-laktamázy Popsáno kolem 190 různých enzymů Přirozené -laktamázy - Identifikace -laktamáz Spektrum aktivity Citlivost k inhibitorům Isoelektrický bod pI Rychlost hydrolýzy V max Sekvence aminokyselin Hybridizace
Model molekuly TEM-1
TEM-1 - místo vazby -laktamu
Princip klasifikace -laktamáz
Jacoby, Medeiros AAC.35: 1697 Substrátová specificita -laktamáz
Fenotypy -laktamáz
A.Philipson a spol. A.A.C. 1989; 33: 1131 Substrate specificity of -laktamáz
Evoluce -laktamáz A - alanine C - cysteine D - aspartic acid E - glutamic acid F - phenylalanine G - glycine H - histidine I- isoleucine K - lysine L - leucine M - methionine N - asparagine P - proline Q - glutamine R - arginine S - serine T - threonine V - valine W - tryptophan Substituce aminokyselin mění substrátovou specificitu
1 cefalosporinázy, resistentní k inhibitorům 2a penicillinázy G+ bakterií 2b TEM1, TEM2, SHV1 2be TEM3 - TEM26, SHV2 - SHV6, ESBL 2br TEM , resistentní k inhibitorům 2ckarbenicilinázy 2d oxacilinázy OXA1 - OXA 11 2einducibilní cefalosporinázy 2fkarbapenemázy metalo-enzymy 3metalo-enzymy, (penicilliny, karbapenemy cefalosporiny, slabě resistentní) 4penicillinázy resistentní k inhibitorům Klasifikace -laktamáz
Inhibitory -laktamáz Kyselina klavulanová - přirozený produkt Sulbaktam - (sulfon kyseliny penicilanové) Tazobaktam Vlastnosti inhibitorů Jsou to -laktamy Inhibují aktivitu -laktamáz Vysoká afinita vazby k -laktamům Ireversibilní vazba na -laktam Slabě antibakteriální účinek
Inducibilní -laktamázy Cefalosporiny III indukují resistenci (při terapii vzniká i multiresistence) Chromosomální gen -laktamázy se aktivuje exposicí. Jednostupňová mutace aktivačního genu → → vysoká kontinuální produkce -laktamázy, → resistence k penicilinům a cefalosporinům
Kmeny Klebsiella pneumoniae produkující ESBL Resistentní k cefalosporinům 3. generace, k piperacilinu, tikarcilinu, aminoglykosidům Kmeny obvykle citlivé ke karbapenemu Od 1980 vzestup v Evropě a US Souvislost s užíváním cefalosporinů III, zvláště ceftazidimu Gen na plasmidu