Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Lubomír Kovář Mikrobiologický ústav AVČR v.v.i. Vídeňská 1083, Praha 4-Krč IMUNOGENNÍ SMRT NÁDOROVÝCH BUNĚK INDUKOVANÁ HPMA KONJUGÁTY.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Lubomír Kovář Mikrobiologický ústav AVČR v.v.i. Vídeňská 1083, Praha 4-Krč IMUNOGENNÍ SMRT NÁDOROVÝCH BUNĚK INDUKOVANÁ HPMA KONJUGÁTY."— Transkript prezentace:

1 Lubomír Kovář Mikrobiologický ústav AVČR v.v.i. Vídeňská 1083, Praha 4-Krč IMUNOGENNÍ SMRT NÁDOROVÝCH BUNĚK INDUKOVANÁ HPMA KONJUGÁTY.

2 Imunogenní vs. neimunogenní apoptóza

3 Obeid, Nat Med Apetoh, Nat Med Špíšek, Blood. 2007

4 Imunogenní vs. neimunogenní apoptóza Obeid, Nat Med Apetoh, Nat Med Špíšek, Blood. 2007

5 Imunogenní vs. neimunogenní apoptóza Obeid et al. 2007

6 Molekulární mechanismy imunogenní apoptózy Zitvogel et al. 2008

7 Dox-HPMA AM Dox-HPMA HYD Dox=doxorubicin; HPMA=N-(2-hydroxypropyl)metakrylamid HPMA konjugáty

8 Protinádorová imunita indukovaná HPMA konjugáty Říhová et al, Trends Biotechnol :11-7 Retransplantace myší vyléčených konjugátem Dox-HPMA HYD. Dox-HPMA HYD (1 x 25 mg Dox. eq./kg) Dox-HPMA HYD (1 x 75 mg Dox. eq./kg) volný doxorubicin (3 x 6 mg/kg) kontrola

9 Protinádorová imunita indukovaná HPMA konjugáty Říhová et al, Trends Biotechnol :11-7 Retransplantace myší vyléčených konjugáty Dox-HPMA AM a Dox-HPMA AM -HuIg. Dox-HPMA AM Dox-HPMA AM -HuIg kontrola

10 Plazmatická membrána CRT ERp57 CD47 β-actin Buněčný lyzát CRT ERp57 CD47 β-actin Kontrola Dox Dox-HPMA HYD Dox-HPMA AM Dox-HPMA-HuIg AM Imunogenní apoptóza – kalretikulin (CRT)

11 p-eIF2a; 3h p-eIF2a; 5h eIF2α Kontrola Dox Dox-HPMA HYD Dox-HPMA AM Dox-HPMA-HuIg AM Imunogenní apoptóza – kalreticulin (CRT)

12 Přerušovaná čára ukazuje míru exprese kalretikulinu po inkubaci buněk s konjugátem Dox-HPMA AM.

13 Imunogenní apoptóza – heat shock proteins (HSP)

14

15 HMGB1, supernatant, 24h HMGB1, supernatant,72h β -aktin, supernatant, 72h HMGB 1, lyzát, 72h Kontrola Dox Dox-HPMA HYD Dox-HPMA AM Dox-HPMA-HuIg AM Imunogenní apoptóza – HMGB1 Uvolňování High-mobility-group box 1 (HMGB1) proteinu z EL4 buněk.

16 Dox-HPMA AM -HuIg KontrolaDoxorubicinDox-HPMA HYD Dox-HPMA AM Hoechst h 24h; aCRT CFSE In vitro fagocytóza nádorových buněk Gated on CD11c+ dendritic cells

17 CD8 α PBS KontrolaDoxorubicin Dox-HPMA HYD Dox-HPMA AM Dox-HPMA AM -HuIg CFSE In vivo fagocytóza nádorových buněk Gated on CD11c+ dendritic cells

18 In vitro fagocytóza nádorových a nenádorových buněk

19 In vivo indukce protinádorové odpovědi (Winnův test)

20 Závěr

21 ·Volný a hydrazonově vázaný doxorubicin stimulují expresi kalretikulinu a HSPs a uvolnění HMGB1.

22 Závěr ·Volný a hydrazonově vázaný doxorubicin stimulují expresi kalretikulinu a HSPs a uvolnění HMGB1. · Amidicky vázaný doxorubicin stimuluje jen expresi HSPs.

23 Závěr ·Volný a hydrazonově vázaný doxorubicin stimulují expresi kalretikulinu a HSPs a uvolnění HMGB1. · Amidicky vázaný doxorubicin stimuluje jen expresi HSPs. · Nádorové buňky inkubované s volným, hydrazonově i amidicky vázaným doxorubicinem jsou fagocytovány dendritickými buňky.

24 Závěr ·Volný a hydrazonově vázaný doxorubicin stimulují expresi kalretikulinu a HSPs a uvolnění HMGB1. · Amidicky vázaný doxorubicin stimuluje jen expresi HSPs. · Nádorové buňky inkubované s volným, hydrazonově i amidicky vázaným doxorubicinem jsou fagocytovány dendritickými buňky. · HPMA vázaný doxorubicin je lepší stimulátor protinádorové imunity než volný

25 Závěr Volný doxorubicin HPMA vázaný doxorubicin

26 Závěr Volný doxorubicin lepší stimulátor imunogenní apoptózy in vitro HPMA vázaný doxorubicin

27 Závěr Volný doxorubicin lepší stimulátor imunogenní apoptózy in vitro HPMA vázaný doxorubicin lepší induktor protinádorové imunity in vivo

28 Mikrobiologický ústav AVČR, v.v.i. Blanka Říhová Marek KovářOndřej Hovorka Milada ŠírováDavid Větvička Jakub TomalaMartina Kabešová Pavlina JungrováHelena Mišurcová Ústav makromolekulární chemie AVČR, v.v.i. Karel Ulbrich Tomáš Etrych Dana Plocová Petr ChytilJiří Strohalm Michal Pechar Vladimír Šubr Martin HrubýMartin Studenovský


Stáhnout ppt "Lubomír Kovář Mikrobiologický ústav AVČR v.v.i. Vídeňská 1083, Praha 4-Krč IMUNOGENNÍ SMRT NÁDOROVÝCH BUNĚK INDUKOVANÁ HPMA KONJUGÁTY."

Podobné prezentace


Reklamy Google