Laboratorní diagnostika

Slides:



Advertisements
Podobné prezentace
Borrélie – úskalí laboratorní diagnostiky
Advertisements

Radioimunoesej, enzymoimunoesej – princip, využití
AUTOPROTILÁTKY V DIAGNOSTICE AUTOIMUNITNÍCH IMUNOPATOLOGICKÝCH
Obranné vlastnosti krve
TEST AKTIVACE BAZOFILŮ
IMUNOCHEMIE.
VYŠETŘENÍ BUŇKAMI ZPROSTŘEDKOVANÉ IMUNITY.
Selhání imunitní tolerance: alergie a autoimunita
Průtoková cytometrie.
Vyšetření parametrů buněčné imunity
Metody s využitím reakce antigen-protilátka
Vyšetření specifické imunity
Základní imunitní mechanismy
Vyšetřování parametrů humorální imunity
Somatologie Mgr. Naděžda Procházková
IMUNITNÍ SYSTÉM IMUNITA = schopnost organismu chránit se před patogeny (bakterie,viry,houby,prvoci  onemocnění) Nespecifická : Fagocytóza granulocytů,monocytů.
Imunologie seminář 1 Imunologie seminář 1 J. Ochotná
OBĚHOVÁ SOUSTAVA Imunita Mgr. Jan Marek VY_32_INOVACE_Bi3r0215.
I. Imunoglobuliny Martin Liška.
Laboratorní diagnostika
Detekce spirochet Rod 1. Treponema pallidum – (syfilis) turbidimetrie, latexová aglutinace, elektrochemiluminiscence 2. Leptospira interrogans sensu lato.
Středn í zdravotnick á š kola, N á rodn í svobody P í sek, př í spěvkov á organizace Registračn í č í slo projektu: CZ.1.07/1.5.00/ Č.
Laboratorní metody 2 Kurs Imunologie II.
Imunita Cholera, 19. století.
Precipitace, radioimunodifúze (RID), nefelometrie, turbidimetrie
CHEMIE IMUNITNÍCH REAKCÍ
8. VZNIK REPERTOÁRŮ ANTIGENNĚ SPECIFICKÝCH RECEPTORŮ.
Indikace a interpretace imunologických laboratorních vyšetření (seminář) Doc.MUDr.Petr Čáp,PhD
Řízení imunitního systému Kurs Imunologie. Hlavní histokompatibilní systém (MHC) objeven v souvislosti s transplantacemi starší termín: HLA dvě hlavní.
Specifická (adaptivní) imunita B, T lymfocyty, protilátky
Laboratorní metody 1 Kurs Imunologie.
Protiinfekční imunita 2
IMUNOFLUORESCENCE MUDr. Zita Trávníčková
Krev SCHÉMATA, OBRÁZKY.
SÉROLOGICKÉ REAKCE reakce mezi antigenem a protilátkou význam in vivo
Fagocytóza = základní nástroj nespecifické imunity (společně s komplementem) fagocytující buňky proces fagocytózy.
Komplementový systém a nespecifická imunita
Metody imunodifuze a precipitace v gelech
Imunochemické metody řada metod založených na principu reakce:
Ústav klinické imunologie a alergologie
Serologické vyšetřovací metody
VYUŽITÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE V DIAGNOSTICE ALERGICKÝCH ONEMOCNĚNÍ
Diagnostika autoimunitních onemocnění
IMUNOESEJE.
Přednáška 2hod, ukončení : kolovium – psaní testu Teorie bude použita z odborných knih kombinovaná s vlastní praxí a zkušeností jednotlivých firem a s.
Molekulární biotechnologie č.10a Využití poznatků molekulární biotechnologie. Molekulární diagnostika.
Tělní tekutiny Autor: Eva Klabenešová
Základní příznaky onemocnění imunitního systému Doc.MUDr.Kateřina Štechová, Ph.D. Obrázky a další materiály potenc.problemtaické stran autorských.
Imunologie a alergologie
Laboratorní diagnostika
Vyšetření specifické imunity
Laboratorní metody 1 Kurs Imunologie II.
Imunologie seminář 1 Imunologie seminář 1 J. Ochotná
Vyšetřování parametrů humorální imunity
Precipitace, radioimunodifúze (RID), nefelometrie, turbidimetrie
Ústav klinické imunologie a alergologie
Vyšetřování parametrů buněčné imunity
Příklady flexibility v imunologii
Serologické vyšetřovací metody
IMUNOFLUORESCENCE MUDr. Zita Trávníčková
IMUNOESEJE.
Laboratorní diagnostika
Imunologie seminář 1 Imunologie seminář 1 J. Ochotná
Složení krve krevní plazma – tekutá složka b) krevní buňky
Laboratorní diagnostika
Laboratory diagnostics
Laboratory diagnostics
Laboratory diagnostics
Laboratorní diagnostika
Protilátky využívané v diagnostice Monoklonální protilátka – je produkována klonem buněk pocházejících z jedné plazmatické buňky; váže se velmi specificky.
Transkript prezentace:

Laboratorní diagnostika Doporučený zdroj ke studiu: WWW.E-LABMED.CZ

Stanovení humorálních analytů Precipitace Aglutinace Turbidimetrie Nefelometrie

Imunoprecipitace Srážení - proces, při němž dochází interakcí antigenu a protilátky ke vzniku (imuno)precipitátu. Vzhledem k tomu, že protilátky mají v molekule nejméně dvě identická vazebná centra pro daný antigen, mohou při vhodném koncentračním poměru obou partnerů vznikat polymerní, nerozpustné a snadno detekovatelné komplexy. Tohoto principu využívá celá řada imunochemických metod ke kvalitativnímu i kvantitativnímu stanovení antigenů nebo jim příslušných protilátek.

- vznik nerozpustného precipitátu při reakci ekvivalentních koncentrací rozpustného antigenu s rozpustnou protilátkou (tj. vzniká zesíťovaná struktura mnoha navzájem vázaných antigenů a protilátek, která již v roztoku není rozpustná)

Aglutinace Shlukování korpuskulárních částic s povrchovými antigenními strukturami v důsledku interakce se specifickou protilátkou. Antigenem jsou zde obyčejně buňky (bakterie, erytrocyty) nebo syntetické částice (např. latexové) s adsorbovanými antigeny. Tyto částice se působením protilátek shlukují a charakteristickým způsobem sedimentují; na základě vzniku zákalu lze takto stanovit i velmi nízké koncentrace protilátek (kolem 10 ng/ml). Na stejném principu fungují i citlivé testy pro stanovení antigenů.

Imunofixace vzorku séra zdravé osoby Legenda: sloupec 1: elektroforéza séra další sloupce: imunochemický průkaz jednotlivých těžkých a lehkých řetězců imunoglobulinů, je zřetelná polyklonální produkce

Stanovení humorálních analytů Precipitace Aglutinace Turbidimetrie Nefelometrie

ELISA – průkaz specifických protilátek

Základní složky ELISA testu Antigen detekovaný v testovaném vzorku známý, komerčně připravovaný Protilátka detekovaná v testovaném séru známá, komerčně připravovaná Konjugát jedná se opět o protilátku proti protilátce (konkrétně proti druhově specifickým imunoglobulinům příslušného izotypu (IgG, IgM, IgA, IgE), na kterou je navázaný enzym (konjugovaná enzymem) Substrát je chemická látka, která reaguje s enzymem a tím změní svou barvu

RAST

ELISA – průkaz antigenu

Klasická 96-jamková destička pro metodu ELISA

Nepřímá imunofluorescence

Stanovení parametrů buněčné imunity Počty buněk – subpopulace Testy fagocytózy Testy aktivace lymfocytů

fluorochrom je konjugován s primární protilátkou - analýza plné krve - průtoková cytometrie

Průtoková cytometrie

http://probes. invitrogen http://probes.invitrogen.com/resources/education/tutorials/4Intro_Flow/player.html

„Gatování“ lymfocytů pomocí FS a SS

Stanovení celkových a pomocných T lymfocytů

Stanovení T a B lymfocytů

Stanovení aktivovaných lymfocytů (aktivační marker HLA-DR)

KLINICKY VÝZNAMNÉ POPULACE LEUKOCYTŮ CD3+ T lymfocyty: populace zralých T lymfocytů 50 - 75% CD4+ T lymfocyty: subpopulace pomocných induktorových T lymfocytů 30 - 60% CD8+ T lymfocyty: subpopulace tlumivých cytotoxických T lymfocytů 15 - 30% CD25+ T lymfocyty: aktivované T lymfocyty 1 - 5% CD19+ B lymfocyty: populace zralých B lymfocytů 5 - 15% CD56+ NK buňky: přirozeně zabíječské buňky 5 - 15% CD14+ buňky: monocyty CD15+ buňky: granulocyty CD38+ buňky: plazmatické buňky

FUNKČNÍ TESTY TESTOVÁNÍ FUNKCÍ T LYMFOCYTŮ IN VITRO je založeno na testování: schopnosti T lymfocytů proliferovat schopnosti T lymfocytů produkovat cytokiny PROLIFERACE T LYMFOCYTŮ: in vitro kultivace kultivační media (thymové působky) CO2 atmosféra

HODNOCENÍ FAGOCYTÁRNÍCH FUNKCÍ absolutní počet granulocytů je pro funkci fagocytózy kritický k testování fagocytózy se používají izolované granulocyty populace granulocytů je mimořádně citlivá na poškození nově lze hodnotit počty a funkce fagocytujících buněk průtokovou cytometrií

Přednášky k tématům laboratorní diagnostika AUTOPROTILÁTEK a vyšetření BUNĚČNÉ IMUNITY najdete i na webu LF HK http://www.lfhk.cuni.cz/UKIA/

Orgánové specifické autoprotilátky Protilátky proti štítné žláze Protilátky proti beta buňkám pankreatu Protilátky proti acetylcholinovému receptoru Protilátky proti pohlavním žlázám

Systemové autoprotilátky Protilátky proti buněčnému jádru (ANA, ENA) Revmatoidní faktor (RF) Protilátky proti cytoplazmě neutrofilů (ANCA) Protilátky proti fosfolipidům (APA)

Orgánově nespecifické autoprotilátky u orgánově lokalizovaných autoimunitních chorob ANCA (nespecifické střevní zánětlivé omenocnění) //+ASCA// Autoprotilátky proti transglutamináze (celiakie) SS-A, SS-B (Sjögenův syndrom)