BARRANDE 2006-2007 (2-06-28) Odpovědný řešitel: HERDER Stephane VOTÝPKA Jan Partnerská organizace: CIRAD LRCT IRD-CIRAD, TA 207 G Campus Internat. de Baillarguet 34398 Montpellier cedex 5 France Přírodovědecká fakulta Univerzita Karlova Praha Další organizace zapojené do projektu: (uveďte všechny) Parazitologický ústav Akademie věd ČR České Budějovice Další účastníci projektu: (jméno, tituly) Milan Jirků Jana Rádrová Požadavky pro rok 2006: Francouzi do ČR Češi do Francie Celkový počet osob: Celkový počet pobytů: Celková délka všech pobytů (počet dnů): 1 10 3 40
Montpellier – Francie 2006-2007 IRD – CIRAD
Studium vývoje trypanosom v přenašečích a hostitelské preference krevsajícího hmyzu 2006 Vývoj trypanosomy spavičné v mouše tse-tse
Nejdůležitější subtropická a tropická infekční onemocnění (dle WHO)
Počet úmrtí způsobených spavou nemocí v Africe
Spavá nemoc Životní cyklus Trypanosoma gambiense a T. rhodesiense
Sekvenování (cDNA, celý genom) Funkční genomika obecné poznatky – biotechnologie u patogenů – léčba A) Klasická – knock-out genu v genomu B) Nová metoda – RNAi tj. knock-out vybraných genů na úrovni TRANSKRIPCE … dojde ke zničení cílové mRNA !!!
Trypanosoma brucei brucei Kmen 29-13 Modifikace pro RNAi: T7 RNA polymeráza TET represor Lokus pro vložení plazmidu aj. Selekce: NEOMYCIN HYGROMYCIN PHLEOMYCIN Indukce: TETRACYKLIN
Některé geny se projeví pouze v přenašeči Ale: Je trypanosoma ještě schopná infekce pro testování RNAi knock-outů in vivo v glosíně? Dochází k vývoji v glosíně? Není pro vývoj v glosíně škodlivý tetracyklin? Je možné indukovat RNAi u trypanosom po vytvoření infekce ve střevě glosíny
Glossina morsitans morsitans
TAKŽE TESTOVAT RNAi in vivo LZE !!!!!! Glosíny se nakazí jak T.b.b. 29-13 s vektorem tak bez vektoru. Dochází k vývoji v glosíně – MG infekce. Tetracyklin není pro vývoj komplikací. Pro test indukce RNAi trypanosom ve střevě glosíny byl vytvořen GFP model. TAKŽE TESTOVAT RNAi in vivo LZE !!!!!!