Non-cell-autonomous action of STAT3 in maintenance of neural precursor cells in the mouse neocortex Takeshi Yoshimatsu, Daichi Kawaguchi, Koji Oishi, Kiyoshi.

Prezentace na téma: "Non-cell-autonomous action of STAT3 in maintenance of neural precursor cells in the mouse neocortex Takeshi Yoshimatsu, Daichi Kawaguchi, Koji Oishi, Kiyoshi."— Transkript prezentace:

1 Non-cell-autonomous action of STAT3 in maintenance of neural precursor cells in the mouse neocortex Takeshi Yoshimatsu, Daichi Kawaguchi, Koji Oishi, Kiyoshi Takeda, Shizuo Akira, Norihisa Masuyama and Yukiko Gotoh* Institute of Molecular and Cellular Biosciences, University of Tokyo

2 Neurogeneze C (TA) A (neuroblast) E (ependym) ? radial glia* astrocyt glia prekursor neurony oligo- dendrocyt Shh; Delta/Notch -> Hes Sox1, 2, 3; Emx2; Zic1; Pax6 B (NSC) *radiální glie – embryo a časně postnatálně EGF / FGF2 (in vitro) embryo in vitro = neurosphere

3 Signální dráha FGFs (Fibroblastové růstové faktory) Bottcher a Niehrs, 2005

4 STAT3 – signální transduktor a aktivátor transkripce - transkripční faktor - aktivita regulována fosforylací tyrosinu 705 (JAK) a serinu 727 (MEKK, Erk, p38) - významný pro regulaci proliferace a differenciace u většiny typů buněk - nezbytný pro vývoj embrya - upregulován u ~70% nádorů - není známa onkogenní forma

5 Boiani & Scholer 2005 !

6 Signální dráha Notch a) b) a) klasická dráha signální transdukce Notch, po navázání ligandu (DSL rodina = Delta, Serrate, Lag-2; Jagged) dojde k odštěpení extracelulární části receptoru a následně i intracelulární (NICD – Notch intacellular domain), ta translokuje do jádra a v dimeru s CSL (= CBF1 – Cp binding factor 1) aktivuje transkripci. b) dráha snad aktivovaná dosud neznámým faktorem, kdy dochází k aktivaci proteinu Deltax, který pak inhibuje JNK a CBP/p300 aktivitu. Brennan 2003 - obecně regulace diferenciace - regulace NSC - overexprese u nádorů

7 STAT3 DNA STAT3 P P AKTIVACE (LIF/LIFR/gp130->JAK2->) Delta STAT3 x NOTCH

8 Kondiciovaní mutanti – Cre / LoxP system

9 siRNA technologie

10 Imunoprecipitace chromatinu Chip – chromatin immunoprecipitation

11 Hypotéza: FGF2 udržuje neurální kmenové buňky - která z aktivovaných signálních drah je za to odpovědná??? - je působení této dráhy přímé (autonomní) nebo nepřímé (neautonomní)

12 Fig. 1. Inhibition of FGF2-dependent NPC maintenance by an inhibitor of JAK2

13 Fig. 2. Expression of STAT3 in the embryonic mouse brain

14 Fig. 3. Requirement of STAT3 for maintenance of FGF2-sensitive NPC

15 Fig. 4

16 Fig. 5. Inhibition of neurogenesis by STAT3 in a non-cell-autonomous manner

17 Fig. 6 Regulation of DLL1 expression by STAT3

18 Fig. 7. Requirement of Delta-Notch signaling for NPC maintenance by STAT3