Restrikční mapování
Účel restrikčního mapování zjistit rozložení restrikčních míst ve fragmentu DNA za pomoci restrikčních endonukleáz BglII EcoRI BglII EcoRI BamHI HindIII BamHI EcoRI BamHI EcoRI EcoRI HindIII BamHI EcoRI EcoRI
Dva základní přístupy štěpení dvojicemi restriktáz parciální štěpení jednotlivými enzymy
Štěpení dvojicemi enzymů 1 koncové značení rozštěpení a izolace jednoho z řetězců štěpení EcoRI štěpení BamHI
Štěpení dvojicemi enzymů 2 + + + _ _ _
Štěpení dvojicemi enzymů 3 A G C H E J D F B I štěpení BamHI štěpení EcoRI 1 1 2 A G 2 3 3 4 C H 4 5 5 6 E J 6 7 8 7 F D 9 8 9 B I
Štěpení dvojicemi enzymů 4 + + + _ _ _
Štěpení dvojicemi enzymů 5 1 …..A,G 2 …..G,C A C E D B 3 …..C,H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 4 …..H,E 5 …..E,J 6 …..J,D G H J F I 7 …..D,F 8 …..D,I 9 …..I,B
Mapování pomocí parciální digesce 1 koncové značení rozštěpení a izolace jednoho z řetězců parciální digesce elektroforéza a autoradiografie
Mapování pomocí parciální digesce 2 + + + _ _ _ elektroforetogram autoradiogram
Využití metody „sekvenování chudých“ kvalitní znaková data v případě vhodně dlouhých fragmentů velmi efektivní metoda umožňuje odhadnout polaritu evolučních změn pro velký počet vzorků ideální v kombinaci se sekvenováním