oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a BIOPTICKÁ LABORATOŘ- PR lab spol.s r.o.
KLASIKA versus KIT Výrobce použitých kitů BIO-OPTICA, dodavatel ZENA-R, spol.s r.o.
KLASIKA versus KIT ALCIÁN VAN-GIESON GRAM GIESON-ELASTIKA TRICHROM GÖMORI GROCOT barvení PEROPERAČNÍ BIOPSIE
ALCIÁN barvení kyselých mukopolysacharidů Klasická metoda KIT Alcian blu pH2,5(04-160802) 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 3. diferencování v kyselém alkoholu 4. modrání jader v obyčejné vodě 10min 5. 1% ALCIÁNOVÁ MODŘ 10min 6. oplach destil.vodou 7. 1% KYSELINA FOSFOMOLYBDENOVÁ 5min 8. oplach destil.vodou 9. PIKROFUCHSIN HALE 5min 10. osušit filtračním papírem, neoplachovat! 11. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 10 kapek REAGENT A 30min bez oplachu, jen slít 10 kapek REAGENT B 10min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C 5min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 13,23kč Doba barvení 50min Doba barvení 40min
kyselé mukopolysacharidy Klasická metoda kyselé mukopolysacharidy MODRO-ZELENĚ 1. 2. 3. KIT
VAN-GIESON barvení kolagenu Klasická metoda KIT Van Gieson Trichrome(04-030802) 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 3. modrat v pramenité vodě (bez diferenciace!!) 10min 4. PIKROFUCHSIN 5min 5. osušit filtračním papírem 6. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 5+5 kapek REAGENT A+B 10min tekoucí voda 10min 10 kapek REAGENT C 10min krátký oplach destil.voda odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 12,71kč Doba barvení 35min Doba barvení 25min
Klasická metoda 1. kolagen TŘEŠŇOVĚ-ČERVENÁ 2. KIT
GRAM barvení bakterií Klasická metoda KIT Gram(04-100802) 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. JÁDROVÁ ČERVEŇ 5 – 10min 3. oplach destil.vodou 4. GENCIANVIOLEŤ(filtrovat na tkáň) 10min 5. oplach LUGOLEM 6. LUGOL 5min 7. diferencovat ACETON : ALKOHOL 1:1 8. osušit filtračním papírem 9. odvodnit krátce od acetonu, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda Coplinová nádoba REAGENT A 56-58°C 15min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT B 3min bez oplachu, nechat odkapat 10 kapek REAGENT C 3min okapat a osušit vzduchem 10min Coplinová nádoba REAGENT D protřepat 1min Coplinová nádoba REAGENT E protřepat 1min očistit xylenem, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 40min Doba barvení 30min
Klasická metoda 1. 2. 3. KIT bakterie GRAM+ MODŘE bakterie GRAM- ČERVENĚ 1. 2. 3. KIT
GIESON-ELASTIKA barvení elastických vláken Klasická metoda KIT Weigert long method(04-050802) for elastic fibers 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. RESORCIN-FUCHSIN při 56°C 1,30hod 3. osušit filtračním papírem 4. diferencovat v 70% alkoholem (až zůstanou vlákna červenofialová) 5. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 6. oplach destil.vodou 7. modrání v pramenité vodě 10min 8. PIKROFUCHSIN HALE 5min 9. osušit filtračním papírem 10. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 5+5 kapek REAGENT A+REAGENT B 5min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C 5min Coplinová nádoba REAGENT D přes noc osušit filtračním papírem 10 kapek REAGENT E 10min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 24 hodin ! Doba barvení 115min
Klasická metoda 1. 2. 3. KIT elastická vlákna ČERVENO-FIALOVÉ KIT MODRO-ČERNÉ 1. 2. 3. KIT
TRICHROM barvení kolagenu Klasická metoda (ZELENÝ) KIT Masson Trichrome(04-010802) method with aniline blue 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. HARRISŮV HEMATOXYLIN 5min 3. oplach destil.vodou 4. diferencovat kys.alkoholem 5. modrat v tekoucí vodě 10min 6. FUCHSIN S 3min 7. oplach destil.vodou 8. 1% kys.FOSFOMOLYBDENOVÁ 5min 9. oplach destil.vodou 10.SVĚTLÁ ZELEŇ 3min 11.oplach 1% kyselinou OCTOVOU 12.1% kyselina OCTOVÁ 2min 13.oplach destil.vodou 14.odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 6+6 kapek REAGENT A+REAGENT B 10min neoplachovat, jen slít 10 kapek REAGENT C 4min krátký oplach destil.vodou 10 kapek REAGENT D 4min oplach destil.vodou 10 kapek REAGENT E 10min bez oplachu, jen slít 10 kapek REAGENT F 5min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 20,79kč Doba barvení 35min Doba barvení 35min
Klasická metoda kolagenní vazivo ZELENĚ KIT- MODŘE 1. 2. 3. KIT
GÖMORI barvení retikulinových vláken KIT Silver Impregnation(04-040801) for reticulum Klasická metoda 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. 0,25% MANGANISTAN DRASELNÝ 10min 3. oplach destil.vodou 4. 2% PYROSIŘIČITAN DRASELNÝ 1min 5. oplach destil.vodou 6. 2% SÍRAN ŽELEZITO-AMONNÝ 1min 7. pořádný oplach destil.vodou 8. impregnace STŘIBŘICÍM ROZTOKEM 1min 9. pořádný oplach destil.vodou 10.REDUKCE–roztokem formalínu 5min 11.oplach destil.vodou 12.1% CHLORID ZLATITÝ 7min 13.oplach destil.vodou 14.5% SÍRNATAN SODNÝ 3min 15.oplach destil.vodou 16.JÁDROVÁ ČERVEŇ 5-10min 17.oplach destil.vodou 18.odvodnit, projasnit, zamontovat řezy odparafinovat, destil.voda 5+5kapek REAGENT A+B 5min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C 3min 10 kapek REAGENT D 3min 10 kapek REAGENT E 3min 10 kapek REAGENT F 5min 10 kapek REAGENT G 5min tekoucí voda 5min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 35min Doba barevní 45min
Klasická metoda retikulinová vlákna ČERNĚ 2. 1. KIT
GROCOT barvení plísní Klasická metoda KIT Grocott(04-043823) 1. odparafinovat, destil.voda 2. 10 kapek REAGENT A 20min 3. krátký oplach tekoucí vodou 4. 10 kapek REAGENT B 1min 5. tekoucí voda 5min 6. krátký oplach destil.vodou 7. do Coplinové nádoby smíchat: 17ml destil.vody +20 kapek REAGENT C +10 kapek REAGENT D +20 kapek REAGENT E inkubace při 60°C 1hodina 8. vychladnout 10min 9. krátký oplach destil.voda 10. 10 kapek REAGENT F 3min 11. oplach destil.voda 12. 10 kapek REAGENT G 5min 13. oplach tekoucí voda 14. 10 kapek REAGENT H 30sekund 15. odvodnit, projasnit, zamontovat řezy odparafinovat, destil.voda 5% KYS.CHROMOVÁ 1hod vypírat pod tekoucí vodou projasnění 1% SIŘIČITAN SODNÝ 1min oplach destil.vodou 3x STŘÍBŘÍCÍ ROZTOK při 56°C 1-2hod 1% CHLORID ZLATITÝ 5min oplach destil.vodou 5% SIRNATAN SODNÝ 3min JÁDROVÁ ČERVEŇ 5-10min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 110min Doba barvení cca 145min
Klasická metoda plísně ČERNĚ 1. 2. 3. KIT
BARVENÍ peroperační biopsie „ZMRAZÁKU“ KIT –hematoxylin Rapid frozen sections(04-061010) REAGENT A 1min oplach tekoucí voda REAGENT B 5x oplach REAGENT C 30sekund oplach 95% etanol oplach čistý líh oplach xylen zamontovat Klasická metoda -hematoxylin HŘEBÍČKOVÝ OLEJ 2-3vteřiny, slít osušit filtračním papírem oplach 70% alkoholem KOĎOUSKŮV HEMATOXYLIN 1-3min oplach destil.vodou modrání ve čpavkové vodě 1min EOSIN 1min odvodnit, projasnit, zamontovat cena 9,45kč Doba barevní 2-3min Doba barvení 6-8min TOLUIDINOVÁ MODŘ aceton 2-3vteřiny, slít, osušit 1% TOLUIDINOVÁ MODŘ 1min oplach destil. vodou odvodnit od acetonu, projasnit, zamontovat QUICK MGG QUICK STAIN(04-090805) osušit vzduchem REAGENT A 5x po 1 sekundě REAGENT B 5x po 1 sekundě REAGENT C 3-5 po 1 sekundě oplach vodou cena 12,29kč Doba barvení 20sekund Doba barvení 2-3min
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin QUICK (MGG QUICK STAIN) TOLUIDINOVÁ MODŘ
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)
2000 1995 2005
KLASIKA versus KIT Děkujeme za pozornost AUTOŘI: Daniela Galiová Petra Mariančíková Fotografické snímky preparátů: MUDr.Libor Kudělka Děkujeme za pozornost