Jak chránit DNA před zářením

Prezentace na téma: "Jak chránit DNA před zářením"— Transkript prezentace:

1 Jak chránit DNA před zářením
Lucie Dudková Markéta Nečasová Hana Pařízková

2 Struktura DNA

3 Typy poškození DNA

4 Scavengery Látky vychytávající volné radikály
Antioxidanty – thioly, vitamin E, vitamin C, alkoholy, aj. Námi použité: glycylglycin a ethanol

5 Určení koncentrace DNA
Plasmid pBR322

6 Příprava vzorků 100 ng DNA Aditiva: Doplněno vodou na objem 10 μl
Glycylglycin o koncentraci 0,1 mM, 1 mM a 10 mM Ethanol (slivovice) – 1 μl a 5 μl Doplněno vodou na objem 10 μl

7 Ozařování 60Co, poločas rozpadu 1 925,5 dní γ záření
Ozářeno dávkou 5 Gy (29 min 8 s)

8 Příprava gelu 1% roztok agaru v 0,5x TAE
Přidáno fluorescenční barvivo SYBR Green I

9 Elektroforéza Do vzorků přidáno nanášecí barvivo
Elektroforéza při napětí 100 V po dobu 1 hod

10 Výsledek elektroforézy

11 Zpracování výsledků Program Luthien

12 Jednoduché zlomy (počet/plasmid)
Výsledky Složení vzorku Neozářený vzorek Ozářený vzorek Stočená forma (% DNA) Jednoduché zlomy (počet/plasmid) Stočená forma (% DNA) DNA 89.23 0.114 91.4 0.090 DNA + glygly (0,1 mM) 95.12 0.050 82.93 0.187 DNA + glygly (1 mM) 86.7 0.143 74.1 0.300 DNA + glygly (10 mM) 92.77 0.075 80.65 0.215 DNA + 1 μl ethanolu 93.12 0.071 94.06 0.061 DNA + 5 μl ethanolu 95.01 0.051 93.74 0.065

13 Shrnutí Ethanol je schopen chránit DNA před zářením
Radioprotektivní účinky glygly se prokázat nezdařilo

14 Poděkování Ing. Marii Davídkové FJFI ČVUT
Ing. Vojtěchu Svobodovi a ostatním organizátorům Týdne vědy

15 Děkujeme za pozornost!