Základní hematologická vyšetření I - anémie

Prezentace na téma: "Základní hematologická vyšetření I - anémie"— Transkript prezentace:

1 Základní hematologická vyšetření I - anémie
Ústav patologické fyziologie 1.LF UK

2 Co je to anémie? Anémie = pokles koncentrace hemoglobinu pod dolní hranici normálních hodnot Anémie je tedy definována koncentrací hemoglobinu, nikoli počtem erytrocytů či hodnotou hematokritu !!! Dolní hranice normy: muži = 130 g/L ženy = 120 g/L

3 ANÉMIE- PŘÍČINY LEDVINY Ztráty krve Snížená produkce EPO
PERIFERNÍ KREV Destrukce erytrocytů v periferní krvi (např. PNH, MAHA) KOSTNÍ DŘEŇ Snížená produkce erytrocytů (např. sideropenická anémie, aplastická anémie, PRCA, nádorová infiltrace kostní dřeně) SLEZINA Destrukce erytrocytů ve slezině a játrech (např. většina hemolytických anémií) NEBO Destrukce krvetvorby již v kostní dřeni (např. megaloblastové anémie, MDS, thalassémie)

4 Základní vyšetření - krevní obraz (KO)
kvantitativní vyšetření Hemoglobin (HGB) Hematokrit (HCT) Počet erytrocytů (RBC) Retikulocyty (ret) Objem RBC (MCV) Množství HGB v RBC (MCH) Koncentrace HGB v RBC (MCHC) Distribuční šíře RBC (RDW) Počet trombocytů (PLT) Distribuční šíře PLT (PDW) Objem PLT (MPV) Počet leukocytů (WBC) Diferenciální rozpočet WBC segmenty a tyče - eozinofily - bazofily - monocyty - lymfocyty kvalitativní vyšetření

5 Automatické stanovení hematologickými analyzátory

6 Jak funguje analyzátor ?
- impedanční – při průchodu částice mezi elektrodami vzroste impedance - počet impulzů = počet částic - amplituda = objem částice - optické – při průchodu částice přes fokusovaný světelný paprsek dojde k rozptylu světla

7 Klasický krevní nátěr - při patologickém nálezu na analyzátoru - zhodnocení morfologie buněk

8

9 ← sférocyty schistocyty →

10 Hemoglobin Stanovení spektrofotometricky po hemolýze erytrocytů a přeměně na hemiglobinkyanid Normální hodnoty ženy: 120 – 160 g/l muži: 130 – 175 g/l Zvýšení: polycytémie, dehydratace Snížení: anémie, hyperhydratace

11 Hematokrit HCT udává procentuální zastoupení erytrocytů v objemové jednotce krve (analyzátor vypočítá HCT z RBC a MCV) Normální hodnoty ženy: 0,35 – 0, % muži: 0,40 – 0, – 50 % Zvýšení: polycytémie, dehydratace Snížení: anémie, hyperhydratace

12 Počet erytrocytů udáván v množství x1012/l nebo x106/μl
Normální hodnoty ženy: 3,8 – 5,2 x 1012/l muži: 4,2 – 5,8 x 1012/l Zvýšení: polycytémie, dehydratace Snížení: anémie, hyperhydratace

13 MCV – mean cell (corpuscular) volume
Výpočet: - určen přímo analyzátorem ! Normální hodnota: 80 – 99 fl Rozlišení - normocyty - mikrocyty - makrocyty

14 MCH – mean cell (corpuscular) hemoglobin
Výpočet: Normální hodnota: 27 – 33 pg Rozlišení - normochromní RBC (normo nebo makrocyty) - hypochromní RBC (většinou mikrocyty)

15 MCHC – mean cell (corpuscular) hemoglobin concentration
Výpočet: Normální hodnota: g/l Hodnocení obdobné jako u MCH

16 RDW – red cell distribution width
Analyzátor vytvoří v paměti Priceovu-Jonesovu křivku, RDW je šířka distribuce (obdobně se stanovuje PDW) (RDW je mírou anizocytózy)

17 Počet retikulocytů Stanovení z krevního nátěru obarveného brilantkrezylovou modří (počet / 1000 RBC) (analyzátorem – absolutní hodnoty) Normální hodnota: 0,5 – 1,5 % Zvýšení: zvýšená tvorba RBC v kostní dřeni (krvácení, hemolýza) Snížení až vymizení: útlum erytropoézy, útlum dřeně

18 Počet trombocytů Udává se v množství x109/l nebo x103/μl
Normální hodnoty: 150 – 450 x 109/l Zvýšení: trombocytóza Snížení: trombocytopenie Funkční porucha: trombocytopatie

19 Počet leukocytů Udává se v množství x109/l nebo x103/μl
Normální hodnoty: 4 – 10 x 109/l Zvýšení: leukocytóza Snížení: leukopenie

20 Diferenciální rozpočet leukocytů
Udává zastoupení jednotlivých druhů leukocytů v krvi Vyjadřuje se v relativním (%) nebo absolutním počtu Poruchy: neutrofilie x neutropenie eozinofilie x eozinopenie bazofilie x bazopenie lymfocytóza x lymfopenie

21

22 35 letá těhotná žena byla vyšetřena pro progredující únavu a zadýchávání při minimální zátěži. Klinické vyšetření až na bledé spojivky v normě.

23 Bylo vysloveno podezření na anémii, provedeno vyšetření krevního obrazu
HGB g/l (120 – 160 g/l) HCT % ( %) RBC 2,5 x (3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV fl (80 – 99 fl) MCH pg (27 – 33 pg) RDW 17,1% (13 – 15 %) ret ,2% (0,5 – 1,5 %) WBC 5,4 x (4 – 10 x 109/l) PLT x (150 – 450 x 109/l) Podle kterého parametru krevního obrazu potvrdíme anémii? Proč není anémie definována hodnotami RBC a HCT? Jak lze anémii na základě hodnot KO blíže charakterizovat? mikrocytární hypochromní s anizocytózou hypoproliferativní

24

25

26 Vyšetření metabolizmu železa

27 Vyšetření metabolizmu železa
S-Fe S-ferritin S-transferin Celková vazebná kapacita transferinu (TIBC) Saturace transferinu Solubilní transferinový receptor

28 Vyšetření metabolizmu železa
Hodnocení tranzitního poolu Fe: - S-železo (veškeré je vázáno na transferin) - S-transferin - TIBC - nepřímo ukazuje množství transferinu (k séru se přidá nadbytek Fe, nenavázané Fe se odstraní a změří se konc. S-Fe), využití pro výpočet saturace transferinu - saturace transferinu je vypočtená jako S-Fe/ TIBC

29 Vyšetření metabolizmu železa
Hodnocení zásobního poolu Fe: - S-ferritin - koncentrace v séru koreluje se zásobami Fe, CAVE - protein akutní fáze sTfR vzniká proteolýzou membránového TfR, je nepřímým ukazatelem exprese TfR v organismu => zvýšen u deficitu železa a intenzivní erytropoézy

30 Vyšetření metabolizmu železa
V praxi je potřeba odlišit od sebe 2 nejčastější typy anémie - sideropenická anémie (IDA) - anémie chronických chorob (ACD) U obou je sníženo S-Fe,ale u ACD není snížena zásoba Fe, jedná se o poruchu distribuce Fe => substituce Fe je chybou sTfR vzniká proteolýzou membránového TfR, je nepřímým ukazatelem exprese TfR v organismu => zvýšen u deficitu železa a intenzivní erytropoézy

31

32

33 prodloužená hemoglobinizace
mikrocyty mitózy prodloužená hemoglobinizace nedostatek Fe Proč je sideropenická anémie mikrocytární? Proč je přítomna anizocytóza?

34 50 letá žena přichází pro zhoršení dechu v několika posledních týdnech
50 letá žena přichází pro zhoršení dechu v několika posledních týdnech. Také si stěžuje na mravenčení prstů na levé noze. Při fyzikálním vyšetření zjišťujeme žlutě zabarvené skléry.

35 Pro podezření na anémii byl vyšetřen krevní obraz:
HGB g/l (120 – 160 g/l) HCT ,3% ( %) RBC 1,7 x (3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV fl (80 – 99 fl) MCH pg (27 – 33 pg) RDW % (13 – 15 %) ret ,4% (0,5 – 1,5 %) WBC 2,0 x (4 – 10 x 109/l) PLT x (150 – 450 x 109/l) O jaký typ anémie se jedná?

36

37 Kyselina listová, vitamin B12 a erytropoeza

38 Jaké jsou příčiny deficitu vitaminu B12 ?
Emmanuel Andrès et al. CMAJ 2004;171:

39 Vyšetření sérové koncentrace: vitaminu B12
kyseliny listové Proč je anémie makrocytární?

40 makrocyty ↑ prodloužená doba mezi bb děleními
nedostatek kyseliny listové a vitaminu B12

41 Proč má pacientka pancytopenii ? Proč má pacientka parestézie ?
HGB g/l (120 – 160 g/l) HCT ,3% ( %) RBC 1,7 x (3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV fl (80 – 99 fl) MCH pg (27 – 33 pg) RDW % (13 – 15 %) ret ,4% (0,5 – 1,5 %) WBC 2,0 x (4 – 10 x 109/l) PLT x (150 – 450 x 109/l) Proč má pacientka pancytopenii ? Proč má pacientka parestézie ?

42 Co se stane, když budeme léčit anémii z nedostatku vitaminu B12 kyselinou listovou ?

43 makrocytární anémie hypersegmentovaný neutrofil
hypochromní mikrocytární anémie makrocytární anémie hypersegmentovaný neutrofil

44 78 letý muž přivezen RZS pro nově vzniklou poruchu hybnosti LHK a dysartrii. Při fyzikálním vyšetření zjištěna paréza LHK, pokleslý levý koutek, ikterické skléry, bledé spojivky. Provedeno CT mozku - bez patologického nálezu.

45 Leu ,2 x 10^9/l [4,00..10,00] Ery ,27 x 10^12/l [4,00..5,80] HGB g/l [ ] HTC , [0,400..0,500] MCV ,5 fl [82,0..98,0] MCH ,4 pg [28,0..34,0] MCHC g/l [ ] RDW ,4 % [10,0..15,2] Plt x 10^9/l [ ] Rtc ‰ [5..25] Rtc abs 0,111 x 10^12/l [0,025..0,100] O jaký typ anémie se jedná? Čím by mohla být anémie způsobena? Jaká vyšetření pomohou potvrdit / vyvrátit hemolýzu?

46

47 Bilirubin 56,5 umol/l [2,0..17,0] Bili př. 8,8 umol/l [0,0..5,1]
LD ,3 ukat/l [2,2..3,8] Haptoglobin < 0,06 g/l [0,30..2,00]

48 Hemolytické anémie korpuskulární poruchy membrány enzymopatie hemoglobinopatie extrakorpuskulární imunní autoimunní alloimunní neimunní mechanická toxiny / léky infekce

49 Vyšetření antierytrocytových protilátek
Přímý antiglobulinový test (Coombsův) - průkaz protilátek na povrchu erytrocytů pomocí antiglobulinového séra

50 Nepřímý antiglobulinový test
- průkaz volných protilátek v séru (po inkubaci RBC se sérem se přidá antiglobulinové sérum)

51 Předtransfuzní vyšetření před podáním erymasy
Stanovení krevní skupiny pacienta (pacientovi erytrocyty): AB0 + RhD (anti-séra anti-A, anti-B, anti-D) Diagnostické erytrocyty + sérum pacienta 2. Screening na aloprotilátky (sérum pacienta) -testovány jsou 3 sady diagnostický erytrocytů se známými antigeny 3. Výběr vhodného dárce (vhodné erymasy) 4. Křížová zkouška: -ověření AB0 pacientových erytrocytů -ověření AB0 dárcovských erytrocytů -ověření případné reaktivity mezi pacientovým sérem a dárcovskými erytrocyty 5. Ověření dokumentace u lůžka pacienta 6. Ověření krevní skupiny u lůžka 7. Biologická zkouška (transfuze 10mL dárcovské erymasy  zastavit transfuzi a 10 minut čekat  opakovat ještě jednou) 8. Podání erymasy 9. Kontrola klinického stavu po podání transfuze (do 1. vymočení)

52 Předtransfuzní vyšetření
Transfuzní oddělení: -stanovení krevní skupiny pacienta -velká křížová zkouška (aglutinační reakce) Erytrocyty pacienta + testovací anti-séra (anti-A1, anti-A2, anti-B, anti-RhD + event. další protilátky či anti-séra pro širší typizaci pacientových erytrocytů). Sérum pacienta + testovací sady erytrocytů  odhalení aloprotilátek 3. Výběr a výdej vhodné erymasy Lůžkové oddělení či ambulance: 1. kontrola dokumentace 2. ověření krevní skupiny u lůžka pacienta (testovací kartičky, antiséra anti-A, anti-B) 3. biologický pokus 4. Podání transfuze 5. Klinická kontrola v období po podání transfuze

53

54 bed-side test

55 Děkuji za pozornost.

56 Vyšetření krevních skupin
ABO systém - vyšetření RBC pomocí diagnostických sér anti-A a anti-B - vyšetření sérových aglutininů anti-A a anti-B pomocí typových erytrocytů Rh(D) systém - vyšetření pomocí anti-Rh(D) séra

57 Imunologická vyšetření
Vyšetření krevních skupin (Přímý antiglobulinový test) (Nepřímý antiglobulinový test)

58

59