TEST AKTIVACE BAZOFILŮ Tomáš Sýkora Interimun Pardubice

BAT Základy položeny v začátku 80tých let 20.století (Nakagawa, Stadler, De Weck) Allergy 1981; 36: 39-4 Aktivace příslušným antigenem Kvantifikace průtokovou cytometrií (CD69 nebo CD203c) Stanovení mezí pozitivity a negativity

BAT

BAT KLIDOVÁ FÁZE AKTIVOVNÝ BAZOFIL

BAT

Krevní vzorek Plná krev Izolované leukocyty Odběrové (transportní ) medium Teplota 4st C Doba životnosti bazofilů (EDTA>heparin)

BAT Rozšíření laboratorních možností v alergologii. Možnost rychlého výsledku Žádné riziko pro pacienta Poměrně vysoká specifita Reprodukovatelnost testu Není dostačující senzitivita Nedostatek zkušeností v běžné klinické praxi Vyšší náklady

BAT výhody Diagnostiky alergických i pseudoalergických reakcí neprokazatelných sérologickými technikami. Reprodukovatelnost testu. Rychlost testu. Možnost vyšetřit více antigenů z malého vzorku Někdy umožní vyhnout se rizikovým expozičním testům

BAT-nevýhody Nedává 100% prediktivní jistotu, že in vivo nedojde k reakci Omezený výběru alergenů při metodikách standardizovaných . Riziko nespecifické aktivace bazofilů při metodikách „home made“ Vzorek je třeba rychle zpracovat.

BAT-indikace. Lékové alergie Alergie na bodnutí blanokřídlým hmyzem Potravinové alergie Ostatní – vývoj indikací

BAT-úskalí Interpretce výsledku pacient Preanalytická fáze

Negativní kontrola Přirozená expozice alergenu in vivo Plná krev obsahující specifická IgG Během imunoterapie alergeny hmyzího jedu Trvalá expozice potravinovému alergenu Kontaminace: pyrogeny,endotoxinem,konzervanty,destičkami, reagenciemi

Pozitivní kontrola. Cca 3 % (15%) populace nereaguje na anti IgE protilátku proti Fc receptoru. Test je nehodnotitelný

BAT-hodnocení výsledků ABSOLUTNÍ HODNOTA Počet bazofilů. (nad 200) POMĚRNÁ HODNOTA Procento aktivovaných bazofilů alergenem Procento aktivovaných bazofilů negativní a pozitivní kontrolou Stimulační index

BAT-kriteria pozitivity ALERGENY POZITIVITA STIMULAČNÍ INDEX INHALAČNÍ >15% POTRAVINY LATEX >10% JED BLANOKŘÍDLÝCH β- LACTAMY >5% >2 METAMIZOL >5 ASA NSA NEGATIVNÍ KONTROLA <5

BAT-NSA SENZITIVITA SPECIFITA POZITIVNÍ PM NEGATIVNÍ PM ASA 43,3% 100% 99,4% Paracetamol(p) 11,7% Metamizol(m) 15% 99,1% Diclofenac(d) 93,3% 6,1% 99,3% Naproxen(n) 54,8% 74,1% 2% ASA+p+m+d 66,3% 8,7% 99,6%

BAT-β-lactamy SENZITIVITA SPECIFITA POZITIVNÍ PM NEGATIVNÍ PM Penicillin 20% 93% 8,48% 97,41% Ampicillin 22% 9,34% 97,48% Amoxycillin 33% 97% 23,63% 97,91% PPL 15% 95,5% 9,39% 97,32% MDM 17% 10,17% 97,37% celkově 51% 6,4% 97.7%

BAT SKUPINA SENZITIVITA SPECIFITA CENTR. MYORELAXANCIA 36-91,7% 93-100% β- LACTAMY 15-33% 93-97% ASA , NSA 43-54% 74-100% PARACETAMOL 11,7% 100% PYRAZOLONY 42%

Amoxycillin senzitivní, SPT negat. 5 pacientů: SPT -, CAP+ 12 pacientů: SPT-, CAP-, EXP+ 6 pacientů: SPT-,CAP-,2x ANAPH/URT Gamboa PM,Garcia-AvilesMC, Urrutia I, EsparzaR.Sanz MI Basofil activtation and sulfidoleukotriene production in patient with immediate allergy to betlactam antibiotics and negative skin tests. J Investig Alergol Clin Immunol 2004; 14: 278-283

BAT 39,1%/93,3% CAST 22,7%/83,3% CAP 21,7%/8,3% 60,9%/ 70%

Závěr. BAT je obohacením laboratorní diagnostiky v alergologii BAT je doplňkové vyšetření Využitelný v diagnosticky problematických oblastech Reprodukovatelný Stále hledání zkušeností a nových možností testu