Antibiogram bakteriálního kmene

Sterilní fyziologický roztok ve zkumavce Pomůcky: Sterilní fyziologický roztok ve zkumavce Bakteriální kolonie na agaru Mueller Hintonovo kultivační médium Sterilní vatová tyčinka Nákres rozložení Disky s antibiotiky

1. Příprava inokula „I“

1.1. Z Petriho misky odeberte sterilní očkovací kličkou jednu bakteriální kolonii. POZOR! Manipulaci provádějte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku.

POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku. 1.2. Ponořte očkovací kličku do zkumavky s 5 ml fyziologického roztoku. Opatrně otřete kličku o stěnu zkumavky pod hladinou roztoku. 1.3. Opakujte 4x, do zkumavky tak nanesete 5 bakteriálních kolonií POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku.

I 1.4 Promíchejte obsah zkumavky krouživými pohyby a napište na ni « I ».

2. Očkování Mueller Hintonova media pro antibiogram

POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí Kolem Bunsenova hořáku. 2.1. Do zkumavky “I” ponořte výtěrovou tyčinku. Namočte tampon v inokulu a poté jemným tlakem o stěnu zkumavky odstraňte přebytečný roztok. POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí Kolem Bunsenova hořáku.

2. 2. Naočkujte Mueller Hintonův agar by vatovým tamponem 2.2. Naočkujte Mueller Hintonův agar by vatovým tamponem. Očkovací čáry vedeme těsně vedle sebe. 2.3. Otočte misku o 60°proveďte znovu předchozí krok. Celé zopakujte ještě 1x, aby bylo jisté, že je inokulum rozprostřeno po celé ploše misky. 60° = Streaks in 3 passes

2. Umístění disků s antibiotiky

3.1. Umístěte Mueller Hintonovo médium na nákres rozložení antibiotik. 3.2. Sterilní pinzetou přeneste disky s antibiotiky na povrch média dle nákresu. Disky umístěte opatrně! Mírným tlakem zajistíte přilnutí disku s antibiotiky k médiu. Netlačte moc, abyste nepoškodili agar.

Médium inkubujte dnem vzhůru po dobu 4. Inkubace média Médium inkubujte dnem vzhůru po dobu 16 h při min. 37°C.

5. Analyzujte výsledky

5.1. Druhý den po inkubaci změřte průměr inhibičních zón kolem disků s antibiotiky.

5.2. Pomocí této tabulky stanovte senzitivitu či rezistenci bakteriálního kmene vůči různým testovaným antibiotikům. Antibiotic tested Resistance if the diameter of inhibition is less than : Sensitive if the diameter of inhibition is greater than : Ampicillin 14 mm 19 mm SXT 10 mm 16 mm Erythromycin 17 mm 22 mm Gentamicin

6. Závěr Navrhněte nejvhodnější antibiotika pro léčbu nozokomiální infekce způsobené vaší bakterií.