princip extrakce DNA (jahody) Jak lze snadno získat DNA z celého organismu? 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
Jak získat DNA z jahody? rostlinná buňka jádro: DNA s bílkovinnou cytoplasma: bílkoviny a další látky buněčná membrána: lipidy s bílkovinami buněčná stěna: celulóza a bílkovinný základ 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
drcením jahody se naruší buňky a membrány Co najdeme homogenátu? shluky celých buněk a jader buněčné membrány: lipidy a bílkoviny organely obsahující taktéž bílkoviny buněčnou stěnu rostlinné buňky: celulózu a bílkoviny DNA navázanou na bílkoviny 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
PŘIDÁNÍ DETERGENTU A NaCl Jak působí detergent a NaCl (kuchyňská sůl) na buňky a jejich části? detergent rozpouští buněčné membrány a narušuje strukturu bílkovin (např. JAR či mýdlo) ionty Na+ oddělí bílkovinu od DNA, kladně nabitý iont Na(+) přitahuje záporně nabitou DNA 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
FILTRACE oddělení nerozpuštěných částí velké shluky buněčného odpadu se zachytí na povrchu filtru malé molekuly procházejí skrz filtr do filtrátu (přefiltrovaná tekutina) lze použít běžný kávový filtr 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
VYSRÁŽENÍ DNA STUDENÝM ALKOHOLEM Jak dále získat DNA z filtrátu? VYSRÁŽENÍ DNA STUDENÝM ALKOHOLEM DNA není rozpustná ve studeném alkoholu ! všechny molekuly zůstávají rozpuštěné v roztoku s výjimkou DNA, ta se při kontaktu s alkoholem vysráží dlouhé řetězce DNA se po vysrážení navinou např. na skleněnou tyčinku 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.
Shrnutí principu „domácí“ izolace DNA: rozrušení buněk a buněčných membrán drcením rozpuštění organel i buněčných membrán detergentem (JAR) oddělení DNA od bílkovin pomocí kuchyňské soli NaCl filtrace, oddělení shluků od čistého roztoku obsahující DNA vysrážení DNA z roztoku studeným alkoholem a navinutí vlákna 11.1.2019 Advanced Genetics, s.r.o.