RADIOIMUNOANALÝZA Týden vědy na FJFI 2017 Nela Hrobařová, Filip Jozefov, Václav Löffelmann, Janka Motešická, Martin Osowski, Zuzana Petrová
Obsah Co je to radioimunoanalýza? Na jakém principu funguje? Jaké využívá metody? Co jsme dělali my?
Historie 1959 – objev radioimunoanalýzy 1977 – Nobelova cena Rosalyn S. Yalow
Princip a specifika Základ - imunochemická reakce antigenu se specifickou protilátkou, prováděná in vitro pomocí vhodné radioaktivně značené sloučeniny jako radioindikátoru Vysoká citlivost metody Radioaktivní látky v procesu Možno automatizovat Nákladné přístroje
IRMA Popis první a druhé fáze Celkový průběh
Postup 8 zkumavek (T, K1 – K5/K6, C) T: kontrolní K1 – K5/K6: kalibrátory se známou koncentrací C: neznámý vzorek Přidáno: 50 µl kalibrátoru, vzorku 200 µl radioindikátoru, značený 125I 2 ml promývacího roztoku
Naměřené hodnoty Alfafetoprotein (AFP) koncentrace (UI/ml) 1. měření (cps) 2. měření (cps) 3. měření (cps) průměr (cps) vazebnost (%) K1 2 1 - K2 4,9 12 14,0 13,0 2,32 K3 20,4 36 35,0 36,0 35,7 6,38 K4 90,0 125 127,0 121,0 124,3 22,26 K5 218,0 137 135,0 135,7 24,26 C 22 22,0 19,0 T 558 555,0 562,0 558,3
Výsledky skupiny 1 – Alfafetoprotein (AFP) Výpočet koncentrace C: (y+9,422) / 14,775 = x X = 7,244 UI/ml
Naměřené hodnoty lidský choriogonadotropin (hCG) koncentrace (IU/ml) 1. měření (cps) 2. měření (cps) 3. měření (cps) průměr (cps) Vazebnost (%) K1 2 1 0,13 K2 8,2 5 0,66 K3 27,4 10 11 10,33 1,36 K4 82 19 17 18,33 2,41 K5 274 84 85 84,33 11,10 K6 820 227 232 230 229,67 30,23 C - 12 13 12,33 T 755 766 758 759,67
Výsledky skupiny 2 – lidský choriogonadotropin (hCG) Výpočet koncentrace C: x = (y – 0,209)/0,0368 x = 38,44 UI/ml
Poděkování Děkujeme FJFI ČVUT za poskytnutí možnosti experiment provést. Také děkujeme Bc. Michalu Sakmárovi za vedení projektu.
Děkujeme za vaši pozornost