Proces bakteriální identifikace Část 1: Příprava API systému.

Prezentace na téma: "Proces bakteriální identifikace Část 1: Příprava API systému."— Transkript prezentace:

1 Proces bakteriální identifikace Část 1: Příprava API systému

2 Destilovaná voda Fyziologická sterilní voda (zkumavka 5ml) Olej Agarová Petriho miska API system with box and lid Sterilní pipety kapátko Materials avaliable

3 1. Příprava Bakteriální suspenze

4 1.1. Sterilní očkovací smyčkou naneste bakteriální kolonie na agarovou petriho misku Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci

5 1.2 Vytvořte suspenzi této kolonie ve sterilním fyziologickém roztoku (5ml) - ve vodě třete očkovací smyčkou o stěnu zkumavky tak, aby se bakterie dobře rozptýlily. Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci

6 1.3 Ručně vytvořenou suspenzi zhomogenizujte mírným kroužením a poklepáváním zkumavky. Poté ji označte písmenem “S”. S

7 2.Příprava API systemu

8 2.1 Naplňte dna dutinek v boxu destilovanou vodou tak, aby hladina vody zakryla všechny jamky. 2.2 Krouživým pohybem boxu rozptýlíte vodu do všech jamek. Poté odeberte kapátkem veškerou přebytečnou vodu nad jamkami.

9 2.3 Pomocí kleštiček umístěte API system na box 2.4 Box zakryjte víčkem a do plastového štítku napište číslo vašeho stolu.

10 2.Naplnění API systemu

11 Úvod Nepodtržený test Podtržený test Ohraničený test Příklady: mikrozkumavka kalíšek

12 3.1 Otevřete box, podložte ho víčkem tak, aby byl v nakloněné poloze.

13 3.2 Zhomogenizujte vaši suspenzi krouživými pohyby Sterilní pipetou odeberte 2ml suspenze ze zkumavky s označením “S”. S Varování! Se vzorkem pracujeme kolem Bunsenova hořáku aby nedošlo ke kontaminaci

14 3.3 Naplňte mikrozkumavky suspenzí podle následujících pokynů:  Pro podržený nebo nepodtržený test (např.: ONPG or ADH), naplňte jen mikrozkumavky  Pro test v rámečku (např. CIT), naplňte mikrozkumavku i kalíšek.Kalíšek mikrozkumavka

15 3.4 Sterilní pipetou přidejte olej do 5 kalíšků na podtržených testech - ADH, LDC, ODC, H2S, URE. kalíšek

16 3.5 Zavřete box a nechte inkubovat po dobu 16 hodin při 37°C. API box v inkubátoru

17 4. Analýza vašich výsledků Druhý den po dokončení inkubace identifikujte bakterii (viz. potokol 2)