Izolace karotenoidních barviv z rostlinného materiálu T-Report Izolace karotenoidních barviv z rostlinného materiálu
Chromatografie Chromatografie je separační metoda, využívající rozdílné afinity jednotlivých složek směsi k mobilní a stacionární fázi. Na exkurzi jsme si vyzkoušeli několik chromatografických technik: Chromatografie na tenké vrstvě (TLC – Thin Layer Ch.) Sloupcová chromatografie (CC – Column Ch.) Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC – High Performance Liquid Ch.)
Chromatografie na tenké vrstvě stacionární fáze - destička pokrytá silikagelem mobilní fáze – organické rozpouštědlo TLC jsme využili na rychlou analýzu předloženého vzorku a později na kontrolu čistoty izolovaných karotenoidů.
Sloupcová chromatografie stacionární fáze – silikagel mobilní fáze – rozpouštědlo Stacionární i mobilní fáze se umístí do chromatografické kolony, na filtrační papír na vrcholu vrstvy silikagelu se nakape vzorek a převrství se rozpouštědlem. Rozpouštědlo protékající kolonou rozdělilo směs tak, že bylo možno karotenoidní složku jímat do baňky
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie stacionární fáze – různé mobilní fáze – velmi čistá rozpouštědla HPLC zařízení se skládá z několika částí: degaser – odplynění mobilní fáze pumpa – nasává eluent pod vysokým tlakem autosampler – vstřikuje na kolonu vzorek kolona – je naplněná stacionární fázi, probíhá v ní rozdělování jednotlivých složek detektor – identifikace složek, odesílá výsledky počítači ke zpracování
Kromě chromatografie jsme si na exkurzi vyzkoušeli také práci s rotační vakuovou odparkou a naučili jsme se jak se vytahují skleněné kapiláry používané na dávkování vzorků na TLC.
sloupcová chromatografie TLC před a po izolaci karotenoidů sestava pro HPLC