Využití bakteriofágů jako modelových organismů WORLD SCIENCE DAY FOR PEACE AND DEVELOPMENT Využití bakteriofágů jako modelových organismů Prezentace v rámci udržitelnosti projektu OPVK Nanoteam Simona Dostálová Datum konání: 10. 11. 2014
Bakteriofágové Viry - nejjednodušší modelové „organismy“ Bakteriofágové = viry napadající bakterie Genom replikován po vstupu do hostitelské buňky hlavička ocásek kapsida nukleová kyselina bičík vlákna
Bakteriofágové Vstup do hostitelské buňky přes specifické receptory Lytická vs. lyzogenní reprodukce Indukcí přechod lyzogenní → lytický cyklus Lytický cyklus Lyzogenní cyklus
Bakteriofág λ Kolifág – Escherichia coli Temperovaný – lyzogenní i lytická reprodukce Kapsida ikozahedrální tvar Průměr 50-60 nm Nukleová kyselina DNA 100 nových virionů z 1 hostitelské buňky
Přínosy bakteriofága λ ve vědě Kontrola genové exprese – vazba proteinů na specifické sekvence DNA rekombinace specifickými mechanismy + restrikční enzymy Tripletová podstata genetického kódu Studium frekvence mutací
Přínosy bakteriofága λ ve vědě Separace a vizualizace DNA na agarózovém a PAGE gelu Shotgun sekvenování genomu Protein-DNA interakce Skládání proteinů + role chaperonů Epigenetická regulace genů
Praktická ukázka Studium antivirotické aktivity látek: Produkce bakteriofága λ v kultuře produkční Escherichia coli – 24 hod kultivace na Petriho misce Usmrcení bakterie Escherichia coli parami chloroformu Přelití bakteriofága indikační Echerichia coli a potenciálně antivirotickou látkou – plaky po 16 hod Spočítání plaků
Praktická ukázka – krok 1 24 hod
Praktická ukázka – krok 2 5× 24 hod
Praktická ukázka – krok 3 Chloroform 30 min 16 hod
Praktická ukázka - výsledek
Poděkování projektu CZ.1.07/2.3/.00/09.0224NANOTEAM Budování výzkumných týmů a rozvoj univerzitního vzdělávání výzkumných odborníků pro mikro- a nanotechnologie Děkuji za pozornost