Jak chránit DNA před zářením R. Čermák 1, V. Kanclíř 2, J. Kratochvíl 3 1 Gymnázium F. V. Sasinka, Námestie slobody č. 3, Skalica 2 Gymnázium Turnov, Jana Palacha 804, Turnov 3 Gymnázium, Vídeňská 47, Brno Vypracováno na Oddělení dozimetrie záření ÚJF AV ČR
Úvod DNA je nositelkou genetické informace Poškození ionizujícím zářením – přímé a nepřímé scavengery (vychytávače) – thioly, vitamín E, vitamín C agarózová elektroforéza
Poškození DNA Přímé – molekula DNA je přímo zasažena zářením Nepřímé – prostřednictvím radikálů vzniklých při radiolýze vody jednoduchý/dvojný zlom
Materiály Plasmidová DNA kruhová v cytosolu některých bakterií nesoucí některé doplňkové informace Kobalt 60 Co zdroj gama záření poškozuje nepřímo Agar migrační prostředí, obsahuje barvivo
Metody Agarózová elektroforéza založena na rozličné pohyblivosti molekul v elektrickém poli pohyblivost závisí na tvaru a náboji molekuly
Plasmidová DNA v elektrickém poli Rychlost pohybu závisí od prostorové struktury
Experiment I Úkol – Porovnání ochranných vlastností vychytávačů: kumarin-3-karboxylová kyselina dimethyl sulfoxid glycylglycin
Experiment II 3 sady po 3 vzorcích(každý o objemu 10x10 -6 l) každá sada obsahuje vodu, pufr, DNA a vychytávač o koncentraci: sada č.scavengerkoncentrace 1K3KK0; M ; 0.01 M 2DMSO0; 0.1 M ; 1M 3GlyGly0; 0.1 M ; 1 M
Experiment III Ozáření vzorků 60 Co po dobu 28 minut 8 sekund – dávka 10 Gy
A mezitím...
Experiment IV Elektroforéza vzorků v agaru Vyfotografování migrovaných vzorků na UV stolku
Vyhodnocení a závěr pomocí programu Luthien – porovnání množství zdravé DNA ku poškozené na základě fotografie nejúčinněji(vzhledem ke koncentraci) působil kumarin
Děkujeme... za pozornost za pozornosť für Ihre Aufmeksamkeit for paying attention para atención .. ... ...(už můžete zatleskat)