Stanovení genotypu a aktivity alkohol dehydrogenasy z krve

Slides:



Advertisements
Podobné prezentace
Aldehydy a ketony.
Advertisements

Imobilizace a stabilizace enzymů.
Karbonylové sloučeniny
DERIVÁTY UHLOVODÍKŮ ALKOHOLY A FENOLY.
METABOLISMUS A HLAVNÍ MECHANISMY TOXICITY CIZORODÝCH LÁTEK
Hydroxyderiváty a sulfanylderiváty
Názvosloví.
Vypracovala : Filipa Pašková
Metabolismus A. Navigace B. Terminologie E. Sacharidy I. Enzymy
Využití multimediálních nástrojů pro rozvoj klíčových kompetencí žáků ZŠ Brodek u Konice reg. č.: CZ.1.07/1.1.04/ Předmět: Chemie Ročník: 9.
Lipidy estery alkoholů a vyšších mastných kyselin
Lipidy estery alkoholů a vyšších mastných kyselin.
Název Karboxylové kyseliny II Předmět, ročník Chemie, 2. ročník
Detoxikace endogenních a exogenních látek
Biotransformace xenobiotik
Funkce cytochromů P450, farmakogenetika
Interakce toxické látky s organismem
LIPIDY.
Kyslíkaté deriváty Aktivita č. 6: Poznáváme chemii Prezentace č. 28
Metabolismus A. Navigace B. Terminologie E. Sacharidy I. Enzymy
Alkoholy a Fenoly.
KARBONYLOVÉ SLOUČENINY
Organické sloučeniny obsahující síru
Alkoholy a fenoly.
Hydroxyderiváty alkoholy fenoly Nestálá uspořádání - enol formy
Stanovení genotypu a aktivity alkohol dehydrogenasy z krve
HYDROXYSLOU Č ENINY ALKOHOLY FENOLY –OH obsahují ve své molekule –OH skupinu tzv. hydroxylová skupina O H polární charakter vazby δ-δ- δ+δ+ v ůč i silným.
KYSLÍKATÉ DERIVÁTY UHLOVODÍK Ů ve svých molekulách obsahují vedle atomů ………. a ………. ještě atom ………. atom kyslíku: elektronová konfigurace : 1s 2 2s 2 2p.
Metabolismus lipidů.
ALDEHYDY KETONY Vlastnosti Zástupci Formaldehyd Acetaldehyd
JÁTRA Trávicí soustava.
Karboxylové kyseliny.
Rozdělení organických sloučenin a reakce v organické chemii
METABOLISMUS LIPIDŮ.
Bílkoviny a jejich význam ve výživě člověka
Karboxylové kyseliny Petra Ustohalová.
Biotransformace xenobiotik ____________
Soubor prezentací: CHEMIE PRO III. ROČNÍK GYMNÁZIA
Biotransformace cizorodých látek
Karboxylové kyseliny látky, které obsahují ve své molekule - C - OH Názvosloví Alkan Alken Alkyn Aren + ová kyselina.
Bioenergetika Pro fungování buněčného metabolismu nutný stálý přísun energie Získávání, přenos, skladování, využití energie Na co se energie spotřebovává.
INTERMEDIÁRNÍ METABOLISMUS
Cukry Alice Skoumalová.
Metabolismus xenobiotik
VYUŽITÍ BIOMARKERŮ V PREVENCI NÁDOROVÝCH ONEMOCNĚNÍ A V OBLASTI VEŘEJNÉHO ZDRAVÍ Prostředí Zdravotní stav BIOMARKERY Genetické vybavení.
ENZYMY 2. FÁZE BIOTRANSFORMACE:
Výukový materiál zpracován v rámci projektu EU peníze školám Registrační číslo projektu: III/2VY_32_inovace_151.
Toxikokinetika Luděk Bláha, PřF MU.
Karboxylové kyseliny.
Pokuste se vlastními slovy definovat karboxylové kyseliny: Karboxylové kyseliny jsou organickými kyselinami (zároveň kyslíkatými deriváty, které ve.
Úvod do chemie organických sloučenin
Farmakogenetika Cíl Na základě interdisciplinárního integrace znalostí farmakologie a genetiky popsat vliv dědičnosti na odpověď organismu.
Veterinary Research Institute, Brno, Czech Republic XENOBIOCHEMIE - SYLLABUS VÝBĚROVÝCH PŘEDNÁŠEK Miroslav Machala Výzkumný ústav veterinárního lékařství.
Autorem materiálu a všech jeho částí, není-li uvedeno jinak, je Mgr. Michal Kapoun. Dostupné z Metodického portálu ISSN: , financovaného.
Z LEPŠOVÁNÍ PODMÍNEK PRO VÝUKU TECHNICKÝCH OBORŮ A ŘEMESEL Š VEHLOVY STŘEDNÍ ŠKOLY POLYTECHNICKÉ P ROSTĚJOV REGISTRAČNÍ ČÍSLO CZ.1.07/1.1.26/
ŠTĚPENÍ SACHARIDŮ PŘI TRÁVENÍ POTRAVY. METABOLISMUS SACHARIDŮ.
Cukry Alice Skoumalová.
METABOLISMUS NIKOTINU U ČLOVĚKA
Zjišťování výživových zvy 2.10.
Detoxikace endogenních a exogenních látek
Detoxikace endogenních a exogenních látek
Výskyt a příprava karboxylových kyselin
Kyslíkaté deriváty uhlovodíků - hydroxyderiváty
Názvosloví hydroxyderivátů a sulfanylderivátů
Sacharidy Lipidy Bílkoviny Nukleové kyseliny Buňka
Inovace bakalářského studijního oboru Aplikovaná chemie
NAUKA O POVAZE A MECHANISMU ÚČINKŮ CHEMICKÝCH LÁTEK
25_Speciální metabolické dráhy
Organická chemie Martin Vejražka.
Aldehydy a ketony Eva Urválková Lucie Vávrová
Transkript prezentace:

Stanovení genotypu a aktivity alkohol dehydrogenasy z krve

Xenobiotika (xenos = cizí) normálně se v organismu nevyskytují nejsou nutné pro jeho zdravý vývoj neslouží pro organismus jako zdroj energie. Primárním zdroje xenobiotik chemický průmysl (PAH, PCB, benzen, fenoly, ....) kouření (PAH, aromatické aminy, ….) jídlo a alkohol (PAH, arylaminy, heterocyklické a aromatické aminy, .…) aflatoxiny

Xenobiotikum Silně lipofilní Lipofilní Polární Hydrofilní Akumulace v tukové tkáni Fáze biotransformace aktivace/inaktivace oxidace, redukce, hydrolýza 2. Fáze biotransformace aktivace/inaktivace konjugační reakce Polární Hydrofilní Extracelulární tekutiny – exkrece játry, ledvinami

1. fáze biotransformace Nejčastější reakce je oxidace katalyzovaná: zavedení polární funkční skupiny do molekuly lipofilní látky - OH, -NH2, -SH, = CO, - COOH reakce 1. fáze biotransformace: oxidace, redukce, hydrolýza během 1. fáze biotransformace může docházet jak ke snížení tak ke zvýšení toxicity Nejčastější reakce je oxidace katalyzovaná: cytochrom P - 450 (CYP450) alkoholdehydrogenáza (ADH) monoaminoxidázy a diaminoxidázy (MAO)

Cytochrom P450 skupina membránově vázaných hemo-proteinů obsahujících atom Fe3+ nachází se především v hladkém endoplazmatickém retikulu jaterních buněk účastní se metabolizmu endogenních látek i xenobiotik nespecifickým enzym Schéma oxidace pomocí CYP450 + O2 + NADPH + H+ + H2O + NADP

Oxidace katalyzované CYP450 Hydroxylace alifatických a aromatických uhlovodíků (benzén a jeho deriváty, PAHs, aflatoxiny, alkany, PCB) Epoxidace nenasycené dvojné vazby (styrén, vinylchlorid) Hydroxylace aminů (anilin) -O, -N a –S dealkylace Dehalogenace (PCB, formaldehyd, dibenzodioxiny, dibenzofurany)

Pokles aktivity nese vyšší riziko CYP1A1 CYP1A2 CYP1B1 CYP3A4 CYP2C Pokles aktivity má protektivní účinek B(a)P CYP1A1 CYP1A2 CYP1B1 CYP3A4 CYP2C CYP1A1 CYP1A2 CYP1B1 2,3-epoxid 4,5-epoxid 9,10-epoxid 7,8-epoxid 1-OH 3-OH 6-OH 7-OH 9-OH Fenoly 9-OH-4,5-oxid EH EH EH DNA adukty 9-OH-4,5-diol 4,5-diol 9,10-diol 7,8-diol GSTM1 GSTP1 CYP1A1 CYP1A2 CYP1B1 DNA adukty 7,8-diol-9,10-epoxid Glutathion-konjugáty GSTA1 GSTM1 GSTP1

(Alkohol dehydrogenáza) (Aldehyd dehydrogenáza) Oxidace alkoholu katalyzovaná enzymy alkohol dehydrogenáza (ADH) a aldehyd dehydrogenáza (ALDH) ethanol Kataláza + H2O2 - H2O NAD+ ADH (Alkohol dehydrogenáza) CYP2E1 NADH + H+ acetaldehyd NAD+ ALDH (Aldehyd dehydrogenáza) NADH + H+ k. octová

Zkoumané polymorfismy ADH1B (48 R/H) Studie ukázaly, že jedinci nesoucí alelu 48 H/H mají silně zvýšenou aktivitu ADH. ADH1C (349 F/I) Studie ukázaly, že jedinci nesoucí alelu 350 I/I mají zvýšenou aktivitu ADH. Genotypy budou analyzovány pomocí PCR a restrikční analýzy Restriktáza HhaI rs1229984 - ADH1B*48His      rs1229984F: GGTGGCTGTAGGAATCTGGC rs1229984R: TTGACTGTAGTCACCCCTTCT   Restriktáza SspI rs698 - ADH1C*349Ile rs698F: GGCTAAGAAGTTTTCACTGGA rs698R: GCCGCTACTGTAGAATACAAAG

Měření aktivity p-nitrosodimethyl anilin + NADH ----------- ???? Pyrazol – inhibitor reakce

2. fáze biotransformace Xenobiotikum se přes polární funkční skupinu navázanou v první fázi váže na vysokomolekulární endogenní konjugační činidlo Konjugát má obvykle menší biologickou aktivitu, vyšší rozpustnost ve vodě a vyšší molekulovou hmotnost než původní látka (metabolit z 1. fáze) Obvyklé konjugační reakce: konjugace s k. glukuronovou sulfátová konjugace glycinová konjugace acetylace (N-acetyltransferáza) metylace glutathionová konjugace (Glutathion-S-transferáza) Obvyklé konjugační reakce: konjugace s k. glukuronovou sulfátová konjugace glycinová konjugace acetylace metylace glutathionová konjugace

Acetylace pomocí N-acetyltransferáz (NAT1 a NAT2) důležitá metabolická cesta pro látky obsahující aminoskupinu ve své molekule arylaminy, heterocyklické a aromatické aminy, atd.

NAT DAC Arylamin N-acetamid CYP1A2 CYP1A2 hydroxylacetylamin hydroxylamin OAT NOAT OAT NAT DAC N-acetoxy-ester N-acetyl-acetoxy-ester Nitréniový ion

Konjugační reakce s glutathionem katalyzovaná Glutathion-S-transferázou (GST) největší význam má membránově vázaná GST, protože se vyskytuje v blízkosti CYP450 GST + GSH = Glutathion (GSH) Glu Cys Gly