Genetická transformace bakterií II

Prezentace na téma: "Genetická transformace bakterií II"— Transkript prezentace:

1 Genetická transformace bakterií II

2 Obsah soupravy a) lyofilizovaný vzorek E. coli HB101 K-12
b) lyofilizovaný vzorek plazmidu pGLO c) lyofilizovaný vzorek ampicillinu d) lyofilizovaný vzorek arabinózy e) Transformační roztok f) LB nutrient broth a b c d e f

3 Příprava agarových ploten
a) příprava média b-d) nalévání misek v pořadí LB – LB/amp – LB/amp/ara e) skladování připravených Petriho misek před použitím  

4 d e a b c

5 Příprava „startovací“ kultury E. coli
a) pomůcky potřebné na inokulaci agarové plotny obnoveným vzorkem bakteriální kultury b) růst „startovací" kultury v termostatu při 37°C (nebo při pokojové teplotě) c) „startovací“ kultura připravená k transformaci b a c

6 Transformace buněk E. coli HB101 plazmidem pGLO
a) agarová plotna se „startovací“ kulturou, inokulační klička a potřebné roztoky b) označené agarové plotny připravené k výsevu transformovaných bakterií c) inkubace bakterií v termostatu nastaveném na 37°C d) výsledek transformace – plotny v pořadí LB – LB/amp – LB/amp/ara e) detail kontrolní plotny LB f) detail plotny LB/amp g) detail plotny LB/amp/ara při denním světle a po osvícení UV světlem h) detail plotny LB/amp/ara při denním světle a po osvícení UV světlem   

7 LB LB/amp LB/amp/ara h a b c d e f

8 g h

9 Děkuji za pozornost