Laboratory diagnostics Recommended source: WWW.E-LABMED.CZ
Humoral analytes Precipitation Aglutination Turbidimetry Nephelometry
Imunofixation of serum
Humoral analytes Precipitation Aglutination Turbidimetry Nephelometry
ELISA – assessment of specific antibodies
RAST
ELISA – assessment of antigen
Indirect immunofluorescence
Asessment of cellular imunity Number of cells - subpopulations Phagocytosis Activation of lymphocytes
Flow cytometry
Gating of lymphocytes
T and Th lymphocytes
T and B lymphocytes
Activated T lymphocytes
http://probes. invitrogen http://probes.invitrogen.com/resources/education/tutorials/4Intro_Flow/player.html
KLINICKY VÝZNAMNÉ POPULACE LEUKOCYTŮ CD3+ T lymfocyty: populace zralých T lymfocytů 50 - 75% CD4+ T lymfocyty: subpopulace pomocných induktorových T lymfocytů 30 - 60% CD8+ T lymfocyty: subpopulace tlumivých cytotoxických T lymfocytů 15 - 30% CD25+ T lymfocyty: aktivované T lymfocyty 1 - 5% CD19+ B lymfocyty: populace zralých B lymfocytů 5 - 15% CD56+ NK buňky: přirozeně zabíječské buňky 5 - 15% CD14+ buňky: monocyty CD15+ buňky: granulocyty CD38+ buňky: plazmatické buňky
FUNKČNÍ TESTY TESTOVÁNÍ FUNKCÍ T LYMFOCYTŮ IN VITRO je založeno na testování: schopnosti T lymfocytů proliferovat schopnosti T lymfocytů produkovat cytokiny PROLIFERACE T LYMFOCYTŮ: in vitro kultivace kultivační media (thymové působky) CO2 atmosféra
HODNOCENÍ FAGOCYTÁRNÍCH FUNKCÍ absolutní počet granulocytů je pro funkci fagocytózy kritický k testování fagocytózy se používají izolované granulocyty populace granulocytů je mimořádně citlivá na poškození nově lze hodnotit počty a funkce fagocytujících buněk průtokovou cytometrií
Organ specific autoantibodies Anti-thyroidal AB Anti-pancreatic beta cells AB Anti-acetylcholine receptor AB Anti-gonadal AB
Systemic autoantibodies Anti-nuclear AB (ANA, ENA) Rheumatoid factor Anti-neutrophil cytoplasma AB (ANCA) Anti-phospholipid AB (APA)
Non-organ-specific autoantibodies in organ-localized autoimmune diseases ANCA (non-specific inflammatory bowel disease) //+ASCA// ATG (coeliac disease) SS-A, SS-B (Sjögren syndrome)