Detekce proteinů na preparátech Histochemie. Metody detekce – vazba cílového proteinu Imunologické; primární protilátky sekundární protilátky Imunologické;

Slides:

Advertisements

Podobné prezentace

AUTOPROTILÁTKY V DIAGNOSTICE AUTOIMUNITNÍCH IMUNOPATOLOGICKÝCH

Advertisements

Speciální světelná, fluorescenční a konfokální mikroskopie

SDS-PAGE (= sodium dodecylsulphate-polyacrylamide gel electrophoresis) - metoda pro separaci proteinů dle velikosti (molekulové hmotnosti)

Biochemie I 2011/2012 Makromolekuly buňky František Škanta.

FOTOSYNTÉZA photós = světlo synthesis = skládání.

Vyšetřování parametrů humorální imunity

Imunohistochemie (IHC)

Chemická stavba buněk Září 2009.

Metabolismus A. Navigace B. Terminologie E. Sacharidy I. Enzymy

Možnosti průtokové cytometrie v analýze mikrobiálních populací

Střední zdravotnická škola, Národní svobody Písek, příspěvková organizace Registrační číslo projektu:CZ.1.07/1.5.00/ Číslo DUM:VY_32_INOVACE_KUB_09.

FUNKCE PROTEINŮ.

Střední zdravotnická škola, Národní svobody Písek, příspěvková organizace Registrační číslo projektu:CZ.1.07/1.5.00/ Číslo DUM:VY_32_INOVACE_KUB_08.

STRUKTURA NUKLEOVÝCH KYSELIN

BÍLKOVINY Proteiny.

Excitace Spojení excitace – kontrakce Kontrakce Regulace kontrakce

I n v e s t i c e d o r o z v o j e v z d ě l á v á n í

Přírodní látky Bílkoviny = Proteiny –přírodní látky složené ze 100 – 2000 molekul aminokyselin (AK) → makromolekuly –obsah – C, H, N, O, S, P –vazby mezi.

Klinická cytogenetika - metody

Laboratorní metody 1 Kurs Imunologie.

Studium aktinu, mikrofilamentární složky cytoskeletu pomocí dvou metod:

Imunologická diagnostika

IMUNOFLUORESCENCE MUDr. Zita Trávníčková

SÉROLOGICKÉ REAKCE reakce mezi antigenem a protilátkou význam in vivo

3. ISOENZYMY (isozymy) – způsob regulace v různých tkáních a za různých vývojových stádií. Isozymy nebo isoenzymy jsou enzymy lišící se sekvencí a složením.

Zoologická mikrotechnika - FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE

Optické metody (pokračování) – fluorescence, fluorimetrie

Metoda SDA strand displacement amplification

Analýza a separace nukleových kyselin

Nové barvy v mikroskopických preparátech

Imunochemické metody řada metod založených na principu reakce:

Fluorescenční a fotoaktivovatelné sondy

Sacharidová složka nukleotidů

Příjemce podpory – škola: Hotelová škola, Obchodní akademie a Střední průmyslová škola Teplice, Benešovo náměstí 1, p.o. Číslo projektu:CZ.1.07/1.5.00/

FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE

confocal laser scanning microscope (CLSM)

Molekulární biotechnologie Č.3. Izolace cílového fragmentu DNA (genu) Který představuje malou část genomu (0.02% u E.coli) Umožňují genové či genomové.

Serologické vyšetřovací metody

Luminiscenční spektroskopie

V praktiku budou řešeny dvě úlohy:

Molekulární biotechnologie č.10a Využití poznatků molekulární biotechnologie. Molekulární diagnostika.

09_luminiscenČní metody Petr Zbořil

(aminokyseliny, peptidy…)

Western blotting Slouží pro detekci proteinů prostřednictvím protilátek. Obvykle následuje po rozdělení polypeptidů v elektrickém poli polyakrylamidovou.

Ligázová řetězová reakce

BÍLKOVINY. DEFINICE Odborně proteiny, z řeckého PROTEIN=PRVNÍ. Jsou to přírodní makromolekulární látky vznikající z aminokyselin. Obsahují vázané atomy.

SEKVENOVÁNÍ DNA. Jedna z metod studia genů Využití v aplikovaných oblastech molekulární biologie – např. medicíně při diagnostice genetických chorob.

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ELISA. Biochemická metoda Detekce protilátky (Ab) nebo antigenu (Ag) Historie: Radioimunoassay – použití radioaktivně.

Barva těles. Barva neprůhledného tělesa je určena tím, jakou složku bílého světla těleso odráží a jakou pohlcuje. Žlutý citrón odráží žluté světlo, ostatní.

Rozklad světla Investice do rozvoje vzdělávání.

Imunochemické metody Metody využívající vazbu mezi antigenem a protilátkou Vytášek 2008.

Proteiny Bílkoviny. Bílkoviny jsou makromolekulární přírodní látky složené ze sta a více molekul aminokyselin. Při tvorbě bílkovin se aminokyseliny peptidickou.

Oběhová soustava Červené krvinky.

Laboratorní metody 1 Kurs Imunologie II.

confocal laser scanning microscope (CLSM)

Serologické vyšetřovací metody

DELFIA Dissociation-Enhanced Lanthanide Fluorescent ImmunoAssay

Chemiluminiscence, fluorescence

IMUNOFLUORESCENCE MUDr. Zita Trávníčková

Imunologie seminář 1 Imunologie seminář 1 J. Ochotná

Western blotting Slouží pro detekci proteinů prostřednictvím protilátek. Obvykle následuje po rozdělení polypeptidů v elektrickém poli polyakrylamidovou.

Základy genomiky V. Analýza protein-proteinových interakcí Jan Hejátko

URČENÍ BAKTÉRIE RODU BORRELIA POMOCÍ DNA SEKVENACE

Imunofluorescence Nepřímá Přímá slouží k průkazu protilátek (Ab)

BÍLKOVINY=PROTEINY.

Bílkoviny = Proteiny Přírodní látky

Transkript prezentace:

Detekce proteinů na preparátech Histochemie

Metody detekce – vazba cílového proteinu Imunologické; primární protilátky sekundární protilátky Imunologické; primární protilátky sekundární protilátky Malé molekuly; molekuly vážící náš cílový protein Malé molekuly; molekuly vážící náš cílový protein Proteiny; proteiny s interakcí s cílovým proteinem Proteiny; proteiny s interakcí s cílovým proteinem

Metody vizualizace - označení molekuly vážící cílový protein Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu

Metody vizualizace - označení molekuly vážící cílový protein Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu

Metody vizualizace - označení molekuly vážící cílový protein Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Fluorescence; malé excitovatelné fluorescenční molekuly Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu eg. Alcaline phosphatase (AP) Enzym; enzymy s barevnou reakcí po přidání substrátu eg. Alcaline phosphatase (AP)

Aktin – hlavní složka cytoskeletu zodpovědná za pohyb Dvě formy: G-aktin - jedna molekula F-aktin - polymerovaný Dvě formy: G-aktin - jedna molekula F-aktin - polymerovaný Spolupráce s myosinem Spolupráce s myosinem Síť skrz cytoplasmu Síť skrz cytoplasmu Dynamika aktinu je nezbytná pro životní funkce Dynamika aktinu je nezbytná pro životní funkce

Phalloidin Jed z Amanita phalloides Jed z Amanita phalloides Specificky váže F-actin Specificky váže F-actin Může být spojen s excitabilní molekulou bez ztráty vazby Může být spojen s excitabilní molekulou bez ztráty vazby

DAPI - Fluorescenční dsDNA značka Váže dsDNA v malém žlábku pomocí interkalace Váže dsDNA v malém žlábku pomocí interkalace To zvyšuje schopnost vyzařovat světlo To zvyšuje schopnost vyzařovat světlo Excitace UV Excitace UV Emise modrá Emise modrá

Dvojí značení, aktinový cytoskelet a DNA Složený obraz phalloidin-TRITC (červeně) and DAPI (modře)

Dvojí značení, aktinový cytoskelet a DNA Obraz phalloidin-TRITC (červeně) and DAPI (modře)