Lékařská mykologie (Bi3390) Mukoromykózy Entomophthoromykózy

Prezentace na téma: "Lékařská mykologie (Bi3390) Mukoromykózy Entomophthoromykózy"— Transkript prezentace:

1 Lékařská mykologie (Bi3390) Mukoromykózy Entomophthoromykózy
MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Lékařská mykologie (Bi3390) Mukoromykózy Entomophthoromykózy

2 Mukoromykózy (zygomykózy)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy (zygomykózy) saprofyté (na rostlinách, organických substrátech, v půdě, na exkrementech) původci systémových mykóz (oportunní infekce) rostoucí tendence výskytu u pacientů imunosuprimovaných, s hematoonkologickým onemocněním invazivní infekcí jsou ohroženi pacienti s defektem funkce makrofágů i granulocytů, fagocytóza je důležitým obranným mechanizmem respirační cesta, kožní poranění invazivní infekce - rhinocerebrální a pulmonární mukoromykózy, kožní vzácněji gastrointestinální infekce těžkých popálenin a sepsí, otomykózy zevního zvukovodu (starší diabetici)

3 Mukoromykózy (zygomykózy)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy (zygomykózy) rhinocerebrální forma vyvolá obstrukci nosu, mohutné zduření nosu, tváří a horního rtu, postihuje oči  

4 Mukoromykózy (zygomykózy)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy (zygomykózy) otomykóza - zánět zevního zvukovodu projevující se vatovitým povlakem od žlutobělavé po zelenočernou barvu ve zvukovodu 

5 Mukoromykózy (zygomykózy)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy (zygomykózy) obliba ve stěnách velkých cév + rychlý růst => živého trombu (spleť hyf, trombocytů, lymfocytů) => embolii => smrti účinný pouze amfotericin B klinicky významné rody Rhizopus, Mucor, Rhizomucor, Absidia, Mycocladus, Cuninghamella, Syncephalastrum z řádu Mucorales

6 Klasifikace – říše Fungi
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klasifikace – říše Fungi Microsporidia jsou jednobuněční parazité prvoků a živočichů Hibbett & al. (2007)

7 Fungi Mucoromycotina (Zygomycota)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Fungi Mucoromycotina (Zygomycota) mnohojaderné (coenocytické) neseptované mycelium, přehrádky pro oddělení rozmnožovacích struktur buněčná stěna tvořená chitinem nepohlavní rozmnožování pomocí sporangiospor uvnitř sporangií nesených sporangiofory sporangia - monosporická, multisporická vývojově odvozenější druhy – redukce počtu spor u řady zástupců přítomnost kolumely (sterilní sloupeček) případně s apofýzou sporangium se otvírá rozpadem stěny, na bázi zůstává tzv. límeček kolumela límeček

8 Fungi Mucoromycotina (Zygomycota)
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Fungi Mucoromycotina (Zygomycota) apofýza - rozšířená část sporangioforu přímo pod sporangiem rhizoidy stolony apofýza stolony rhizoidy

9 Fungi Mucoromycotina Mucorales
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Fungi Mucoromycotina Mucorales životní cyklus haplobiotický s převahou haploidní generace - vegetativní stélka je haploidní, zygota je jedinou diploidní buňkou, při jejím klíčení proběhne meióza a vyroste nová haploidní stélka

10 Fungi Mucoromycotina Mucorales
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Fungi Mucoromycotina Mucorales pohlavní proces – gametangiogamie – vzniká zygospora homotalické druhy – gametangia vznikají na stejném myceliu heterotalické druhy – gametangia vznikají na odlišných myceliích amper.ped.muni.cz 

11 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Kultivační média vhodná pro identifikaci zygomycetů sladinový agar (SL) agar s maltextraktem (MEA) termofilní, max. 50 – 52°C bramborodextrózový agar (PDA) Sabouraudův agar (SAB) a podobná média s obsahem peptonu, kvasničného extraktu nebo maltextraktu kultivační podmínky: při 25 °C a 37 °C po dobu 3-7 dní (případně déle). Některé houby je vhodné kultivovat i při 45 °C nebo 50 °C zygospory se tvoří obvykle při 20 °C

12 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizopus Rhizopus microsporus, Rhizopus oryzae invazivní mukoromykózy stolony, svazečky sporangioforů, rhizoidy deštníkový tvar kolumely

13 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizopus microsporus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Rhizopus kolonie světle hnědé až šedé výška 10 mm termofilní, max. 50 – 52°C heterothalický druh

14 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizopus microsporus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Rhizopus stolony a rhizoidy vytvořeny; rhizoidy jednoduché sporangiofory hnědavé, vyrůstají po 1-2 na stolonech proti rhizoidům, maximálně 0,8 mm dlouhé a 10 µm široké sporangia šedočerná, až 80 µm v průměru kolumely téměř kulovité až kuželovité, šedavé sporangiospory angulární (hranaté) a široce elipsoidní, až 6,5 µm velké, na povrchu zřetelně podélně rýhované. zygospory se tvoří nejlépe při 30° C na mediu YEA, jsou červenohnědé, na povrchu s hvězdicovitou ornamentací; suspenzory nestejné, proti sobě postavené

15 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizopus oryzae Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Rhizopus od R. microsporus se liší delšími sporangiofory, většími rhizoidy a neschopností růstu při 45 °C

16 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mucor Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Mucor Mucor circinelloides, Mucor indicus, Mucor ramosissimus a Mucor amphibiorum rhinocerebrální mukoromykózy, infekce těžkých popálenin, otomykózy zevního zvukovodu sporangiofory větvené nebo nevětvené bez rhizoidů a stolonů mnohosporová sporangia s kolumelou

17 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mucor circinelloides sporangiofory až 17 µm široké, opakovaně sympodiálně větvené; větve různé délky, často circinátní (silně zahnuté) max. růstová teplota 37°C

18 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mucor indicus max. růstová teplota 40°C Mucor ramosissimus max. růstová teplota 36°C Mucor amphibiorum max. růstová teplota 36°C

19 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Absidia Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Absidia Absidia coerulea kolonie s fialovým až modrofialovým odstínem neroste při 37 °C

20 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Absidia coerulea Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Absidia stolony, rhizoidy, svazečky sporangioforů, kolumely s větším zaobleným výběžkem a typickou apofýzou zřetelný límeček

21 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Absidia coerulea Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Absidia

22 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mycocladus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mycocladaceae, Mycocladus Mycocladus corymbifer (dříve Absidia corymbifera) kolonie rychle rostoucí (i při 37 °C a 42 °C), vysoké, světle šedé až šedomodré termotolerantní, max °C

23 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mycocladus corymbifer Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mycocladaceae, Mycocladus stolony a rhizoidy nezřetelné sporangiofory jednoduché i rozvětvené; často tvořící přeslen kolumely typicky kuželovité až lopatovité, s jedním nebo s několika krátkými výběžky na vrcholku obří buňky („giant cells“) různého tvaru a velikosti, hojné ve vzdušném myceliu od rodu Absidia se liší umístěním přehrádky pod apofýzou ve větší vzdálenosti a růstem při 37 °C

24 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mycocladus corymbifer Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mycocladaceae, Mycocladus

25 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizomucor Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Rhizomucor Rhizomucor pusillus kolonie nízké, zprvu modrošedé s bělavým okrajem, později šedohnědé termofilní druh, max. 55°C od rodu Mucor se liší především tvorbou stolonů a rhizoidů

26 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Rhizomucor pusillus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Mucoraceae, Rhizomucor hnědavé rhizoidy a stolony sporangiofory větvené monopodiálně nebo sympodiálně většinou pod vrcholkem

27 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Cunninghamella Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Cunninghamellaceae, Cunninghamella Cunninghamella bertholletiae infekce osob s poruchami imunity původce nemocničních nákaz kolonie bílé, později šedé termofilní druh, max. 45°C

28 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Cunninghamella bertholletiae Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Cunninghamellaceae, Cunninghamella rhizoidy vyvinuté, stolony chybí sporangiofory vzpřímené, pseudopřeslenitě větvené, zakončené sporogenními hlavicemi (vezikuly) sporogenní hlavice pokryté krátkými stopkami nesoucími sporangioly (jednosporová sporangia) na povrchu ostnité

29 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Syncephalastrum Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Syncephalastraceae, Syncephalastrum Syncephalastrum racemosum kolonie rychle rostoucí, zprvu bílé, později tmavošedé max. růstová teplota 40°C

30 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Syncephalastrum racemosum Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Syncephalastraceae, Syncephalastrum rhizoidy vyvinuté sporangiofory v mládí jednoduché, později nepravidelně racemózně nebo cymózně větvené, vzpřímené, vystoupavé nebo poléhavé, často podobné stolonům, nepravidelně přehrádkované, zakončené kulovitými sporogenními hlavicemi (vezikuly) merosporangia na povrchu vezikuly; obsahují jednu řadu sporangiospor

31 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Syncephalastrum racemosum Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Syncephalastraceae, Syncephalastrum

32 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Cokeromyces recurvatus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Thamnidiaceae, Cokeromyces koprofilní druh, izolovaný především z trusu hlodavců a ještěrek, také z půdy příležitostný patogen člověka kolonie nízké, s nepravidelným okrajem, zonátní, hnědé až černé barvy

33 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Cokeromyces recurvatus Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Thamnidiaceae, Cokeromyces stolony nejsou vyvinuty sporangiofory jednoduché, terminálně vytvářejí kulovité zduřeniny (sporogenní hlavice), nesoucí několikasporové sporangioly na nepravidelně ohnutých či stočených sekundárních sporoforech sporangioly mají kolumelu a obsahují sporangiospor

34 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Cokeromyces recurvatus

35 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Saksenaea vasiformis Fungi, Mucoromycotina, Mucorales, Saksenaeaceae, Saksenaea kolonie šedé sporangiofory jednotlivě, nevětvené dichotomicky větvené rhizoidy terminální sporangia lahvicovitého tvaru s kolumelou

36 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Mortierella Fungi, Mucoromycotina, Mortierellales, Mortierellaceae sporangia bez kolumely, mnohosporová jednoduché nebo větvené sporangiofory, které se směrem vzhůru zužují oligotrofní, půdní saprofyté Mortierella wolfii – běžný původce potratů skotu v Austrálii a na Novém Zélandu

37 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Basidiobolus Fungi, Mucoromycotina, Basidiobolaceae, Basidiobolus Basidiobolus ranarum běžnou součástí mikroflóry zažívacího traktu zvířat, na odumřelých rostlinách, exkrementy plazů a obojživelníků původce podkožní infekce, méně často gastrointestinální infekce výskyt v tropických oblastech (Afrika, Asie) kolonie žlutošedé až krémově šedé, radiálně zvrásněné satelitní kolonie se tvoří klíčením konidie odmrštěné z primární kolonie

38 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Basidiobolus ranarum Fungi, Mucoromycotina, Basidiobolaceae, Basidiobolus hyfy vegetativního mycelia septované, složeny z krátkých jednojaderných segmentů dva typy nepohlavních spor sporangiofory subterminálně zduřelé odmršťují primární kulovité sporangioly (konidie), na primární konidii je po odmrštění patrná papila - balistokonidie sekundární hruškovité sporangioly se pasivně oddělují od krátkých úzkých sporangioforů přenos do hostitelského organizmu: trávícím traktem obojživelníků (komenzál) => hmyz => hostitel primární konidie zygospory

39 Klasifikace – říše Fungi
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klasifikace – říše Fungi Microsporidia jsou jednobuněční parazité prvoků a živočichů Hibbett & al. (2007)

40 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Conidiobolus Fungi, Entomophthoromycotina, Entomophthorales, Ancylistaceae Conidiobolus coronatus, Conidiobolus incongruus , Conidiobolus lamprauges saprotrofní houby, vyskytující se v půdě, na opadu a na trusu mohou být příčinou mykóz u lidí, koní nebo jiných savců (např. rhinoentomophthoromykózy) tropické oblasti Afriky

41 Klinicky významné mikroskopické huby
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Klinicky významné mikroskopické huby Conidiobolus Fungi, Entomophthoromycotina, Entomophthorales, Ancylistaceae mnohojaderné primární a sekundární sporangioly (konidie) na vrcholu nevětvených sporangioforů (konidioforů) morfologicky i způsobem odstřelení jsou sekundární konidie podobné primárním konidiím stěna mezi konidií a konidioforem je ve zralosti složená ze tří vrstev; střední lamela se rozpustí a spora je papilárním vyklenutím prudce odmrštěna; papila zůstává na konidii patrná i po odmrštění ve starší kultuře se tvoří spory s vlasovými přívěsky na povrchu Mycobank_Advanced&Page=200&ViewMode=Basic

42 Mukoromykózy - diagnostika
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy - diagnostika možnosti diagnostiky značně omezené komerčně dostupné, jednoduché a spolehlivé metody nejsou k dispozici soubor klinických, radiologických, histologických a mikrobiologických metod mikrobiologické metody – kultivace a mikroskopii PCR (od roku 2008) nepodkročitelné minimum laboratorní diagnostiky – identifikace na úroveň rodu Mucor spp., Rhizopus spp., Rhizomucor spp., Absidia spp. (Mycocladus) v případě jiných rodů lze akceptovat spolupráci s NRL

43 Mukoromykózy - diagnostika
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy - diagnostika klinický materiál : stěry z kožních lézí , biopsie plicních lézí , stěry a aspiráty z nosních dutin u pacientů s výskytem rhinocerebrálních lézí , biopsie tkáně od pacientů s gastrointestinálním a / ​​nebo diseminovaným onemocněním upozornění: coenocytické hyfy bývají často při odběru a labortorním zpracování klinického materiálu (homogenizace) poškozené a stávají se neživotaschopnými a tudíž obtížně kultivovatelnými pro kultivační průkaz je zapotřebí se vyhnout nadměrnému poškození tkáně při odběru a laboratorním zpracování vzorků dobře prokazatelné přímou mikroskopií: stěry , sputum a exudát - louhový preparát (Parker, Calcofluor) tkáňové řezy se barví pomocí HE, PAS, a stříbření dle Grocotta vzorky se vyznačují přítomností širokých, tenkostěnných, zřídka septovaných, nepravidelně větvených hyf s častými dilatacemi

44 ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ http://www.sci.muni.cz/ccm
Mukoromykózy generalizovaná sekundární mukoromykóza, 24 letý muž, plicní céva

45 Mukoromykózy Rhyzopus v mozkové tkáni, nepravidelné, tlusté, duté hyfy
ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ Mukoromykózy Rhyzopus v mozkové tkáni, nepravidelné, tlusté, duté hyfy

46 ČESKÁ SBÍRKA MIKROORGANISMŮ http://www.sci.muni.cz/ccm
Mukoromykózy Rhyzopus, 70 letá žena s diabetem, infekce maxilární dutiny s invazivním šířením do očnice a mozku