PRAKTIKUM 2 Barvení sex chromatinu Pruhování chromozomů Mikroskopické pozorování chromozomů
Stěr z ústní sliznice – 1.část Bukální stěr Aplikace acetoorceinu (1 minuta)nebo Lugolu(20 min) Fixace etanolem
Stěr z ústní sliznice – 2. část Aplikace krycího skla Mikroskopické pozorování Odsátí přebytečného barviva
Epiteliální buňky ústní sliznice barvené acetoorceinem
Sex chromatin = Barrovo tělísko
Srovnání různých způsobů vizualizace chromozomů Pruhování chromozomů Srovnání různých způsobů vizualizace chromozomů
Pruhování chromozomů
Hodnocení
G-pruhování Trypsin + Giemsa
Klasické barvení („solid staining“) 6 – 12 13 – 15 19 – 20 21 – 22 4 – 5 Používáme pouze roztok Giemsa-Romanowski
Klasické barvení chromozomů Používáme pouze roztok Giemsa-Romanowski (eventuálně Wrightovo barvivo) 5 – 6 minut 4,5 ml Giemsova roztoku 15 ml Gurrova pufru do 50 ml dest. H2O
Úkol : Určení konstituce pohlavních chromozomů Na předložené fotografii lidských chromozomů obarvených metodou G-pruhování zjistěte, zda se jedná o buňku muže nebo ženy. Chromozomy lze určit srovnáním s přiloženou předlohou. Jednodušší je však spočítat všechny malé akrocentrické chromozomy
21 22 Y muž žena