VLIV ANTROPOGENNÍ ČINNOSTI NA ÚROVEŇ EKOTOXICITY ZNEČIŠTĚNÍ PŮD OSTRAVSKÁ UNIVERZITA V OSTRAVĚ

Cíl řešení Stanovení vlivu antropogenní činnosti na kvalitu půd za pomocí biologických testů toxicity a genotoxicity

Práce provedené v roce 2008 Vypracování rešerše zabývající se vytyčenou problematikou, srovnání různých přístupů hodnocení Ověření vybrané metodiky stanovení akutní toxicity na žížalách Eisenia foetida Ověření metody stanovení inhibice aktivity enzymu AChE

Terestrické biotesty půdní mikroorganismy vyšší rostliny V současné době se v půdní ekotoxikologii využívají: půdní mikroorganismy vyšší rostliny půdní bezobratlí

Testy toxicity na žížalách Žížaly - tvoří 60-80% celkové biomasy - úzký kontakt s půdou - bioakumulační schopnost - výskyt v různých typech půd - typičtí geobionti

Testy toxicity na žížalách Nejvíce používaný druh - Eisenia foetida Výhoda - snadný chov v laboratorních podmínkách - krátký generační čas - vysoký generační potenciál

End-points Mortalita Vliv na reprodukci Vyhodnocování chování Malformace Měření enzymových aktivit

Stanovení AChE Acetylcholinesteráza – enzym ukončující působení neurotransmiteru acetylcholinu Produkci AChE inhibují těžké kovy, různé organické sloučeniny

Testy genotoxicity Bakteriální testy mutagenity – poskytují základní informaci o mutagenním působení sledované látky Pro detekci látek s genotoxickými účinky se nejčastěji využívají Amesův test a SOS chromotest Pro modelování metabolických změn se využívá metabolická aktivace in vitro S9 postmitochondriální frakcí

Lužická Nisa Chrastava – Barandov 50°48'50.768"N, 14°56'51.567"E.

Výsledky Vzorek byl testován v osmi opakováních Negativní kontrola ve čtyřech opakováních Do každé testovací nádoby bylo umístěno 10 žížal Test probíhal 14 dní Ve všech kontrolách i ve všech vzorcích nebyla detekována toxicita

Vzorek Absorbance bílkovin při 595 nm Množství bílkoviny ve vzorku g/l AChE v čase 3 min v čase 0 min Rozdíl hodnot absorbancí AChE/bílkovina mol/min/mg K1 1,009 61,40384615 0,614 0,49 0,124 1,401042722 K2 1,075 74,09615385 0,421 0,343 0,078 0,704569396 K3 1,027 64,86538462 0,61 0,391 0,219 2,403167018 K4 1,252 108,1346154 0,507 0,336 0,171 1,115167746 K5 0,949 49,86538462 0,604 0,394 0,21 2,993353145 K6 0,978 55,44230769 0,75 0,386 0,364 4,734651405 K7 1,234 104,6730769 0,564 0,38 0,184 1,243367088 K8 1,005 60,63461538 0,689 0,411 0,278 3,286319285 P1 1,256 108,9038462 0,908 0,454 3,018042817 P2 1,325 122,1730769 0,919 0,479 0,44 2,605994389 P3 0,985 56,78846154 0,728 0,428 0,3 3,793749129 P4 0,895 39,48076923 1,081 0,521 0,56 10,29913183 P5 1,168 91,98076923 0,615 0,47 0,145 1,103171773 P6 1,025 64,48076923 0,93 0,535 0,395 4,424483781 P7 1,034 66,21153846 0,858 0,51 0,348 3,786882165 P8 0,98 55,82692308 1,164 0,611 0,553 7,19134364 P9 0,855 31,78846154 0,943 0,568 0,375 8,512152592 P10 1,047 68,71153846 1,04 0,351 7,298200556 P11 1,138 86,21153846 0,393 0,287 0,106 0,844366299 P12 0,889 38,32692308 0,613 0,327 0,286 5,352557481 P13 1,156 89,67307692 0,758 0,354 0,404 3,255288819 P14 1,203 98,71153846 0,902 0,372 0,53 3,895783913 P15 0,988 57,36538462 0,808 0,369 0,439 5,537260161 P16 0,823 0,426 0,397 3,19789078 P17 0,963 52,55769231 0,554 0,341 0,213 2,881987043

Výsledky Stanovení AChE Průměrná aktivnost v kontrole 2,57 mol/min/mg Průměrná aktivnost v půdě 4,45 mol/min/mg Ve vzorku půdy nebyly obsaženy látky, které vyvolávají inhibici produkce enzymu AChE

Návrh prací pro rok 2009 Monitoring toxických účinků škodlivin vzorků půd a dnových sedimentů stanovením akutní toxicity na žížalách Eisenia foetida a stanovením inhibice aktivity enzymu AChE Monitoring genotoxických účinků škodlivin vzorků půd a dnových sedimentů, u kterých byla detekována toxicita kontaktním testem na žížalách, pomocí Amesova testu a SOS chromotestu

DĚKUJI ZA POZORNOST