Laboratorní diagnostika

Slides:



Advertisements
Podobné prezentace
Radioimunoesej, enzymoimunoesej – princip, využití
Advertisements

Průtoková cytometrie.
Vyšetření parametrů buněčné imunity
Vyšetření specifické imunity
Vyšetřování parametrů humorální imunity
Somatologie Mgr. Naděžda Procházková
Laboratorní diagnostika
Řízení imunitního systému Kurs Imunologie. Hlavní histokompatibilní systém (MHC) objeven v souvislosti s transplantacemi starší termín: HLA dvě hlavní.
SÉROLOGICKÉ REAKCE reakce mezi antigenem a protilátkou význam in vivo
Metody imunodifuze a precipitace v gelech
Imunochemické metody řada metod založených na principu reakce:
Laboratorní diagnostika
VYUŽITÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE V DIAGNOSTICE ALERGICKÝCH ONEMOCNĚNÍ
HIV Vypracoval: David Pospíšil Obor: Technické lyceum Třída: 1L Předmět: Biologie Školní rok: 2015/16 Vyučující: Mgr. Ludvík Kašpar Datum vypracování:
Alergie a přecitlivělost Kurs Imunologie. Definice Alergie – zvýšená imunitní odpověď (často zánětlivá) na antigeny z vnějšího prostředí (alergeny) která.
Prvky a směsi Autor: Mgr. M. Vejražková VY_32_INOVACE_05_ Dělící metody Vytvořeno v rámci projektu „EU peníze školám“. OP VK oblast podpory 1.4 s názvem.
Je hypoglutaminemie po polytraumatu limitující pro proliferaci lymfocytů? F. Duška, A. Pompachová, P. Kučera, M. Fric, J.Pachl KAR a Odd. klinické imunologie.
Název školy: ZÁKLADNÍ ŠKOLA SADSKÁ Autor:Mgr. Jiří Hajn Název DUM:Krev Název sady:Přírodopis – lidské tělo Číslo projektu:CZ.1.07/1.4.00/ – VY_32_Inovace_
NÁZEV ŠKOLY: ZŠ J. E. Purkyně Libochovice AUTOR: RNDr. Adéla Lipšová NÁZEV: VY_52_INOVACE_08_FAKTORY OVLIVŇUJÍCÍ RYCHLOST CHEMICKÉ REAKCE TÉMA: FAKTORY.
Inf Tabulkový procesor - funkce. Výukový materiál Číslo projektu: CZ.1.07/1.5.00/ Šablona: III/2 Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím ICT.
Laboratorní diagnostika
Vyšetření specifické imunity
Číslo projektu CZ.1.07/1.5.00/ Číslo materiálu VY_32_INOVACE_04-14
IMUNITA VY_32_INOVACE_ září 2013
ZÁKLADNÍ ŠKOLA SADSKÁ Název školy: Autor: Mgr. Jiří Hajn Název DUM:
Základní škola a Mateřská škola Bílá Třemešná, okres Trutnov
Financováno z ESF a státního rozpočtu ČR.
FAGOCYTÓZA II Mgr. Olga Tichá, LF MU.
Základní škola a mateřská škola J.A.Komenského
Krev - opakování.
Zlepšování podmínek pro výuku technických oborů a řemesel Švehlovy střední školy polytechnické Prostějov registrační číslo CZ.1.07/1.1.26/
RADIOIMUNOANALÝZA Týden vědy na FJFI 2017
Ústav klinické imunologie a alergologie
SOUSTAVA KREVNÍHO OBĚHU U/33
Vyšetřování parametrů humorální imunity
Ústav klinické imunologie a alergologie
Ústav klinické imunologie a alergologie
Počítání krevních buňek
Vyšetřování parametrů buněčné imunity
ELEKTROTECHNICKÉ MATERIÁLY
Základní škola, Hradec Králové
C1200 Úvod do studia biochemie 2.1 Biochemická diagnostika
KINETICKÁ TEORIE STAVBY LÁTEK.
MUDr. Martina Vachová 31. Imunoglobuliny - struktura 32
Příklady flexibility v imunologii
Sekvencování DNA.
Náplň seminářů III. ročník všeobecné lékařství
Kultivace hematopoetických buňek
Lékařská mikrobiologie pro ZDRL
Koncepce předmětu spec. imunolog. metody Bi 9250C, zimní semestr 2016
Laboratorní diagnostika
Komplementfixace (KFR, téma J08)
Výsledky měření ozonu pasivními dosimetry Ogawa
Vyšetření parametrů buněčné imunity
Laboratory diagnostics
Úvod do imunologie Martin Liška.
Laboratory diagnostics
Laboratory diagnostics
CYTOPLAZMATICKÁ MEMBRÁNA.
IMUNOESEJE.
Zánět
princip extrakce DNA (jahody)
Čistírna odpadních vod
Imunofluorescence Nepřímá Přímá slouží k průkazu protilátek (Ab)
Metody Fagocytózy   - vyšetření zahrnuje:  krevní diferenciál - % zastoupení LEU  izolace LEU  stanovení funkce LEU   4 skupiny testů na fagocytózu:

Laboratorní diagnostika
Charakterizace slepičích protilátek proti sarkosinu
Název projektu: ZŠ Háj ve Slezsku – Modernizujeme školu
Protilátky využívané v diagnostice Monoklonální protilátka – je produkována klonem buněk pocházejících z jedné plazmatické buňky; váže se velmi specificky.
Transkript prezentace:

Laboratorní diagnostika Doporučený zdroj ke studiu: WWW.E-LABMED.CZ

Stanovení humorálních analytů Precipitace Aglutinace Turbidimetrie Nefelometrie

Imunoprecipitace Srážení - proces, při němž dochází interakcí antigenu a protilátky ke vzniku (imuno)precipitátu. Vzhledem k tomu, že protilátky mají v molekule nejméně dvě identická vazebná centra pro daný antigen, mohou při vhodném koncentračním poměru obou partnerů vznikat polymerní, nerozpustné a snadno detekovatelné komplexy. Tohoto principu využívá celá řada imunochemických metod ke kvalitativnímu i kvantitativnímu stanovení antigenů nebo jim příslušných protilátek.

- vznik nerozpustného precipitátu při reakci ekvivalentních koncentrací rozpustného antigenu s rozpustnou protilátkou (tj. vzniká zesíťovaná struktura mnoha navzájem vázaných antigenů a protilátek, která již v roztoku není rozpustná)

Aglutinace Shlukování korpuskulárních částic s povrchovými antigenními strukturami v důsledku interakce se specifickou protilátkou. Antigenem jsou zde obyčejně buňky (bakterie, erytrocyty) nebo syntetické částice (např. latexové) s adsorbovanými antigeny. Tyto částice se působením protilátek shlukují a charakteristickým způsobem sedimentují; na základě vzniku zákalu lze takto stanovit i velmi nízké koncentrace protilátek (kolem 10 ng/ml). Na stejném principu fungují i citlivé testy pro stanovení antigenů.

Imunofixace vzorku séra zdravé osoby Legenda: sloupec 1: elektroforéza séra další sloupce: imunochemický průkaz jednotlivých těžkých a lehkých řetězců imunoglobulinů, je zřetelná polyklonální produkce

Stanovení humorálních analytů Precipitace Aglutinace Turbidimetrie Nefelometrie

Základní složky ELISA testu Antigen detekovaný v testovaném vzorku známý, komerčně připravovaný Protilátka detekovaná v testovaném séru známá, komerčně připravovaná Konjugát jedná se opět o protilátku proti protilátce (konkrétně proti druhově specifickým imunoglobulinům příslušného izotypu (IgG, IgM, IgA, IgE), na kterou je navázaný enzym (konjugovaná enzymem) Substrát je chemická látka, která reaguje s enzymem a tím změní svou barvu

ELISA – průkaz specifických protilátek

ELISA – průkaz antigenu

Klasická 96-jamková destička pro metodu ELISA

Nepřímá imunofluorescence

Stanovení parametrů buněčné imunity Počty buněk – subpopulace Testy fagocytózy Testy aktivace lymfocytů

fluorochrom je konjugován s primární protilátkou - analýza plné krve - průtoková cytometrie

„Gatování“ lymfocytů pomocí FS a SS

Stanovení celkových a pomocných T lymfocytů

Stanovení T a B lymfocytů

Stanovení aktivovaných lymfocytů (aktivační marker HLA-DR)

KLINICKY VÝZNAMNÉ POPULACE LEUKOCYTŮ CD3+ T lymfocyty: populace zralých T lymfocytů 50 - 75% CD4+ T lymfocyty: subpopulace pomocných induktorových T lymfocytů 30 - 60% CD8+ T lymfocyty: subpopulace tlumivých cytotoxických T lymfocytů 15 - 30% CD25+ T lymfocyty: aktivované T lymfocyty 1 - 5% CD19+ B lymfocyty: populace zralých B lymfocytů 5 - 15% CD56+ NK buňky: přirozeně zabíječské buňky 5 - 15% CD14+ buňky: monocyty CD15+ buňky: granulocyty CD38+ buňky: plazmatické buňky

FUNKČNÍ TESTY TESTOVÁNÍ FUNKCÍ T LYMFOCYTŮ IN VITRO je založeno na testování: schopnosti T lymfocytů proliferovat schopnosti T lymfocytů produkovat cytokiny PROLIFERACE T LYMFOCYTŮ: in vitro kultivace kultivační media (thymové působky) CO2 atmosféra

HODNOCENÍ FAGOCYTÁRNÍCH FUNKCÍ absolutní počet granulocytů je pro funkci fagocytózy kritický k testování fagocytózy se používají izolované granulocyty populace granulocytů je mimořádně citlivá na poškození nově lze hodnotit počty a funkce fagocytujících buněk průtokovou cytometrií

RAST

Aktivace bazofilů - exprese povrchového aktivačního markeru CD63

Přednášky k tématům laboratorní diagnostika AUTOPROTILÁTEK a vyšetření BUNĚČNÉ IMUNITY najdete na webu LF HK http://www.lfhk.cuni.cz/UKIA/