Jak chránit DNA před zářením Lucie Dudková Markéta Nečasová Hana Pařízková
Struktura DNA
Typy poškození DNA
Scavengery Látky vychytávající volné radikály Antioxidanty – thioly, vitamin E, vitamin C, alkoholy, aj. Námi použité: glycylglycin a ethanol
Určení koncentrace DNA Plasmid pBR322
Příprava vzorků 100 ng DNA Aditiva: Doplněno vodou na objem 10 μl Glycylglycin o koncentraci 0,1 mM, 1 mM a 10 mM Ethanol (slivovice) – 1 μl a 5 μl Doplněno vodou na objem 10 μl
Ozařování 60Co, poločas rozpadu 1 925,5 dní γ záření Ozářeno dávkou 5 Gy (29 min 8 s)
Příprava gelu 1% roztok agaru v 0,5x TAE Přidáno fluorescenční barvivo SYBR Green I
Elektroforéza Do vzorků přidáno nanášecí barvivo Elektroforéza při napětí 100 V po dobu 1 hod
Výsledek elektroforézy 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Zpracování výsledků Program Luthien
Jednoduché zlomy (počet/plasmid) Výsledky Složení vzorku Neozářený vzorek Ozářený vzorek Stočená forma (% DNA) Jednoduché zlomy (počet/plasmid) Stočená forma (% DNA) DNA 89.23 0.114 91.4 0.090 DNA + glygly (0,1 mM) 95.12 0.050 82.93 0.187 DNA + glygly (1 mM) 86.7 0.143 74.1 0.300 DNA + glygly (10 mM) 92.77 0.075 80.65 0.215 DNA + 1 μl ethanolu 93.12 0.071 94.06 0.061 DNA + 5 μl ethanolu 95.01 0.051 93.74 0.065
Shrnutí Ethanol je schopen chránit DNA před zářením Radioprotektivní účinky glygly se prokázat nezdařilo
Poděkování Ing. Marii Davídkové FJFI ČVUT Ing. Vojtěchu Svobodovi a ostatním organizátorům Týdne vědy
Děkujeme za pozornost!