Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Poruchy krvetvorby a krve Seminář Karel Šulc, Pavel Klener Ústav patologické fyziologie 1. LF UK.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Poruchy krvetvorby a krve Seminář Karel Šulc, Pavel Klener Ústav patologické fyziologie 1. LF UK."— Transkript prezentace:

1 Poruchy krvetvorby a krve Seminář Karel Šulc, Pavel Klener Ústav patologické fyziologie 1. LF UK

2 Copyright ©2003 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Schrier, S. ASH Image Bank 2003;2003: Figure 1. Scanning electron microscopy of a normal red blood cell

3 Copyright ©2003 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Schrier, S. ASH Image Bank 2003;2003: Figure 2. Reticulocyte stain identifies young red blood cells (RBC) that have just left the marrow

4 Copyright ©2005 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2005;2005: Figure 1. Nucleated red blood cells may be seen in the peripheral blood as part of a reactive process

5 Copyright ©2003 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2003;2003: Figure 2. Dohle body

6 Copyright ©2003 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2003;2003: Figure 1. Peripheral smear from a patient with infection shows granulocytes with Dohle bodies

7 Copyright ©2005 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2005;2005: Figure 1. Scanning under low power reveals a heterogenous population of cells

8 Copyright ©2002 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2002;2002: Figure 1. High power view of normal bone marrow

9 Copyright ©2002 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2002;2002: Figure 2. Heterogeneous population of cells in a normal bone marrow

10 Copyright ©2005 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2005;2005: Figure 1. Cluster of promyelocytes in various stages of maturation

11 Copyright ©2005 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2005;2005: Figure 1. The nuclear cytoplasmic ratio is decreased compared to the myeloblast

12 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 1. The specific granules of the eosinophil are larger and stain more intensely than those seen in the neutrophil

13 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 1. Platelets can be seen as individual structures forming on the periphery of this megakaryocyte

14 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 2. A very granular cytoplasm can be appreciated in this megakaryocyte

15 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Lazarchick, J. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 2. At a higher magnification, the darker-staining small mantle cell lymphocytes surround the paler-staining follicular center cells

16 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Lazarchick, J. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 3. The follicular center cells are larger than the surrounding mantle cells

17 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Lazarchick, J. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 5. Immunohistochemical staining with anti-CD 20 highlights the B-cell lymphocytes of the germinal center (mantle zone and follicular center)

18 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Lazarchick, J. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 6. The CD 20 staining cells of the mantle zone and follicular center are better defined in this higher magnification of the previous image

19 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Lazarchick, J. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 7. Immunohistochemical staining with anti-CD5 highlights the B cells of the mantle zone (dark staining cells)

20 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 2. The iron is contained within cells of the RES system

21 Copyright ©2004 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2004;2004: Figure 1. Several erythroid precursors cluster around a central "nursing" histiocyte

22 Copyright ©2003 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2003;2003: Figure 1. Osteoblasts form a cluster of cells with granular basophilic cytoplasm

23 Copyright ©2005 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2005;2005: Figure 1. Osteoclasts have multiple nuclei which are separated by cytoplasm

24 Hemoglobin Určení v objemové jednotce krve, tj. v erytrocytech i v plazmě. Normální hodnoty ženy: 125 – 155 g / 1 litr 12,5 – 15,5 g / 100 ml muži: 135 – 175 g / 1 litr 13,5 – 17,5 g / 100 ml Zvýšení: polycytémie, dehydratace Snížení: anemie, hyperhydratace

25 Počet erytrocytů udáván v množství x / 1 litr nebo x 10 9 / 1 ml nebo x 10 6 / 1 μl Normální hodnoty ženy: 3,8 – 5,2 x / 1 litr muži: 4,2 – 5,8 x / 1 litr Snížení: anemie, expanze ECT Zvýšení: polycytémie, dehydratace

26 Hematokrit HTK udává procentuelní zastoupení formovaných krev- ních elementů v objemové jednotce krve Normální hodnoty ženy: 0,35 – 0, % muži: 0,38 – 0,49 38 – 49 % po narození: až 0,60 pak pokles, na počátku puberty 0,39, na konci puberty návrat k normálním hodnotám Snížení: anemie, expanze ECT Zvýšení: polycytémie, dehydratace

27 MCV – střední objem erytrocytu Normální hodnota = 87,5 fl (80-96fl) MCV je změněn u různých anomálií erytrocytů (srpkovitá anemie, poikilocytóza, anisocytóza a další). Je využíván k rozlišení normo-, mikro- a makrocytárních anemií Výpočet: hematokrit x 10 3 / počet ery ( x / 1 litr) Pozn.: téměř vždy je MCV určen analyzátorem

28 Změny velikosti a tvaru erytrocytů anizocytóza

29 Změny velikosti a tvaru erytrocytů poikilocytóza

30 Změny velikosti a tvaru erytrocytů sférocytóza

31 Změny velikosti a tvaru erytrocytů sideropenická anemie

32 Změny velikosti a tvaru erytrocytů makrocytární anemie

33 Změny velikosti a tvaru erytrocytů makrocytární anemie

34 Změny velikosti a tvaru erytrocytů Srpkovitá anemie

35 MCH - obsah hemoglobinu v 1 erytrocytu Norma: 29 pg (28-33pg), 18 fmol zvýšení: makrocytární anemie, snížení: mikrocytární anemie Výpočet: MCH=Hb (v g / 100 ml krve) / ery (x / 1 litr)

36 MCHC = střední koncentrace Hb v erytrocytech Norma = % zvýšení: hereditární sférocytóza norma až mírné snížení: makrocytární anemie snížení: mikrocytární anemie Výpočet: MCHC = Hb (v g /100 ml krve)x 100 / hematokrit

37 Počet retikulocytů je udáván v % všech buněk červené řady v krvi. Norma: ženy i muži 0,5 – 1,5 % a)při intravitálním barvení (brilantkresylová modř) je podíl RTC stanoven z nátěru b)stanovením průtokovou cytometrií jsou udány absolutní hodnoty Zvýšení: krvácení, hemolýza (kompenzační činnost dřeně) Snížení až vymizení: útlum erytropoézy, útlum dřeně

38 Vyšetření kostní dřeně Sternální punkce: z manubria sterni aspirace dřeňové krve umožňuje pouze provést cytologický rozbor (např. cytogenetika, FACS, molekulární biologie) Trepanobiopsie: ze spina iliaca superior posterior: umožňuje kromě aspirace dřeňové krve též získat vzorek kostní tkáně- nezbytné pro provedení histologického rozboru kostní tkáně

39 Copyright ©2002 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2002;2002: Figure 1. Bone marrow aspiration needles are smaller than the Jamshidi needles used to obtain bone marrow biopsies

40 Copyright ©2002 American Society of Hematology. Copyright restrictions may apply. Maslak, P. ASH Image Bank 2002;2002: Figure 1. Core biopsy obtained with a Jamshidi needle

41 Vyšetření kostní dřeně: hodnocení normo-, hypo-, hypercelularita, dysplazie kostní dřeně množství blastů, normálních a patologických sideroblastů rozlišení normálních a leukemických blastů (průkaz enzymatických aktivit, chromozomových změn, membrá- nových diferenciačních znaků, onkogenů a další)

42 Aplastická anemie hypocelularita dřeně a zmnožení tukových buněk.

43 Změna buněčnosti kostní dřeně Dysplazie

44 Stanovení erytropoetinu Určení: metodou ELISA nebo RIA v séru nebo v plazmě Snížená hladina (produkce): onemocnění ledvin, anemie z nedostatku erytropoetinu, karence proteinů, zvýšení p a O 2, polycythaemia vera Zvýšená hladina (produkce): sekundární polycytémie, snížení p a O 2, sideropenické a některé hemolytické anemie

45 Železo I. Volné železo je pro organismus toxické. V přítomnosti vol- ného Fe vznikají volné kyslíkové radikály. Pokud vznik volných radikálů přestane být řízen, vzniká oxidativní stres. Obsah železa v těle = 50 – 70 mmolů, tj. 3 – 4 g. Hemoglobin obsahuje 65 – 75 % Fe, myoglobin 3 – 5 %, enzymy s hemovou skupinou 0,2 %. V plazmě je 0,1 % vá- zaného na transferin, ve feritinu a hemosiderinu je 15 – 20 % železa.

46 Železo II. Resorpce: duodenum, horní část tenkého střeva. Denní resorpce: asi 18 μmolů Fe (1 mg), jsou tak uhrazeny denní ztráty. Výdej: není regulován. Resorpce závisí na 1) erytropoetické aktivitě kostní dřeně, 2) na stavu železa v zásobárnách Ztráty závisejí na obsahu feritinu v deskvamovaných buňkách. Jakmile je železo resorbováno, stane se součástí uzavřeného systému plazma – kostní dřeň – erytrocyty – zásobárny. Zásobní železo je uloženo ve formě feritinu a hemosiderinu

47 Stanovení Fe v séru Tranzitní pool Fe je stanovován jako sérové železo (veškeré železo je vázáno na transferin) a jako celková vazebná kapacita transferinu pro železo TIBC (total iron binding capacity). Podíl sérové železo / TIBC udává tzv. saturace transferinu. Norma: novorozenci 17,90 – 44,75 μmol / 1 litr děti 8,95 – 21,48 μmol / 1 litr ženy 7,16 – 26,85 μmol / 1 litr muži 8,95 – 28,64 μmol / 1 litr

48 TIBC (celková vazebná kapacita železa) Norma: 44,75 – 71,60 μmol / 1 litr Zvýšené hodnoty TIBC jsou při sníženém Fe v séru (více neobsazeného transferinu).

49 % saturace trasferinu (někdy se udává jako % saturace Fe) Výpočet: hladina sérového železa / TIBC Norma: 20 – 55 % Snížené hodnoty při deficitu Fe. Snížení saturace transferinu spolu s nízkými hodnotami TIBC: hemochromatóza, hemosideróza, onem. jater

50 Feritin v séru Hodnota slouží k posouzení stavu zásob železa v organismu. Norma: μg / 1 litr nebo ng / ml novorozenec25 – měsíc200 – měsíc – 15 let 7 – 140 ženy 12 – 150 muži 15 – 150 Snížení: lze detekovat již v počátečních stadiích sideropenické anemie Zvýšení: u anémií chronických chorob či nádorů

51 Sérový (solubilní) transferinový receptor (sTfR Hladina je stanovovována pomocí ELISA nebo firemních kitů. Zvýšení: deficit železa, intenzivní erytropoéza (hemolytické anemie, β-thalasemie, polycytémie) = zvýšená exprese TfR na buněčných membránách Snížení: útlum kostní dřeně, chronické selhání ledvin Pozn.: sTfR vzniká proteolýzou TfR na specifickém místě extracelulár- ní domény, vznikne monomer detekovatelný v plazmě nebo v séru. Mezi TfR a sTfR je konstantní vztah, sTfR je nepřímým ukazatelem exprese TfR v organismu.

52 Počet leukocytů Udává se v množství x 10 9 / 1 litr; x 10 6 / ml; x 10 3 / μl Leukocytóza Fyziologická: zvýšená tělesná námaha, gravidita, novoro- zenci Ostatní příčiny: akutní infekce, nekróza tkáně, krvácení, zvýšená produkce ACTH a glukokortikoidů (i po podání), leukemoidní reakce, stres, intoxikace Leukopenie odsun zejm. granulocytů do okrajové hotovosti, inefektivní granulopoéza, hypersplenismus, protilátky proti leukocytům, útlum kostní dřeně

53 Rozpočet bílých krvinek (diferenciální krevní obraz) Zjišťuje se zastoupení buněk bílé řady (PMNC i MNC) v nátěru. Granulocytóza - neutrofilní granulocyty Eozinofilie – zejm. u alergických stavů, při onemocnění pojiva („kolagenózy“), u kožních onemocnění (pemphigus vulgaris, dermatitis exfoliativa), u parazitárních onemocnění Eozinopenie – zvýšená produkce ACTH a glukokortikoidů, začátek těžkých infekcí Bazofilie – při CML, Hodgkinově nemoci, pravé polycyté- mii, diabetes, hypertyreóza Bazopenie – zvýšená produkce ACTH a glukokortikoidů

54 Vývojová stadia granulocytu

55 Leukemické blasty v kostní dřeni

56 Změny množství lymfocytů Lymfocytóza zejm. virové infekce infekční mononukleóza inf. cytomegalovirové ALL, CLL Lymfopenie zvýšení ACTH ozáření cytostatika lymfangiektazie v GIT drenáž dct. thoracicus (porušení stěny nádorem)

57 Lymfocyt

58 Porovnání velikosti lymfocytu s velikostí erytrocytu

59 Stanovení některých enzymatických aktivit I. Alkalická fosfatáza (ALP) normální (nízká) aktivita - v normálních blastech a granulo- cytech zvýšená aktivita – stres, zvýšení glukokortikoidů, gravidita, polycythaemia vera snížená až nulová aktivita – CML, PNH, MDS

60 Stanovení některých enzymatických aktivit II. Kyselá fosfatáza nulová aktivita – normální blasty nízká aktivita – AML, CLL zvýšená aktivita – CML Peroxidázová aktivita nulové hodnoty – normální blasty zvýšené až vysoké hodnoty – MDS, AML

61 Stanovení některých enzymatických aktivit III. Aktivita nespecifických esteráz charakteristická pro monocyty (umožnění přesnější diagnostiky leukemií s monocytárními rysy) nulová aktivita = monocytoblasty

62 Průtoková cytometrie (flow cytometry) a FACS Průtoková cytometrie – technika umožňující kvantitativně i kvalitativně analyzo- vat částice – buňky – v suspenzi. Pomocí definovaných parametrů dovoluje cíleně separovat buňky na základě jejich fyzikálních a chemických vlastností (např. obsahu DNA, množství granul, pH ICT apod.) a po obsazení povrchu buněk mono- klonální protilátkou studium povrchových molekul diferenciačních antigenů, intra- celulárních molekul včetně cytokinů apod. FACS (Fluorescence-activated-cell-sorting) je jednou ze základních aplikací průto- kové cytometrie umožňující třídění buněčné suspenze do dvou i více frakcí. Třídění je založeno na odlišném rozptylu světla a fluorescenční charakteristice jednotlivé buňky v suspenzi. Užití v hematologii: Průtoková cytometrie umožňuje provádět analýzu vybrané buněčné populace např. určení membránových diferenciačních znaků, expresi leukocytárních markerů v průběhu hematopoetické diferenciace, imunofenotypizaci při myeloproliferativních onemocněních, analýzu DNA apod.

63

64 Průtoková cytometrie - FACS Rozdělení buněčných populací pomocí FACS

65 Některé membránové diferenciační znaky CD3 – T-lymfocyty, TCR (T-cell receptor) CD4 – pomocné T-lymfocyty CD7 – T-lymfocyty, NK buňky CD8 – cytotoxické/supresorové T-lymfocyty, NK buňky, thymocyty CD21, CD22 – prekursory a zralé B-lymfocyty CD34 – prekursory krvetvorných buněk CD50 – granulocyty CD52 – eozinofilní granulocyty CD61 – trombocyty, megakaryocyty CD70 – Reedové-Sternbergovy buňky, aktivované B- a T-lymfocyty CD77 – buňky Burkittova lymfomu, aktivované B-lymfocyty

66

67 Reed-Sternberg cell


Stáhnout ppt "Poruchy krvetvorby a krve Seminář Karel Šulc, Pavel Klener Ústav patologické fyziologie 1. LF UK."

Podobné prezentace


Reklamy Google