Mozkomíšní mok (likvor) M. Šolcová BIOHEMA 2012

Preanalytika vyšetření likvoru Odběr do sterilní zkumavky Dodání nejpozději do 1 h od odběru (x rozpad elementů, pokles glukózy, zvýšení laktátu) Současně odběr srážlivé krve Krvavý likvor odebrat postupně do 3 zkumavek a doručit do 10 minut (k vyšetření spektrofotometrie) Vzhled → fyziologicky: čirý, bezbarvý; u novor. xantochromní → patologicky: krvavý = erytrochromní (hodnocení supernantantu po centrifugaci), xantochromní; přítomnost fibrinové síťky

Chemické vyšetření likvoru Bílkovina (proteinorachie) – 200x nižší než v plazmě; 80 % ze séra, 20 % mozkového původu Glukóza (glykorachie) – dle glykémie, 60 % ze séra (u novorozenců 80 %), vyrovnání za 4h Laktát ~ negativní korelace s glykorachií Zhodnocení hematolikvorové bariéry (Q albuminu) Zhodnocení intratékální syntézy IgG, A, M (Reibrův graf) BTP = ß-trace protein (průkaz likvorey; 30x vyšší v CSF) Oligoklonální IgG (dg. RS = roztroušené sklerózy) Spektrofotometrie (stáří krvácení)

Reiberův graf 1 - normální nález 2 - izolovaná porucha hematolikvorové bariéry 3 - porucha hematolikvorové bariéry s intratékální syntézou imunoglobulinů 4 - izolovaná intratékální syntéza imunoglobulinů 5 - analytické chyby

Izoelektrická fokuzace likvoru a séra Detekce oligoklonálních pásů IgG po elektroforetickém rozdělení v gradientu pH –diagnóza RS kyselé neutrální alkalické likvor sérum pH

Spektrofotometrie likvoru vlnová délka A 406 MetHb 415 HbO 2 – čerstvé krv. 460 Bilirubin – starší krv.

Diferenciální diagnóza meningitit

Cytologické vyšetření likvoru Počet elementů: oligocytóza:< 3/µl (u novorozenců < 30/µl ) patologická oligocytóza (nejen klidové mononukleáry) pleocytóza: > 3/µl Morfologie a funkce elementů: polynukleáry: granulocyty (neutrofily, eozinofily, bazofily; tyče, segment, hypersegment, degenerativní forma) mononukleáry: lymfocyty (klidové, aktivované, plazmocyty) monocyty (klidové, aktivované, makrofágy, degener. f.) erytrocyty, bb. výstelky, nádorové bb.

Makrofágy k určení etiologie, úspěšnost léčby (úklid) erytrofágy, siderofágy, hematoidin – stáří krvácení leukofágy – úklid po bakteriální meningitis lymfofágy – úklid po virové meningitis závažnost situace (destrukce tkáně) lipofágy – destrukce mozkové tkáně

Cytologické vyšetření likvoru Kvalitativní cytologie –Trvalý preparát po cytocentrifugaci

Kvalitativní cytologie Základní barvení –Hemacolor (základní hematologické barvení) Barvení na tuky –Olejová červeň

Likvor - závěry Obraz počínajícího zánětu bez možnosti bližší charakteristiky (zánět hnisavý, serózní?) Obraz serózního (aseptického) zánětu – infekce virové nebo tzv. bakteriální onemocnění s virovým obrazem (způsobené borreliemi, leptospirami, treponemami...). V dif. dg. nutno pomyslet i na onemocnění tuberkulózní, parazitární, mykotické, případně akutní ataku RS. Obraz hnisavého (bakteriálního) zánětu. Obraz úklidové reakce po intrameningeálním krvácení (přítomnost erytrofágů bez dekolorací 4 h – 3 D; erytrofágů s dekolorací 2 D – 2 T; siderofágů 4 D – ¼ R; hematoidinu 13 D - ½ R).

Pleocytóza smíšená s převahou granulocytů Elementy myeloidní řady: neutrofilní granulocyty - hypersegmenty, degenerativní formy; výskyt tyčí Elementy monocytární řady: převaha aktivovaných bez známek fagocytózy Elementy lymfocytární řady: převaha klidových, oj. aktivované, bez nálezu plazmocytů Závěr: obraz hnisavého (bakteriálního zánětu)

Pleocytóza smíšená s převahou lymfocytů Elementy lymfocytární řady: převaha aktivovaných lymfocytů, výskyt plazmatických buňek Elementy monocytární řady: převaha aktivovaných bez známek fagocytózy Elementy myeloidní řady: výskyt degenerativních forem segmentů Závěr: obraz serózního (aseptického) zánětu

Přítomnost erytrofágů bez dekolorace, odhad stáří krvácení – 4 h až 3 dny Přítomnost erytrofágů s dekolorací, odhad stáří krvácení – 2 dny až 2 týdny Přítomnost hemosiderofágů, odhad stáří krvácení - 4 dny až ¼ roku Přítomnost hematoidinu, odhad stáří krvácení - 13 dnů až ½ roku Četné volné erytrocyty… Závěr: Obraz úklidové reakce po intrameningeálním krvácení

Lipofágy - přítomnost destruktivní složky zánětu