8.přednáška Inseminace ovcí a koz

Plodnost ovcí Období pohlavního klidu – anestrus Plodné období - vztah k zeměpisné šířce, u nás v druhé polovině roku  dochází ke zkracování světelného dne = fotoperiodismus Druhá vlna plodného období na jaře, projevy říje slabší Ovlivněno plemennou příslušností, délkou poporodního období, délkou kojení jehňat nebo dojením

Plodnost ovcí Plemena s kombinovanou a masnou užitkovostí plodnost 140% (merino, zušl.valaška, merinolandschaf, charolais, berrichone du cherr) Plemena dojná plodnost 200% (východofrízská) Plodná plemena plodnost nad 200% (romanovská – 250 – 320%, cambridge, booroola)

Sexuální aktivita beranů Období puberty od 4 do 6 měs. věku V 8 měsících plnohodnotné projevy sex. chování Chuť ke skoku (libido sexualis, servisní kapacita berana) – testování pomocí „pen testu“ = zařazení berana do kotce s říjícími ovcemi, po dobu 20 min až 1 hod se sleduje počet páření Beran s dobrou servisní kapacitou pokryje za 20 min 5 ovcí, páří se s říjící ovcí do 2 minut

Odběr berana Stejný typ umělé vagíny jako u býka, zkrácená o 20cm Sběrač skleněný nebo z nespermicidní fólie Teplota ve vagíně 41 – 43oC, vymazat sterilní vazelínou Příprava berana stejná jako u býka Speciální připouštědlo, jako atrapy lze využít ovci v říji Odběr 1- 2x za den pětkrát v týdnu Průměrně od jednoho berana 50-200 inseminačních dávek za týden

Hodnocení spermatu Makroskopické posouzení: barva, zrnitost, pach, přimíseniny Mikroskopické posouzení: aktivita: přímočarý pohyb vpřed za hlavičkou koncentrace: Bürkerova komůrka, fotometricky rezistence: odolnost spermií vůči působení 1% roztoku NaCl dehydrogenační zkouška: dehydrogenační aktivitu (produkce enzymu) mají pouze živé spermie, za jak dlouho dojde k odbarvení roztoku methylénové modři teplý test přežitelnosti: 0,1 cm3 semene se zředí ve fyz.roztoku, inkubace 10 min při 47,5oC, posouzení aktivity stanovení patologických spermií: barvení podle Farellyho

Kvalita spermatu Kvalita závislá na ročním období – na podzim nejlepší Nesmí obsahovat přimíseniny Barva smetanová, zrnité, typický pach Hustota nemá být nižší než 2 x 106 v mm3 pro krátkodobé uchovávání, 2,8 x 106 v mm3 pro zmrazení Objem min 0,5 cm3 Aktivita min 70%, patologických max. 15% Morfologicky normálních spermií 85% pH 6,2 – 6,9 (nad 7 snížená koncentrace sperm.)

Krátkodobá konzervace spermatu Ředidla pro krátkodobé uchovávání (po dobu 8-12 hod): Žloutko-citrátové ředidlo Ředidlo dle Lopyrina (fosforečnan sodný, fosforečnan draselný, glukóza, vaječný žloutek, redestilovaná voda Mléčné ředidlo (mléko, žloutek, glukóza, fosforečnan draselný) Ředění přímo ve sběrači okamžitě po odběru, teplota ředidla stejná jako semene (25-20oC) Stupeň ředění: min.počet spermií v ins.dávce 100-360x106, ředění 1:3 až 5 Uchování naředěného spermatu: Při 15oC uchovávat 5-6 hod Zchlazení na 3-5oC v ledničce (opatrně, citlivé na chladový šok), lez použít do 12 (max 24) hod k inseminaci

Dlouhodobá konzervace spermatu Aktivita rozmraženého spermatu velmi dobrá x oplozovací schopnost velmi špatná nebo žádná 50% mražených ejakulátů vyřazeno pro nízkou oplozovací schopnost Ředidla: TRIS, žloutko-laktózové Plnění do pejet 0,25 – 0,5 cm3 Ekvilibrace s glycerinem 1,5 – 2 hodiny Jednostupňové nebo dvoustupňové zmrazování

Příprava beranů na připouštěcí období 1 měsíc před připouštěcí sezónou Střiž vlny, kontrola tělesné kondice a zdravotního stavu, ošetření paznehtů Kontrola velikosti a konzistence varlat, nadvarlat, schopnost vysunování pyje a čistota předkožky Nácvik odběrů, zvýšení počtu skoků až na 4 za den Vyřazení beranů s dýchacími poruchami, slabou konstitucí a poruchami spermiogeneze Do KD minerální látky, bílkoviny (oves, seno, šťavnaté krmivo) Skupinové ustájení s výběhem

Příprava ovcí na připouštěcí období Posoudit výživný stav (kondici) – nejlépe stupeň 2,5-3 Rozhodnout,zda je nutný flushing (zvýšená úroveň výživy) 2-6 týdnů před připouštěcím obdobím Plodné období po změně délky světelného dne Na severní polokouli 60-120 dnů po letním slunovratu V našich podmínkách srpen – listopad až do předjaří V oblasti rovníku anestrální období není První zapuštění ve věku 7-10 měs. (60% ž.hm. v dospělosti) Délka pohlavního cyklu 16-17 dní (13-21) „ram effect“ : beraní efekt, při příchodu berana do stáda zvyšování hladiny LH v plazmě  urychlení nástupu ovulace (až o 6 týdnů před sezónou), zvýšení % ovulace

Příprava ovcí k inseminaci Folikulární fáze 2 – 3 dny: růst folikulů Luteální fáze 14 – 15 dní: sekrece progesteronu Délka říje 1 – 1,5 dne Tichá říje vyhledávání pomocí prubíře 1-2x denně Na 40 – 50 ovcí jeden prubíř, opatří se zástěrkou, případně značkovacím postrojem Prubíři vyžadují zvýšenou pozornost – hygiena zástěrky

Určení správného času pro inseminaci Doba inseminace je závislá na délce říje a přežitelnosti spermií v pohl.traktu  největší na začátku říje Životnost vajíčka až 24 hodin Kapacitace spermií 4 hodiny Optimální doba pro inseminaci 12-18 (24) hodin po začátku říje Nutno sladit dobu odběru spermatu a dobu provádění inseminace, aby bylo sperma spotřebováno do 8 hod. Reinseminace: 8 – 12 hodin po inseminaci

Metody inseminace Fixace v připouštědle, jednorázová pipeta s pomocí poševního zrcadla se světelným zdrojem, 0,2cm3 spermatu Po zavedení spekula ověření příznaků říje (hlen, otevřenost krčku) Intravaginální metoda: bez zrcadla, do horní části poševní klenby Intracervikální metoda: při inseminaci mraženým semenem, 10-20mm do kanálku děložního krčku Intrauterinní metoda: na kraj dělohy, za pomoci poševního zrcadla

Diagnostika březosti Přesná diagnostika březosti = plné využití reprodukčních schopností bahnic, zajištění správné výživy březím ovcím Zjišťování březosti prubířem: vyhledá nezabřezlé v říji Ultrazvuková diagnostika březosti Laboratorní metody: zjišťování výše hladiny progesteronu v krvi Rektální palpace: poloha na hřbetě, PVC tyč, zavede se do rekta, tlak k páteři,druhou rukou se vyhmatává děloha

Inseminace koz Výběr kozlů na aukčních trzích ve věku 5-6 měs, pohlavní dospělost 6-7 měs. Odběr spermatu jako u berana Frekvence odběru 1 – 2x za den po dva dny za sebou, pak nutná pauza min 1 den Hodnocení spermatu: Objem: 0,4 – 3,0cm3, průměrně 1 cm3 Barva: bílá nebo šedobílá, příp. nažloutlá pH: 6,2 – 7,5 Koncentrace spermií: 0,7 – 5 x 106, pro inseminaci min 0,7x106 Aktivita spermií: pro zmražení min 85%, procento patologických spermií max 15%

Ředění a konzervace spermatu Krátkodobá konzervace: Stupeň ředění závisí na koncentraci, max 1:15 Promývání před ředěním-ejakulát obsahuje enzym, který rozkládá molekuly lecitinu Fyziologický roztok, vaječný žloutek, mléčná ředidla, glukózo-fosfátové ředidlo Konzervace hlubokým mražením: Nejčastěji ředidlo TRIS Stupeň ředění: inseminační dávka (0,1cm3) musí obsahovat 100 x 106 spermií s progresivním pohybem Během ředění stejná teplota, po kapkách ředidlo, ekvilibrace při 1-3oC po dobu 2 hodin Zmrazování v pejetách nebo peletách

Technika inseminace koz Podobně jako u ovcí První den říje, použití poševního zrcadla 0,2 – 0,5cm3 ředěného semene Intracervikální metoda (u prvniček intravaginální) 80-95% březosti po 1. inseminaci Zmrazené semeno výsledky nevyrovnané: 15-85% březosti po 1. inseminaci