Volné radikály a antioxidanty

Slides:



Advertisements
Podobné prezentace
Citrátový cyklus a Dýchací řetězec
Advertisements

Metody stanovení oxidativního stresu 1 Oxidativní stres redoxní rovnováha poškození biologických makromolekul.
JÁTRA.
METABOLISMUS A HLAVNÍ MECHANISMY TOXICITY CIZORODÝCH LÁTEK
Mechanismus přenosu signálu do buňky
III. fáze katabolismu Citrátový cyklus
Redoxní reakce = Oxidačně-redukční reakce (učebnice str. 60???)
ENZYMY = biokatalyzátory.
REDOXNÍ DĚJ RZ
Metabolismus A. Navigace B. Terminologie E. Sacharidy I. Enzymy
Metabolismus sacharidů
Biochemie volných radikálů, oxidačního stresu a stárnutí
FOTOSYNTÉZA photós = světlo synthesis = skládání.
METABOLISMUS SACHARIDŮ
Citrátový cyklus a Dýchací řetězec
Klasifikace chemických reakcí
Obecné principy metabolismu Biologické oxidace, makroergní sloučeniny
Chemická stavba buněk Září 2009.
Metabolismus sacharidů
Cyklus trikarboxylových kyselin, citrátový cyklus, Krebsův cyklus.
Nutný úvod do histologie
Steroidní hormony Dva typy: 1) vylučované kůrou nadledvinek (aldosteron, kortisol); 2) vylučované pohlavními žlázami (progesteron, testosteron, estradiol)
Volné radikály a antioxidanty
Antioxidanty Hejmalová Michaela.
DÝCHACÍ ŘETĚZEC. enzymy jsou umístěny na vnitřní membráně mitochondrií získání energie (tvorba makroergických vazeb v ATP) probíhá oxidací redukovaných.
Výuková centra Projekt č. CZ.1.07/1.1.03/
Biokalyzátory chemických reakcí
Fotosyntéza Základ života na Zemi.
DÝCHACÍ ŘETĚZEC.
Dýchací řetězec a oxidativní fosforylace
Přibližný obsah prvků v lidském těle o hmotnosti 70 kg
Redox procesy – přenos elektronů Marcus a Hush: 4  3 2 (  G ° + ) 2 k ET k ET = · H AB · exp – h 2 k B T 4 k B T.. – – nuclear reorganisation parameter.
BIOSYNTÉZA SACHARIDŮ.
Heterocyklické sloučeniny
Cyklus kyseliny citrónové, citrátový cyklus.
Bioenergetika Pro fungování buněčného metabolismu nutný stálý přísun energie Získávání, přenos, skladování, využití energie Na co se energie spotřebovává.
Citrátový cyklus a dýchací řetězec
1 DÝCHACÍ ŘETĚZEC. 2 PRINCIP -většina hetero. organismů získává hlavní podíl energie (asi 90%) procesem DÝCHÁNÍ = RESPIRACE -při tomto ději – se předávají.
Analýza dat při vývoji diagnostiky azbestózy a silikózy Jitka Housková Studijní obor: Syntéza a výroba léčiv Vedoucí práce: Ing. P. Kačer, Ph.D.
MITOCHONDRIÁLNÍ TRANSPORTNÍ SYSTÉMY
Volné radikály a antioxidanty
Inzulin a tak Carbolová Markéta.
Problematika volných radikálů a antioxidantů v medicíně
Antioxidanty a volné radikály
Reaktivní formy kyslíku
ENZYMY 2. FÁZE BIOTRANSFORMACE:
CITRÁTOVÝ CYKLUS = KREBSŮV CYKLUS= CYKLUS TRIKARBOXYLOVÝCH KYSELIN CH 3 CO-ScoA + 3H 2 O  2CO  H  + CoASH.
Metabolismus sacharidů II. Anabolismus sacharidů Autotrofní organismy mají schopnost syntetizovat sacharidy z jednoduchých anorganických sloučenin – oxidu.
JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH ZDRAVOTNĚ SOCIÁLNÍ FAKULTA ODBORNÝ PRACOVNÍK V OCHRANĚ A PODPOŘE VEŘEJNÉHO ZDRAVÍ Nikol Vokáčová 2015/2016.
Cvičení, sport a oxidační stres Jan Novotný, 2016.
Antioxidační systém živého organismu. Aerobní svět Efektivní produkce energieEfektivní produkce energie Kyslík toxickýKyslík toxický Antioxidační systémyAntioxidační.
Plazmatické proteiny
Antioxidanty  Antioxidanty jsou látky, které zabraňují oxidačním procesům probíhajícím v našem těle  Oxidační procesy v těle vyvolávají volné radikály.
Inovace předmětu Gastronomické technologie III (FT6A/2014) Stanovení antioxidační aktivity a celkových polyfenolů v zeleninových salátech Institucionální.
Je celková antioxidační kapacita potravin kritériem jejich biologické hodnoty ? Z. Zloch Ústav hygieny Lékařské fakulty UK, Plzeň.
Antioxidanty vs. volné radikály Souboj dobra a zla? Jana Kubalová.
Zlepšování podmínek pro výuku technických oborů a řemesel Švehlovy střední školy polytechnické Prostějov registrační číslo : CZ.1.07/1.1.26/
Fotosyntéza.
Antioxidanty vs. volné radikály
Buňka  organismy Látkové složení.
METABOLISMUS KYSLÍKU A VOLNÉ RADIKÁLY.
Zjišťování výživových zvy 2.10.
Stanovení genotypu a aktivity alkohol dehydrogenasy z krve
Plazmatické proteiny.
METABOLISMUS KYSLÍKU A VOLNÉ RADIKÁLY.
Problematika volných radikálů a antioxidantů v medicíně
Antioxidanty a volné radikály
REAKTIVNÍ FORMY KYSLÍKU A DUSÍKU A METODY JEJICH STANOVENÍ
10-Redoxní pochody, dýchací řetězec FRVŠ 1647/2012
Biochemie – Citrátový cyklus
Transkript prezentace:

Volné radikály a antioxidanty Jak poznáme volný radikál? Reaktivní formy kyslíku a dusíku Jsou volné radikály vždy pohromou? Co je to oxidační stres? Co je to antioxidant? Které známe? Jak umíme oxidační stres kvantifikovat? Onemocnění spojená s oxidačním stresem

Volný radikál Atom: proton, neutron, elektronový obal (orbital) Radikál: obsahuje volný nepárový elektron v zevním orbitalu (může to být atom i molekula, neutrál či ion) homolytické štěpení kovalentní vazby většina biomolekul nejsou radikály

Jak se vyvíjel zájem o radikály ? chemik 30. léta - předpověď existence superoxidu biochemik 60. léta - superoxiddismutasa (SOD) lékař radikálové metabolity poškozují biomolekuly

Radikál: snaha o spárování elektronů, většinou značná reaktivita Radikálová reakce Radikál: snaha o spárování elektronů, většinou značná reaktivita Obecně tři stadia iniciace propagace terminace

ROS (reactive oxygen species) volné radikály superoxid, O2 · - hydroxylový radikál, OH · peroxyl, ROO · alkoxyl, RO · hydroperoxyl, HO2 · nejsou volnými radikály peroxid vodíku, H2O2 (Fentonova reakce) kyselina chlorná, HClO ozon, O3 singletový kyslík, 1O2

RNS (reactive nitrogen species) volné radikály oxid dusnatý, NO . oxid dusičitý, NO2 . nejsou volnými radikály nitrosyl, NO+ kyselina dusitá, HONO oxid dusitý, N2O3 oxid dusičitý, N2O4 peroxynitrit, ONOO - alkylperoxinitrit, ROONO

Odkud se volné radikály berou? hlavní producenti ROS : membránově vázané enzymy popř. koenzymy flavinové struktury, hemové koenzymy, enzymy s Cu v aktivním centru 1. respirační řetězec mitochondrií : především superoxid a následně H2O2 cca 1- 4% O2 vstupujícího do resp. řetězce (hlavně komplexy I a III)

Odkud se volné radikály berou? II 2. endoplazmatické retikulum vznik superoxidu (cytochrom P- 450) 3. specializované buňky (leukocyty, makrofágy) produkce superoxidu NADP-oxidasou 4. oxidace hemoglobinu na methemoglobin (erytrocyt je „nabit“ antioxidanty)

Funkce volných radikálů ve zdravém organismu Nástroj oxidas a oxygenas cytochromoxidasa (toxické meziprodukty, H2O2 a superoxid, vázány na enzymu) monoxygenasy (oxygenasy se smíšenou funkcí) - aktivují O2 v ER jater nebo v mitochondriích nadlevin; hydroxylace

Funkce volných radikálů ve zdravém organismu II ROS a RNS proti bakteriím enzymový komplex NADPH-oxidasa leukocytů a makrofágů myeloperoxidasa - katalýza reakce H2O2 + Cl- + H+ = HClO + H2O

Funkce volných radikálů ve zdravém organismu III signální molekuly primární posel  sekundární posel  info síť redoxní stav buňky ovlivňuje funkci této sítě redoxní stav: kapacita antioxidačního systému, dostupnost redukčních ekvivalentů, intenzita oxidační zátěže (RONS)  ROS: sekundární poslové

Imunitní ochrana vs.regulace masivní produkce ROS jako nástroj imunitní ochrany x indukce změn nízkých koncentrací ROS, jež jsou pravděpodobně regulačním mechanismem

Antioxidační ochranný systém Tři typy ochrany zábrana tvorby nadměrného množství RONS záchyt a odstranění radikálů (lapače, vychytávače, zhášeče) reparační mechanismy poškozených biomolekul

Přehled antioxidantů a vychytávačů VR 1. Endogenní antioxidancia enzymová (cytochrom c, SOD, GSHPx, katalasa) neenzymová - membránová ( -tokoferol, -karoten, koenzym Q 10) - nemembránová (askorbát, uráty, transferin, bilirubin)

Přehled antioxidantů a vychytávačů VR II 2. Exogenní antioxidancia inhibitory vzniku VR (regulace aktivit enzymů) scavengery vzniklých VR (enzymy, neenzymy) stopové prvky (Se, Zn)

Enzymové antioxidační systémy

Superoxiddismutasa (EC 1.15.1.1, SOD) 2O2. - + 2H+  H2O2 + O2 SOD - téměř ve všech aerobních organismech tři druhy - různé kofaktory (vždy metal atom) indukce při vyšší tvorbě superoxidu

Superoxiddismutasa Mn 2+ SOD (SOD1) tetramer matrix mitochondrie menší stabilita než Cu, Zn - SOD fylogeneticky mladší

Superoxiddismutasa Cu 2+/Zn 2+ SOD (SOD 2) dimer, Cu = redoxní centrum cytosol, intermitochondriální prostor hepatocyt, mozek, erytrocyt vysoká stabilita, katalýza při pH 4,5-9,5

Glutathionperoxidasy odstraňují intracelulární hydroperoxidy a H2O2 2 GSH + ROOH  GSSH + H2O + ROH cytosolová GSH - glutathionperoxidasa (EC 1.11.1.9, cGPx) extracelulární GSH - glutathionperoxidasa (eGSHPx) fosfolipidhydroperoxid GSH - peroxidasa (EC 1.11.1.12, PHGPx)

Katalasa (EC 1.11.1.6, KAT) 2 H2O2  2 H2O + O2 inaktivace H2O2 : peroxisomy a mitochondrie hepatocytu, cytoplasma erytrocytu tetramer obsahující Fe, přítomnost NADPH

Vysokomolekulární endogenní antioxidanty transferin feritin haptoglobin hemopexin albumin

Nízkomolekulůrní endogenní antioxidanty I Askorbát (vitamin C) syntéza kolagenu přeměna dopaminu na noradrenalin redukční činidlo vstřebávání železa antioxidační účinek = redukce O2 · - , OH ·, ROO·, HO2 · regenerace tokoferylového radikálu prooxidant Alfa-tokoferol a vitamin E antioxidant membrán produkuje hydroperoxidy, které zneškodňuje GSHPx

Ascorbic acid a její metabolity

Nízkomolekulární endogenní antioxidanty II ubichinon (koenzym Q) přenašeč elektronů v dýchacím řetězci tlumí radikálové rekce ve spolupráci s tokoferolem karotenoidy, -karoten, vitamin A odstranění radikálů v lipidech

Nízkomolekulůrní endogenní antioxidanty III glutathion (GSH, GSSG) ve všech savčích buňkách (1-10 mmol/l) významný redox pufr 2 GSH  GSSG + 2e- + 2H+ likviduje ROS, stabilizuje v redukované SH- sk., regeneruje tokoferyl a askorbát substrát glutathionperoxidas

Nízkomolekulůrní endogenní antioxidanty IV kyselina lipoová (lipoát) kofaktor PDH regenerace tokoferylu, askorbátu melatonin hormon hypofýzy (regulace spánkového cyklu) lipofilní; vychytávač hydroxylových radikálů

Nízkomolekulůrní endogenní antioxidanty V kyselina močová (urát) - odpadní látka? nejhojnější antioxidant plasmy, významná reabsorpce, vychytávání RO. , HClO, vazba Fe, Cu bilirubin - inhibice lipoperoxidace flavonoidy - chelatace Fe, antikarcinogenní a protizánětlivé účinky

Stopové prvky ovlivňující VR Selen ovlivňuje resorpci vit. E, součást selenoproteinů  Se = nedostat. imunitní odp.., hemolýza erytrocytů, syntéza methemoglobinu Zinek stabilizace buněčných membrán zvýšení imunitní odpovědi, antagonista Fe

Oxidační stres Při porušení rovnováhy mezi vznikem a odstraňováním RONS nastává tzv. oxidační stres Rovnováha může být porušena na obou stranách!!

Poškození lipidů - atak na nenasycené MK ztráta násobných vazeb vznik reaktivních metabolitů (aldehydy) Důsledek změna fluidity propustnosti membrán vliv na membránově vázané enzymy

Peroxidace kyseliny linolenové

Poškození proteinů Poškození agregace a síťování, fragmentace a štěpení reakce s hemovým železem modifikace funkčních skupin Důsledek změny transportu iontů změny aktivity enzymů proteolýza

Poškození DNA Poškození štěpení cukerného kruhu modifikace bází zlomy řetězce Důsledek mutace translační chyby inhibice proteosyntézy

Jak umíme oxidační stres kvantifikovat ? Detekce volných radikálů poměrně náročné vzhledem vzhledem k fyz. chem. vlastnostem Měření produktů oxidačního stresu jednodušší, široká paleta markerů oxidačního stresu

Markery oxidačního stresu Posouzení lipoperoxidace: malondialdehyd (MDA), konjugované dieny, izoprostany Posouzení poškození proteinů : proteinové hydroperoxidy Posouzení poškození DNA : stanovení modifikovaných nukleosidů

Stanovení antioxidantů askorbát tokoferol SOD GSHPx glutathion

Onemocnění spojená s oxidačním stresem Neurologická Alzheimerova choroba Parkinsonova choroba Endokrinní Diabetes Gastrointestinální Akutní pankreatitida

Onemocnění spojená s oxidačním stresem Vaskulární Ateroskleroza Ostatní Obezita Transplantace orgánů

Literatura Štípek Stanislav a kol.: Antioxidanty a volné radikály ve zdraví a nemoci, Grada, 2000 Free radicals and antioxidant protocols edited by Armstrong D., Methods in Molecular biology, volume 108, HUMANA PRESS, Toronto, New Yersey, 1998