Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Část I Část I.

Prezentace na téma: "Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Část I Část I."— Transkript prezentace:

1 Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Část I Část I

2 Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Úloha v diagnostice a léčbě Úloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principy Regulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavky Metodiky a požadavky Interpretace výsledků Interpretace výsledků Klinické aplikace (část II) Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II) Perspektivy (část II)

3 Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Úloha v diagnostice a léčbě Úloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principy Regulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavky Metodiky a požadavky Interpretace výsledků Interpretace výsledků Klinické aplikace (část II) Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II) Perspektivy (část II)

4 Diagnostika (onkopatologie) Zpřesnění diagnózy (typizace nádorů) Zpřesnění diagnózy (typizace nádorů) Určení prognózy nádoru – odhad biologického chování resp. přežití Určení prognózy nádoru – odhad biologického chování resp. přežití Studium prognostického významu nových markerů (buněčný cyklus, apoptóza) v diagnostice nádorů Studium prognostického významu nových markerů (buněčný cyklus, apoptóza) v diagnostice nádorů

5 Prognostické faktory Prognostické faktory Klinické Klinické -věk -recidiva Histologické Histologické -mitózy -nekrózy -jaderná polymorfie -neovaskularizace Genetické Genetické Molekulárně biologické Molekulárně biologické

6 Léčba Léčba Predikce – odhad reakce nádoru (nádorových buněk) na terapii Predikce – odhad reakce nádoru (nádorových buněk) na terapii Stanovení citlivosti nádoru na terapii Stanovení citlivosti nádoru na terapii Sledování efektivnosti protinádorové léčby Sledování efektivnosti protinádorové léčby Studium protinádorového efektu nových potencionálně účinných látek Studium protinádorového efektu nových potencionálně účinných látek

7

8 Prediktivní a prognostická patologie Úloha v diagnostice a léčbě Úloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principy Regulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavky Metodiky a požadavky Interpretace výsledků Interpretace výsledků Klinické aplikace (část II) Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II) Perspektivy (část II)

9

10 CDK, cykliny a inhibitory CDK

11 Přehled a lokalizace onkogenů a nádory suprimujících genů (převzato z R. Hesketh, The Oncogene Facts Book, Academic Press, p 41, 1995 Přehled a lokalizace onkogenů a nádory suprimujících genů (převzato z R. Hesketh, The Oncogene Facts Book, Academic Press, p 41, 1995)

12 Struktura proteinu p53 (převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 17, 1999)

13 Funkce p53 (převzato z Cell. Mol. Life Sci., Vol 55, p 22, 1999)

14 Protein 27 a jeho role v buněčném cyklu

15 Prediktivní a prognostická patologie Úloha v diagnostice a léčbě Úloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principy Regulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavky Metodiky a požadavky Interpretace výsledků Interpretace výsledků Klinické aplikace (část II) Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II) Perspektivy (část II)

16 Metodiky běžně používané Metodiky běžně používané Metodiky používané nedostatečně Metodiky používané nedostatečně Metodiky běžně nepoužívané Metodiky běžně nepoužívané Požadavky Požadavky -odebrání a zpracovaní materiálu -archivace materiálu -archivace výsledků Metodiky

17 Metodiky běžně používané Metodiky běžně používané Určení proliferační aktivity (imunohistochemické stanovení Ki67, PCNA) Určení proliferační aktivity (imunohistochemické stanovení Ki67, PCNA) Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková cytometrie) Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková cytometrie) Stanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, onkofetálních antigenů (imunohistochemie, průtoková cytometrie) Stanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, onkofetálních antigenů (imunohistochemie, průtoková cytometrie) Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory (imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…) Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory (imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…) Stanovení chromozomálních poruch – především v hematoonkologii (FISH, CGH) Stanovení chromozomálních poruch – především v hematoonkologii (FISH, CGH)

18 Metodiky používané nedostatečně Metodiky používané nedostatečně Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu a apoptózy Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu a apoptózy Stanovení exprese proteinů regulovaných růstovými faktory a hormony Stanovení exprese proteinů regulovaných růstovými faktory a hormony Stanovení apoptotického (nekrotického) indexu pro monitorování průběhu léčby Stanovení apoptotického (nekrotického) indexu pro monitorování průběhu léčby Stanovení exprese proteinů zapojených do MDR Stanovení exprese proteinů zapojených do MDR Stanovení exprese a aktivity telomerázy Stanovení exprese a aktivity telomerázy

19 Metodiky používané nedostatečně Metodiky používané nedostatečně Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese souvisí s činností reparačních mechanizmů Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese souvisí s činností reparačních mechanizmů Stanovení exprese produktů genů odpovědných za reparaci chybného párování Stanovení exprese produktů genů odpovědných za reparaci chybného párování Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace cytochromu P450 Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace cytochromu P450 Stanovení exprese NO-S Stanovení exprese NO-S

20 Metodiky běžně nepoužívané Metodiky běžně nepoužívané Proteinové a DNA „micro-arrays“ Proteinové a DNA „micro-arrays“

21 Metodiky běžně používané Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory (imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…) Metodiky běžně používané Stanovení exprese receptorů pro růstové faktory (imunohistochemické: steroidní hormony, c-erbB-2…)

22 Metodiky běžně používané Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková cytometrie) Metodiky běžně používané Stanovení DNA ploidie (počítačová obrazová analýza, průtoková cytometrie)

23 Metodiky běžně používané Stanovení diferenciačních markerů (CD), onkoproteinů, atd.

24 Metodiky používané nedostatečně Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu a apoptózy Metodiky používané nedostatečně Stanovení exprese proteinů zapojených do regulace buněčného cyklu a apoptózy Exprese p27: dobře diferencováný spinocelulární karcinom

25 Metodiky používané nedostatečně Stanovení exprese klíčových nádorových supresorů jejichž exprese souvisí s činností reparačních mechanizmů Linie U87-MG Exprese p21 a p53 v buněčnýcyh liních gliálních nádorů mozku

26 Požadavky (odebrání a zpracovaní materiálu) Požadavky (odebrání a zpracovaní materiálu) Šetrný odběr (rizika artefaktů!!) Šetrný odběr (rizika artefaktů!!) Fixace Fixace Zalití do parafínu Zalití do parafínu Zmražení Zmražení Přenesení do živného media (explantace, primokultura) Přenesení do živného media (explantace, primokultura)

27 Požadavky (archivace materiálu) Požadavky (archivace materiálu) Fixovaný materiál Fixovaný materiál -archiv bloků Nefixovaný materiál Nefixovaný materiál -lednice (4 ° C) -mrazicí boxy (-20 ° C) -hlubokomrazící boxy (-80 ° C) Živé buňky Živé buňky -tekutý dusík (-196 ° C)

28 Požadavky (archivace výsledků) Požadavky (archivace výsledků) Obrazové databáze (CD, software) Obrazové databáze (CD, software)

29 Prediktivní a prognostická patologie Prediktivní a prognostická patologie Úloha v diagnostice a léčbě Úloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principy Regulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavky Metodiky a požadavky Interpretace výsledků Interpretace výsledků Klinické aplikace (část II) Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II) Perspektivy (část II)

30 Interpretace výsledků Interpretace výsledků Jednoznačné prognostické indikátory Jednoznačné prognostické indikátory Součást komplementární diagnostiky Součást komplementární diagnostiky Součást studií Součást studií