Stáhnout prezentaci
Prezentace se nahrává, počkejte prosím
ZveřejnilVladimíra Svobodová
1
Detekce mutací v myelin protein zero (MPZ) genu u pacientů s dědičnými neuropatiemi – první nálezy mutací v ČR P. Seeman, P. Šušlíková, V. Beneš, M. Čtvrtečková, R. Mazanec Klinika dětské neurologie a Neurologická klinika dospělých UK 2. LF a FN Motol Praha
2
Dědičné periferní neuropatie CMT, HMSN HMSN – hereditární motoricko sensitivní neuropatie CMT-Charcot-Marie-Tooth – synonymum Dědičné neuropatie – distální svalová slabost, distální atrofie svalů, poruchy citlivosti, typické nálezy na EMG a biopsii nervu, dědičnost většinou AD, někdy GD, vzácně AR CMT 1 – demyelinizační – častější CMT2 – axonální - vzácnější Nejčastějším (70%) DNA defektem u CMT je duplikace PMP22 genu na 17p11.2-12, dále geny Cx32, MPZ, bodové mutace v PMP22 – typ 1 V poslední době genové defekty u CMT2
3
HMSN chromosomální lokalizace a geny
4
Myelin protein zero (MPZ).
5
173bp 307bp 278bp 309bp exon 1 exon 2 exon 3exon 4exon 5 MPZ gen schema exon 6
6
Heterogenita a polyfenie u HMSN/CMT Heterogenita - podobný fenotyp způsoben mutacemi v různých genech Polyfenie -mutace v jednom genu způsobují velmi odlišné fenotypy
7
Odlišné, různé HMSN fenotypy spojené s mutacemi v MPZ genu. Charcot – Marie – Tooth type 1B (demyelinating) Dejerine – Sottas neuropatie (DSN) Kongenitální hypomyelinizace (CHN) Charcot – Marie – Tooth typ 2 (axonální) - „novinka“
8
Výběr pacientů klinické a elektrofyziologické příznaky svědčí pro onemocnění CMT 1 nebo CMT 2 vyloučena duplikace / delece oblasti 17p. obsahující gen PMP 22 vyloučení mutace v genu pro Connexin 32 ( v indikovaných případech, kde dle rodokmenu není přenos z muže na muže)
9
Vyšetření MPZ genu u CMT Kompletně vyšetřeno 6 pacientů ve všech 6 exonech MPZ genu Exon 3, kde bylo popsáno nejvíce mutací byl vyšetřen u 26 pacientů s CMT 1 i 2 Nález 3 různých mutací v MPZ genu u 3 rodin, 2 z mutací již popsané, 1 mutace nová - zvláštní fenotyp i průběh, nález 2 silent polymorfizmů
10
Metodika - izolace DNA z periferních lymfocytů - PCR amplifikace fragmentů obsahující exony 1, 2, 3, 4, 5+6 - kontrolní agarosová elektroforesa - purifikace PCR produktů pomocí kolonek QIAquick - koncentrační gel s vyčistěnými produkty - sekvenační reakce pomocí kitu Big Dye Terminator - alkoholová precipitace sekvenačních reakcí - elektroforesa a analýza na automat. sekvenátoru ABI 310 - porovnání sekvence získané se sekvencí publikovanou
11
Axonální fenotyp – CMT2, pozdní začátek Rodina F.
13
Progresivní hluchotaProgresivní hluchota a nereagující zornice (Argyll - Robertsonovy) jako první příznaky CMT Periferní neuropatie u matky a jejího otce, klinický obraz (atrofie distálního svalstva) doprovázen elektrofyziologickým nálezem axonálního typu postižení, biopsie – axonální postižení, syn klinicky zdráv, elektrofyziologicky hraniční nález,
14
distální atrofie a slabost
15
no pes cavus, severe footdrop pronounced hand muscle atrophies
16
Nerve and muscle biopsy in nr. 622 (mother) Normal control nervemuscle
17
290 A>T (Glu97Val) in MPZ gene
18
MPZ protein mutace Glu 97 Val - rodina F. Glu 97 Val
19
Demyelinizační typ postižení se závažnými klinickými projevy HMSN III – Dejerine-Sottas Rodina K.
20
Mutace Arg98Cys – sousední aminokyselina k předchozímu případu
21
Rodina K. Matka:- velmi časné postižení – od předškolního věku, hypertrofická demyelinizační neuropatie (onion bulbs), HMSN III, její rodiče zdraví, pac ve třetí dekádě postupná ztráta sluchu, Syn: podobné a též velmi časné postižení – typ HMSN III, nikdy nebyl schopen normální samostatné chůze psychický vývoj normální (vystudoval obchodní školu opožděný motorický vývoj oba mají zpomalenou reakci zornic na osvit
22
Rodina K. matka syn
23
MPZ protein Arg98Cys - rodina K. Arg 98 Cys
24
MPZ protein Arg98Cys - rodina K. Mutace de-novo u matky, Mutace má dominantní efekt – nalezena u obdobně postiženého syna
25
Mutace T124M v MPZ proteinu Thr 124 Met
26
Rodina L. Probandka – obtíže od 38 let, sensitivní obtíže, pak progresívní polyneuropatie, vyšetření EMG axonální polyneuropatie Abnormální reakce zornic od asi 16 let, výrazně zpomalená fotoreakce ( na osvit), pozorováno i u dcery a syna, ti dosud klinicky bez polyneuropatie Vyšetřena dosud pouze probandka, příbuzní se dosud nedostavili
27
Thr 124 Met
28
Polymorfizmus Ser 228 Ser
29
MPZ protein Glu 97 Val Thr 124 Met Arg 98 Cys
30
Závěry Mutace v MPZ genu u různých CMT fenotypů – CMT1 i CMT2 Zvláštní fenotyp u některých mutací – axonální neuropatie, abnormální reakce zornic, hluchota, pozdní začátek Mutace v MPZ jsou 3. nejčastější příčinou CMT/HMSN U pacientů s CMT2 vyšetřovat MPZ gen
Podobné prezentace
© 2024 SlidePlayer.cz Inc.
All rights reserved.