Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Apoptóza Detekce Význam. Obsah  Definice, historie apoptózy  Morfologie apoptózy  Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy  Metody detekce apoptózy.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Apoptóza Detekce Význam. Obsah  Definice, historie apoptózy  Morfologie apoptózy  Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy  Metody detekce apoptózy."— Transkript prezentace:

1 Apoptóza Detekce Význam

2 Obsah  Definice, historie apoptózy  Morfologie apoptózy  Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy  Metody detekce apoptózy  Apoptóza ve fyziologických procesech  Apoptóza v patologických procesech  Apoptóza v diagnóze a terapii a perspektivy výzkumu

3 Definice, historie apoptózy  Programovaná buněčná smrt, aktivní proces, liší se od nekrózy Kerr JFR, Wyllie AH, Currie AR. Apoptosis: a basic biological phenomenom with wide ranging implications in tissue kinetics. British Journal of Cancer (1972), 26, 239 Kerr JFR, Wyllie AH, Currie AR. Apoptosis: a basic biological phenomenom with wide ranging implications in tissue kinetics. British Journal of Cancer (1972), 26, 239  Evolučně konzervovaný (Caenorrhabditis elegans)   – podzimní padání listů ze stromů

4 Morfologie apoptózy Kondenzace chromatinu Budding Apoptotická tělíska

5 Morfologie apoptózy (ELMI)

6 Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy  Indukce apoptózy  Aktivace efektorů apoptózy  Fáze degradace

7 Indukce apoptózy  Radiace  Hypertermie  Cytostatika  Cytokiny  Interakce T lymfocytů s cílovými buňkami  Hypoxie, kyslíkové radikály, atd.

8 Aktivace efektorů apoptózy  Receptorová signální dráha  Nereceptorová signální dráha-poškození DNA, hypoxie, atd.  Mitochondriální signální dráha Pozn. Na všech drahách se podílí členové rofiny BCL-2 !!

9 Apoptóza - receptorová signální dráha (převzato z Science, Vol 281, p 1306, 1998)

10 Apoptóza - receptorová signální dráha (FAS-L)

11 Apoptóza - nereceptorová signální dráha (převzato z Science, Vol 281, p 1320, 1998)

12 Mitochondriální signální dráha  APAF  Cytochrom c  Ionty Ca

13 Rodina proteinů BCL-2 (antiapoptotické) (převzato z Science, Vol 281, p 1322, 1998)

14 Rodina proteinů BCL-2 (proapoptotické) (převzato z Science, Vol 281, p 1322, 1998)

15 Kaspázy (Caspases)  Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases  Neaktivní prekurzory  Specifické substráty

16 Fáze degradace  Substráty kaspáz lamin B lamin B keratin 18 keratin 18 PARP PARP  Fragmentace DNA - DNA laddering  Změny na cytoplasmatické membráně

17 Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy – souhrný graf I. (převzato z xxx)

18 Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy – souhrný graf II. (převzato z xxx)

19 Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy – souhrný graf III. (převzato z xxx)

20 Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy – souhrný graf IV. (převzato z xxx)

21 Metody detekce apoptózy  Světelná mikroskopie apoptotická tělíska apoptotická tělíska  Elektronová mikroskopie – ultrastruktura kondenzace chromatinu kondenzace chromatinu budding budding  Změny DNA DNA laddering, DNA laddering, značení štěpených konců DNA (TUNEL, ISNTA) značení štěpených konců DNA (TUNEL, ISNTA)  Změny na cytoplasmatické membráně – exposice PS (fosfatidylserin) a vazba Annexinu V exposice PS (fosfatidylserin) a vazba Annexinu V permeabilita membrány a vazba barviv na DNA (Hoechst, DAPI) permeabilita membrány a vazba barviv na DNA (Hoechst, DAPI)

22 Metody detekce apoptózy  Substráty kaspáz detekce štěpení PARP, laminu B, transglutaminázy detekce štěpení PARP, laminu B, transglutaminázy  Mitochondriální funkce uvolňování cytochromu c, uvolňování cytochromu c, změny membránového potenciálu mitochondriální membrány (rhodamin 123, Mitotracker) změny membránového potenciálu mitochondriální membrány (rhodamin 123, Mitotracker)

23 Metody detekce apoptózy

24

25 Metody detekce apoptózy (TUNEL)

26 Metody detekce apoptózy

27

28 Metody detekce apoptózy (Lamin B)

29 Metody detekce apoptózy

30 Metody detekce apoptózy (xxx)

31 Metody detekce apoptózy  Použití pouze jedné z metod nedokazuje jednoznačně přítomnost apoptózy – je třeba použít nejméně dvě metody (např. morfologie a TUNEL)!!

32 Apoptóza ve fyziologických procesech  Embryogeneze  Klimakterium, senium  Ochrana „imunoprivilegovaných“ míst

33 Apoptóza v patologických procesech  Patologická inhibice apoptózy  Patologická indukce apoptózy

34 Patologická inhibice apoptózy  Nádory folikulární lymfomy folikulární lymfomy karcinomy s mutací genu p53 karcinomy s mutací genu p53 hormonálně dependentní nádory (karcinomy mléčné žlázy, prostaty, vaječníku) hormonálně dependentní nádory (karcinomy mléčné žlázy, prostaty, vaječníku)  Autoimunní choroby systémový lupus erythematodes systémový lupus erythematodes glomerulonefritidy glomerulonefritidy

35 Patologická inhibice apoptózy  Virové infekce Herpesviry Herpesviry Poxviry Poxviry  Bakteriální infekce TBC TBC  Alergická onemocnění

36 Patologická indukce apoptózy  AIDS  Neurodegenerativní onemocnění Alzheimerova choroba Alzheimerova choroba Parkinsonova choroba Parkinsonova choroba amyotrofická laterální skleróza amyotrofická laterální skleróza

37 Patologická indukce apoptózy  Myelodysplastické syndromy aplastická anemie aplastická anemie  Ischemické poškození infarkt myokardu infarkt myokardu mozková apoplexie mozková apoplexie  Toxické poškození jater alkohol alkohol

38 Apoptóza v diagnóze a terapii a perspektivy výzkumu  Intenzivní studium mitochondriální dráhy  Zaměření na roli iontu Ca v procesu apoptózy  Zlepšení metod detekce apoptózy fluorescenční dynamická detekce změn na membránách fluorescenční dynamická detekce změn na membránách „timing“ jednotlivých změn – nutnost kvalitní zobrazovaní a záznamové techniky „timing“ jednotlivých změn – nutnost kvalitní zobrazovaní a záznamové techniky

39 Apoptóza v diagnóze a terapii a perspektivy výzkumu  Imunohistochemické stanovení exprese BCL-2 v dif. dg. folikulární lymfom x folikulární hyperplasie  Imunohistochemické stanovení proteinů regulujících apoptózu jako indikátorů prognózy (BCL-2 u karcinomu mléčné žlázy, stanovení laminu B u astrocytomů...)

40 Apoptóza v diagnóze a terapii a perspektivy výzkumu  Možné ovlivnění regulačních apoptotických drah pomocí genové terapie (v současnosti klinické studie s p53 např. u ca. plic…)  Komplexní analýza apoptotických regulačních drah u různých nádorů pomocí „apoptotických“ DNA chips (microarrays) a laserové mikrodisekce – nové klinické subjednotky = kvalitnější, cílenější léčba


Stáhnout ppt "Apoptóza Detekce Význam. Obsah  Definice, historie apoptózy  Morfologie apoptózy  Fáze a mechanizmy vzniku procesu apoptózy  Metody detekce apoptózy."

Podobné prezentace


Reklamy Google