Antibiogram bakteriálního kmene

Prezentace na téma: "Antibiogram bakteriálního kmene"— Transkript prezentace:

1 Antibiogram bakteriálního kmene

2 Sterilní fyziologický roztok ve zkumavce
Pomůcky: Sterilní fyziologický roztok ve zkumavce Bakteriální kolonie na agaru Mueller Hintonovo kultivační médium Sterilní vatová tyčinka Nákres rozložení Disky s antibiotiky

3 1. Příprava inokula „I“

4 1.1. Z Petriho misky odeberte sterilní očkovací kličkou jednu bakteriální kolonii.
POZOR! Manipulaci provádějte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku.

5 POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku.
1.2. Ponořte očkovací kličku do zkumavky s 5 ml fyziologického roztoku. Opatrně otřete kličku o stěnu zkumavky pod hladinou roztoku. 1.3. Opakujte 4x, do zkumavky tak nanesete 5 bakteriálních kolonií POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí kolem Bunsenova hořáku.

6 I 1.4 Promíchejte obsah zkumavky krouživými pohyby a napište na ni « I ».

7 2. Očkování Mueller Hintonova media pro antibiogram

8 POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí Kolem Bunsenova hořáku.
2.1. Do zkumavky “I” ponořte výtěrovou tyčinku. Namočte tampon v inokulu a poté jemným tlakem o stěnu zkumavky odstraňte přebytečný roztok. POZOR! Pracujte v aseptickém prostředí Kolem Bunsenova hořáku.

9 2. 2. Naočkujte Mueller Hintonův agar by vatovým tamponem
2.2. Naočkujte Mueller Hintonův agar by vatovým tamponem. Očkovací čáry vedeme těsně vedle sebe. 2.3. Otočte misku o 60°proveďte znovu předchozí krok. Celé zopakujte ještě 1x, aby bylo jisté, že je inokulum rozprostřeno po celé ploše misky. 60° = Streaks in 3 passes

10 2. Umístění disků s antibiotiky

11 3.1. Umístěte Mueller Hintonovo médium na nákres rozložení antibiotik.
3.2. Sterilní pinzetou přeneste disky s antibiotiky na povrch média dle nákresu. Disky umístěte opatrně! Mírným tlakem zajistíte přilnutí disku s antibiotiky k médiu. Netlačte moc, abyste nepoškodili agar.

12 Médium inkubujte dnem vzhůru po dobu
4. Inkubace média Médium inkubujte dnem vzhůru po dobu 16 h při min. 37°C.

13 5. Analyzujte výsledky

14 5.1. Druhý den po inkubaci změřte průměr inhibičních zón kolem disků s antibiotiky.

15 5.2. Pomocí této tabulky stanovte senzitivitu či rezistenci bakteriálního kmene vůči různým testovaným antibiotikům. Antibiotic tested Resistance if the diameter of inhibition is less than : Sensitive if the diameter of inhibition is greater than : Ampicillin 14 mm 19 mm SXT 10 mm 16 mm Erythromycin 17 mm 22 mm Gentamicin

16 6. Závěr Navrhněte nejvhodnější antibiotika pro léčbu nozokomiální infekce způsobené vaší bakterií.