Imunocytologická charakteristika neoplázií z T-linie D. Starostka, P. Mikula, L. Novosadová Oddělení klinické hematologie Nemocnice s poliklinikou Havířov, p.o.

cCD3+, CD7+, TdT+ CD4-CD8- CD3

Antigeny T-lymfocytu Marker Struktura Funkce CD1a Transmembránový glykoprotein, 49 kDa Prezentace nepeptidových glykolipidových antigenů CD2 Transmembránový glykoprotein, 50 kDa CD58 ligand, aktivace T-ly, signální role, adhese CD3 CD3/TCR komplex Rozpoznání antigenu, signální transdukce, aktivace CD4 Transmembránový glykoprotein, 55 kDa Rozpoznání antigenu ve spojení s MHC II, diferenciace v thymu, signální transdukce, primární HIV-receptor CD5 Glykoprotein, 67 kDa CD72 ligand, signální dráhy, vyzrávání thymocytu, mezibuněčné T-B interakce CD7 Transmembránový glykoprotein, 40 kDa Influx kalcia, sekrece cytokinů, adhese CD8 Glykoprotein, 32-34 kDa Rozpoznání antigenu ve spojení s MHC I, aktivace, diferenciace v thymu TCR TdT Intranukleární marker Enzymatická role

Profil antigenní exprese během diferenciace T-lymfocytu Pro-thymocyt Subkapsulární thymocyt Korový thymocyt Dřeňový thymocyt Periferní T-lymfocyt Neoplasie Prekursorové T-ALL/LBL Periferní zralé T-neoplasie CD7 CD2 CD5 CD3 CD1 CD8 CD4 TdT

Malignity z T-linie Definované entity s heterogenními fenotypovými znaky (WHO klasifikace) Vzácný výskyt s geografickou diferencí (rasová predispozice) HTLV-1, EBV Většinou agresivní průběh Problematické jednoduché stanovení klonality v T-linii Omezený význam cytogenetiky (T-ALL, T-PLL, ALCL) Molekulární genetika (TCR)

Monoklonalita v T-linii Délka trvání lymfocytosy Aberantní nebo uniformní imunofenotyp Výrazně porušený poměr CD4/CD8 Typ TCR, vyšetření variabilních regionů TCR-beta Klonální cytogenetické a molekulárně genetické změny

Imunofenotyp T-neoplázií T-ALL/LBL TdT+, variabilní exprese CD1a, CD2, CD7, CD5, CD4 a CD8, nejčastěji cytCD3 a CD7, často koexprese CD13 a CD33 T-PLL TdT-, CD1-, CD2+, CD3+/-, CD7+, CD5+, 60% CD4+CD8-, 25% CD4+CD8+, 13% CD4-CD8+, 2% CD4-CD8- T-LGL 80% CD3+, CD4-, CD8+, TCR alfa/beta+ 20% CD3+, CD4+, CD8-, TCR alfa/beta+ nebo CD3+, CD4+, CD8+,TCR alfa/beta+ nebo CD3+TCR gama/delta+ s variabilní expresí CD4 a CD8 variabilní exprese CD11b, CD56 a CD57 ATLL CD2+, CD3+, CD5+, CD7-, CD25+ většinou CD4+CD8-, vzácně CD4-CD8+ či CD4+CD8+ Mycosis fungoides/Sézaryho syndrom CD2+, CD3+, CD5+, CD7+/-, CD4+,TCRb+ vzácně CD8+ Hepatosplenický T- lymfom CD2+, CD3+, CD5-, CD7+, CD4-, CD8-, CD56+/-, TCR g/d velmi vzácně TCR a/b

Imunofenotyp T-neoplázií Extranodální NK/T-buněčný lymfom, nazální typ CD2+, sCD3-, icCD3+, CD56+, vzácně CD7+, CD30+ CD4-, CD5-, CD8- T-buněčný lymfom asociovaný s enteropatií CD3+, CD7+, CD5-, CD4-, CD8-/+, CD103+, CD56+ Podkožní panniculitis-like T-buněčný lymfom CD3+, CD2+, CD7+, CD5+, CD8+ Primární kožní CD30+ T-lymfoproliferace C-ALCL: CD4+, CD30+, variabilní exprese CD2, CD3 a CD5 Lymfomatoidní papulosa: jako C-ALCL, vzácně CD8+ Periferní T-buněčný lymfom blíže nespecifikovaný nejčastěji CD4+, méně CD4+CD8+, CD8+, CD56+, variabilní exprese CD5,7 Angioimunoblastický T-buněčný lymfom CD2+, CD3+, CD5+, CD4+ Anaplastický velkobuněčný lymfom (T-cell/null-cell fenotyp, ALK+/-) CD2+, CD5+, CD4+ 70%, CD3-, vzácně CD8+ CD30+ u ALK- CD3+

T-neoplázie na OKH NsP Havířov 1998-2008 (n=24) T-ALL 1 T-PLL 3 T-LGLL 6 Mycosis fungoides 2 Sézaryho syndrom Hepatosplenický lymfom Angioimunoblastický T-buněčný lymfom Periferní T-buněčný lymfom nespecifikovaný Anaplastický velkobuněčný lymfom Monoklonální T-lymfocytosa nejasného významu

Shodný imunofenotyp neznamená stejnou morfologii et vice versa CD4+ T-lymfomy

CD2+ CD3+ CD5+ CD7-/+ CD4+

CD3+ CD5+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD4+ CD30+

Molekulární genetika: mutovaný status IgVH genu (podrodina 3-21 ) klonální rearanže TCR delta Závěr: B-CLL (Matutes 4/5) s koexpresí CD8 „bifenotypová CLL“

Závěry Komplexní přístup v rámci WHO klasifikace – obtížná diagnostika, panel expertů Synergický diagnostický efekt jednotlivých modalit Imunocytologický nález doplňuje názor patologa Výrazná cytomorfologická variabilita T-lymfomů se specifickými rysy některých entit Nezastupitelné místo FCM imunofenotypisace zejména u leukemi- sovaných procesů (snadná dostupnost materiálu, rychlost, široký rozsah vyšetřených antigenů) Problematické FCM stanovení klonality v T-linii zejména u nevý- razných patologií Molekulární genetika na rearanži genu pro TCR

CD3+ CD8+

T-PLL T-LGL leukémie Sézaryho syndrom Reaktivní T-lymfocytosa

Děkuji za pozornost !