom Klasifikace a klinické projevy

8 Chlamydophila (od r. 1999) Chlamydophila pneumoniae (1965): 50-80% promořenost dospělé populace  Akutní infekce: nejčastěji HCD pneumonie, bronchitida, sinusitida ale také konjunktivitida běžné jsou reinfekce (uplatňuje se spíše sekreční imunita)  Komplikace akutní infekce: infekční nebo reaktivní artritida meningoencefalitida endokarditis, myokarditis, perikarditis syndrom Guillain-Barré

9  Perzistentní infekce: vztah k etiologii astma bronchiale, CHOPN, arterioskleróze, aortálním aneurysmatům  Projevy chronické infekce: exacerbace astma bronchiale, chron. obstr. bronchitida, reaktivní artritida  Studován vztah k: arterioskleróze bronchopulmonálnímu karcinomu onemocněním CNS včetně indukce RS

10 Chlamydophila psittaci: Antropozoonóza - „ornitóza“ (obecně) - „psitakóza“ (papouščí nemoc)  nositelem infekce jsou ptáci (holubi, papoušci) ale také savci ( koně, ovce, skot, kočky)  u člověka se nákaza vyskytuje sporadicky  atypická pneumonie, myokarditida, hepatitida, hepatosplenomegalie

11 Základní zásady terapie chlamydiových nákaz: Chlamydie – nejvyšší citlivost k makrolidům a tetracyklinům. Podmínky:  co nejnižší MIC  vysoký průnik do tkání (prostřednictvím makrofágů do místa zánětu)  dosažení účinných hladin v endosomu  dlouhodobé působení (2-3 týdny) Vše optimálně splňuje Doxycyclin a Azithromycin (Sumamed, Zetamac) Kombinace s metronidazolovými preparáty-Entizol Podpůrná enzymoterapie

12 Major outer membrane protein, MOMP:  druhově specifický antigen na povrchu EB Lipopolysacharid, LPS:  rodově specifický, tj společný všem druhům Ch.  působí prozánětlivě jako polyklonální aktivátor makrofágů a lymfocytů Chlamydiový heat-shock protein, c-HSP:  fylogeneticky konzervovaný prozánětlivý protein  indukce protrahované DTH  schopnost navození autoimunitních procesů Důležité chlamydiové antigeny

13 Jak?Antigen? Materiál? 1.Přímá hybridizace DNA výtěry, BAL, punktát PCR moč, likvor, biopsie, etc. DIF MOMP, LPS 2. Nepřímá KFR ELISA LPS (genus), MOMP,HSP krev MIF MOMP (EB-species) immunoblot MOMP,OMP2,TARP CPAF, HSP60, YwbM Laboratorní diagnostika

14 1. genus–specifický test : Anti-Chlamydia IgG, IgM and IgA - LPS antigen – LPS- ELISA 2. MIF SeroFia - species–specifický test : Anti-Chlamydophila pneumoniae (CP) a psittaci CPs, Chlamydia trachomatis (CT) IgG, IgM a IgA protilátky proti MOMP EB - MIF metoda. 3. recomLine Chlamydia IgG, IgA a IgM test. Diagnostické metody, testy:

15 Přínos metody recomLine  vysoká specificita pro všechny 3 druhy chlamydií  species specifické antigeny CPAF-faktor virulence, TARP-vazba actinu a YwbM pro CP  HSP60 indikátor chronických infekcí  vyšší senzitivita IgA protilátek, zejména u CP a CPs  jediná vysoce specifická metodika pro sérologii CPs  vedle IgG a IgA další třída protilátek IgM  možnost automatizace  současné použití jak pro screening, tak pro konfirmaci výsledků  jednokroková diagnostika všech 3 druhů chlamydií  rekombinantní antigeny vylučují zkříženou reaktivitu

16 New recomLine Chlamydia - examples of positive sera- IgG IgM IgA MOMP OMP2 TARPCPAF HSP60 MOMP OMP2 TARPCPAF YWBM MOMP OMP2 TARPCPAF C. trachomatisC. pneumoniaeC. psittaci IgG IgM IgA IgG IgM IgA A B C C. pneumoniae infection: IgG, IgA and IgM positive C. psittaci infection confirmed by the MOMP reactivity in IgA and IgM; additional past infections with C. trachomatis and C. pneumoniae C. trachomatis infection: IgG, IgA and IgM positive;

17 New recomLine Chlamydia Chlamydia trachomatis positive sera IgG IgM IgA MOMP OMP2 TARPCPAF HSP60 MOMP OMP2 TARPCPAF YWBM MOMP OMP2 TARPCPAF C. trachomatisC. pneumoniaeC. psittaci IgG IgM IgA IgG IgM IgA A B C typical past C. trachomatis infection with slight cross-reactivity to C. pneumoniae and C. psittaci double infection with C. trachomatis and C. pneumoniae verified by TARP (C. trachomatis) and CPAF and YWBM (C. pneumoniae); IgA positive C. trachomatis infection; might be a recent infection due to positive IgM

18 New recomLine Chlamydia Chlamydia pneumoniae positive sera IgG IgM IgA MOMP OMP2 TARP CPAF HSP60 MOMP OMP2TARPCPAF YWBM MOMP OMP2TARPCPAF C. trachomatisC. pneumoniaeC. psittaci IgG IgM IgA IgG IgM IgA A B C typical C. pneumoniae infection; IgA positive typical C. pneumoniae infection; might be a recent infection due to positive IgM double infection with C. pneumoniae and C. trachomatis verified by YwbM (C. pneumoniae) and TARP and CPAF (C. trachomatis)

19 New recomLine Chlamydia Chlamydia psittaci positive sera IgG IgM IgA MOMP OMP2TARPCPAF HSP60 MOMP OMP2TARPCPAF YWBM MOMP OMP2TARPCPAF C. trachomatisC. pneumoniaeC. psittaci IgG IgM IgA IgG IgM IgA A B C C. psittaci infection confirmed by the MOMP reactivity in IgA; additional past infections with C. trachomatis and/or C. pneumoniae acute infection with C. psittaci proven by MOMP IgM; past infection with C. pneumoniae that (TARP, CPAF and YwbM) no C. psittaci infection (as has been determined by MIF); past infections with C. trachomatis and C. pneumoniae

20 1.Přítomnost protilátek anti LPS – rozdělení do infekčních stadií: Pouze IgM popř. IgA – v.s. akutní infekce-primoinfekce/reinfekce pouze IgG (+/++) – anamnestická odpověď IgG (+++) a IgA (+/++) – recentní, v.s. aktivní infekce 2. Potvrzení/vyloučení aktivní infekce – stanovení anti MOMP: Species-specifický test-MIF: titr IgG 1:512 a vyšší-známka aktivní infekce Titr IgA 1:64 – potvrzení aktivní infekce Sporné nálezy – konfirmace immunoblotem 3. IgG anti-cHSP60 protilátky: v.s. chronická infekce, potvrzení opakovaným vyšetřením, popř. immunoblotem Interpretace sérologických nálezů

21 Výsledky Porovnání infekčních stádií u pacientů s MS a v CG – Elisa, MIF

22 p = 0,61; ODR = 0,89p = 0,003; ODR = 11,25

23 Závěr 1.Pro rychlou a přesnou diagnostiku akutních infekcí má větší význam přímý průkaz patogena ve vhodně voleném materiálu. 2.Pro screeningové vyšetření je vhodná sérologie založená na protilátkové odpovědi anti-LPS. 3. Průkaz protilátek proti MOMP je významně důležitějším markerem v diagnostice chronických aktivních chlamydiových infekcí než protilátky proti LPS. 4. IgG anti cHSP60 jsou významným markerem pro potvrzení a sledování perzistentní infekce. 5. Dokladem neustálého zpřesňování diagnostiky je nový test recomLine s rekombinantními antigeny TARP, CPAF a YWBM. 6. Výsledky naší spolupráce s klinickými pracovišti potvrzují, že stavům chronické a perzistentní infekce lze předcházet systematickým vyšetřováním, které společně s klinickým stavem pacienta pomáhá lékaři stanovit správnou diagnózu a léčbu akutních infekcí.


Stáhnout ppt "Laboratorní diagnostika chlamydiových infekcí a její interpretace Naděžda Sojková a kol. Zdravotní ústav se sídlem v Praze Oddělení virologie."

Podobné prezentace


Reklamy Google