Ivana Eštočinová, Pavla Fabulová, Markéta Formánková

Slides:



Advertisements
Podobné prezentace
Transkripce (první krok genové exprese: Od DNA k RNA)
Advertisements

BIOLOGIE 1 Rostliny Biologické vědy Metody práce v biologii
GENETIKA NUKLEOVÉ KYSELINY DNA, RNA
Vyšetření parametrů buněčné imunity
NUKLEOVÉ KYSELINY BIOCHEMIE.
Autorem materiálu a všech jeho částí, není-li uvedeno jinak, je RNDr. Pavlína Koch ová CZ.1.07/1.5.00/ Autor materiálu:RNDr. Pavlína Kochová Datum.
Výukový materiál zpracován v rámci projektu EU peníze školám Registrační číslo projektu: CZ.1.07/1.5.00/ Šablona:III/2č. materiálu: VY_32_INOVACE_CHE_420.
Transkripce (první krok genové exprese)
Real-time PCR - princip
Transkripce a translace
Metody identifikace DNA –RFLP, PCR a RAPD
PCR. Polymerase chain reaction PCR Je technika, která umožňuje v krátkém času namnožit daný kus DNA bez pomoci buněk užívá se, pokud je DNA velmi malé.
Polymorfizmy detekované speciálními metodami s vysokou rozlišovací schopností Stanovení jednonukleotidových polymorfizmů (Single Nucleotide Polymorphisms.
Základní pojmy (abecedně)
Bílkoviny a nukleové kyseliny
Nukleové kyseliny Struktura DNA a RNA Milada Roštejnská Helena Klímová
METABOLISMUS BÍLKOVIN II Anabolismus
Molekulární genetika.
NUKLEOVÉ KYSELINY A JEJICH METABOLISMUS
Transkriptom.
(genové mutace, otcovství, příbuznost orgánů při transplantacích) RNA
RxFISH.
Pro charakteristiku plazmidu platí: je kruhová DNA
Molekulární genetika.
Nukleové kyseliny RNDr. Naďa Kosová.
DNA Hybridizační techniky
Klinická cytogenetika - metody
GENETICKÁ INFORMACE je informace, která je primárně obsažena v nukleotidové sekvenci v nukleotidových sekvencích jsou obsaženy následující informace: o.
Fyziologie reprodukce a základy dědičnosti FSS 2009 zimní semestr D. Brančíková.
EXPRESE GENETICKÉ INFORMACE Transkripce
MLPA MULTIPLEX LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION
Nukleové kyseliny Přírodní látky
Radovan Horák, Romana Zaoralová, Jiří Voller
DNA diagnostika.
Microarray Martin Erdös.
PCR Polymerase Chain Reaction
DNA diagnostika II..
„AFLP, amplified fragment length polymorphism“
Transformace 1 - KLONOVÁNÍ
Transkripce a translace
Hybridizace nukleových kyselin
Sacharidová složka nukleotidů
NUKLEOVÉ KYSELINY (NK)
Expresní DNA microarray
Získání klonovaných genů
Molekulární biotechnologie Č.3. Izolace cílového fragmentu DNA (genu) Který představuje malou část genomu (0.02% u E.coli) Umožňují genové či genomové.
Ildikó Németh, Marek Motola, Tomáš Merta
Vítězslav Kříž, Biologický ústav LF MU
Diagnostické amplifikační metody nevyužívající PCR
DNA diagnostika a principy základních metod molekulární biologie
2014 Výukový materiál GE Tvůrce: Mgr. Šárka Vopěnková Projekt: S anglickým jazykem do dalších předmětů Registrační číslo: CZ.1.07/1.1.36/
Molekulární biotechnologie č.10a Využití poznatků molekulární biotechnologie. Molekulární diagnostika.
SMAMII-8 Detekce polymorfismů v genomech. Metody molekulární diagnostiky Se zaměřují na vyhledávání rozdílů v sekvencích DNA a Identifikaci polymorfismů.
Ligázová řetězová reakce
Základy molekulární genetiky. Bílkoviny Makromolekuly složené z aminokyselin jedna molekula bílkoviny tvořena obvykle stovkami aminokyselin v živých organismech.
SEKVENOVÁNÍ DNA. Jedna z metod studia genů Využití v aplikovaných oblastech molekulární biologie – např. medicíně při diagnostice genetických chorob.
Autor: Ing. Michal Řehulka  Přírodní makromolekulární látky (Biopolymery)  Vytvářejí dlouhé vláknité molekuly  Nesou a uchovávají genetickou informaci.
Ch_060_Nukleové kyseliny Ch_060_Přírodní látky_Nukleové kyseliny Autor: Ing. Mariana Mrázková Škola: Základní škola Slušovice, okres Zlín, příspěvková.
NÁZEV ŠKOLY: ČÍSLO PROJEKTU: NÁZEV MATERIÁLU: TÉMA SADY: ROČNÍK:
Klonování DNA a fyzikální mapování genomu
Metabolické děje II. – proteosyntéza
Polymerase chain reaction Polymerázová řetězová rekce
Molekulární biotechnologie
Od DNA k proteinu - v DNA informace – geny – zápis ve formě 4 písmen = nukleotidů = deoxyribóza, fosfátový zbytek, báze (A, T, C, G) - DNA = dvoušroubovice,
Dominika verešová Kateřina Sapáková
1. Regulace genové exprese:
Molekulární základy genetiky
18b-Metody studia nukleových kyselin
MiRNA
INVESTICE DO ROZVOJE VZDĚLÁVÁNÍ
Transkript prezentace:

Ivana Eštočinová, Pavla Fabulová, Markéta Formánková Hybridizace DNA Ivana Eštočinová, Pavla Fabulová, Markéta Formánková

Hybridizace Základní vlastnost NK založená na principu komplementarity bází Proces vytváření dvouřetězcových molekul z jednořetězcových DNA za předpokladu, že se jejich sekvence vyznačují úplnou nebo částečnou komplementaritou bází. Hybridizovat mohou vlákna DNA/DNA, RNA/RNA i DNA/RNA

Postup hybridizace Zvýšení teploty (90°C) nebo pH (13) na hodnotu, při níž dojde k denaturaci Míchání za stálé teploty Proces renaturace - snížení teploty nebo pH - komplementární řetězce se opět spojí vodíkovými můstky na základě komplementarity bází

Výsledek hybridizace Hybridní molekuly DNA - renaturované molekuly, v nichž se spojily řetězce pocházející z molekul DNA různých zdrojů. Homoduplex - hybridní molekula DNA, jejíž řetězce se vyznačují úplnou komplementaritou Heteroduplex - hybridní molekula DNA, jejíž řetězce se vyznačují neúplnou komplementaritou

Sondy Základem hybridizace je vždy značená sonda o známé nukleotidové sekvenci DNA sonda je krátká jednořetězcová DNA (10-1000 nukleotidů), která slouží k nalezení NK obsahující komplementární sekvenci sondy jsou značeny radioaktivními nebo neradioaktivními markery Typy sond restrikční fragmenty dvouřetězcové DNA (cDNA) mRNA izolovaná z buněk nebo tkání RNA transkripty in vitro syntetické oligonukleotidy (připravené podle sekvence aminokyselin)

Hybridizace s radioaktivně značenou sondou

Uspořádání hybridizačního experimentu je rozmanité podle povahy prostředí, ve kterém probíhá

ISH a FISH ISH -in situ hybridization -umožňuje detekci specifických sekvencí v biologickém materiálu FISH - fluorescent in situ hybridization -sonda značená flourescenčním barvivem

Použití FISH pro detekci genů na chromosomech Použito 6 různých sond pro analýzu sekvencí v lidském metafázním chromozomu 5 Každá sonda vytváří 2 tečky na každém chromozomu

Význam hybridizace prenatální diagnostika genetických chorob určení polohy sekvencí NK v buňkách nebo na chromozomech možnost identifikovat jediný gen mezi miliony fragmentů lidské DNA – vysoce specifická metoda

Děkujeme za pozornost.....