Genetická transformace bakterií II
Obsah soupravy a) lyofilizovaný vzorek E. coli HB101 K-12 b) lyofilizovaný vzorek plazmidu pGLO c) lyofilizovaný vzorek ampicillinu d) lyofilizovaný vzorek arabinózy e) Transformační roztok f) LB nutrient broth a b c d e f
Příprava agarových ploten a) příprava média b-d) nalévání misek v pořadí LB – LB/amp – LB/amp/ara e) skladování připravených Petriho misek před použitím
d e a b c
Příprava „startovací“ kultury E. coli a) pomůcky potřebné na inokulaci agarové plotny obnoveným vzorkem bakteriální kultury b) růst „startovací" kultury v termostatu při 37°C (nebo při pokojové teplotě) c) „startovací“ kultura připravená k transformaci b a c
Transformace buněk E. coli HB101 plazmidem pGLO a) agarová plotna se „startovací“ kulturou, inokulační klička a potřebné roztoky b) označené agarové plotny připravené k výsevu transformovaných bakterií c) inkubace bakterií v termostatu nastaveném na 37°C d) výsledek transformace – plotny v pořadí LB – LB/amp – LB/amp/ara e) detail kontrolní plotny LB f) detail plotny LB/amp g) detail plotny LB/amp/ara při denním světle a po osvícení UV světlem h) detail plotny LB/amp/ara při denním světle a po osvícení UV světlem
LB LB/amp LB/amp/ara h a b c d e f
g h
Děkuji za pozornost