oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a

Prezentace na téma: "oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a"— Transkript prezentace:

1 oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a
BIOPTICKÁ LABORATOŘ- PR lab spol.s r.o.

2 KLASIKA versus KIT Výrobce použitých kitů BIO-OPTICA, dodavatel ZENA-R, spol.s r.o.

3 KLASIKA versus KIT ALCIÁN VAN-GIESON GRAM GIESON-ELASTIKA TRICHROM
GÖMORI GROCOT barvení PEROPERAČNÍ BIOPSIE

4 ALCIÁN barvení kyselých mukopolysacharidů
Klasická metoda KIT Alcian blu pH2,5( ) 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN min 3. diferencování v kyselém alkoholu 4. modrání jader v obyčejné vodě min 5. 1% ALCIÁNOVÁ MODŘ min 6. oplach destil.vodou 7. 1% KYSELINA FOSFOMOLYBDENOVÁ 5min 8. oplach destil.vodou 9. PIKROFUCHSIN HALE min 10. osušit filtračním papírem, neoplachovat! 11. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 10 kapek REAGENT A min bez oplachu, jen slít 10 kapek REAGENT B min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 13,23kč Doba barvení 50min Doba barvení 40min

5 kyselé mukopolysacharidy
Klasická metoda kyselé mukopolysacharidy MODRO-ZELENĚ 1. 2. 3. KIT

6 VAN-GIESON barvení kolagenu
Klasická metoda KIT Van Gieson Trichrome( ) 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN min 3. modrat v pramenité vodě (bez diferenciace!!) min 4. PIKROFUCHSIN min 5. osušit filtračním papírem 6. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 5+5 kapek REAGENT A+B min tekoucí voda min 10 kapek REAGENT C min krátký oplach destil.voda odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 12,71kč Doba barvení 35min Doba barvení 25min

7 Klasická metoda 1. kolagen TŘEŠŇOVĚ-ČERVENÁ 2. KIT

8 GRAM barvení bakterií Klasická metoda KIT Gram(04-100802)
1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. JÁDROVÁ ČERVEŇ – 10min 3. oplach destil.vodou 4. GENCIANVIOLEŤ(filtrovat na tkáň) 10min 5. oplach LUGOLEM 6. LUGOL min 7. diferencovat ACETON : ALKOHOL 1:1 8. osušit filtračním papírem 9. odvodnit krátce od acetonu, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda Coplinová nádoba REAGENT A °C 15min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT B min bez oplachu, nechat odkapat 10 kapek REAGENT C min okapat a osušit vzduchem min Coplinová nádoba REAGENT D protřepat 1min Coplinová nádoba REAGENT E protřepat 1min očistit xylenem, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 40min Doba barvení 30min

9 Klasická metoda 1. 2. 3. KIT bakterie GRAM+ MODŘE
bakterie GRAM- ČERVENĚ 1. 2. 3. KIT

10 GIESON-ELASTIKA barvení elastických vláken
Klasická metoda KIT Weigert long method( ) for elastic fibers 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. RESORCIN-FUCHSIN při 56°C 1,30hod 3. osušit filtračním papírem 4. diferencovat v 70% alkoholem (až zůstanou vlákna červenofialová) 5. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN min 6. oplach destil.vodou 7. modrání v pramenité vodě min 8. PIKROFUCHSIN HALE min 9. osušit filtračním papírem 10. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 5+5 kapek REAGENT A+REAGENT B 5min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C min Coplinová nádoba REAGENT D přes noc osušit filtračním papírem 10 kapek REAGENT E min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 24 hodin ! Doba barvení 115min

11 Klasická metoda 1. 2. 3. KIT elastická vlákna ČERVENO-FIALOVÉ
KIT MODRO-ČERNÉ 1. 2. 3. KIT

12 TRICHROM barvení kolagenu
Klasická metoda (ZELENÝ) KIT Masson Trichrome( ) method with aniline blue 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. HARRISŮV HEMATOXYLIN min 3. oplach destil.vodou 4. diferencovat kys.alkoholem 5. modrat v tekoucí vodě min 6. FUCHSIN S min 7. oplach destil.vodou 8. 1% kys.FOSFOMOLYBDENOVÁ min 9. oplach destil.vodou 10.SVĚTLÁ ZELEŇ min 11.oplach 1% kyselinou OCTOVOU 12.1% kyselina OCTOVÁ min 13.oplach destil.vodou 14.odvodnit, projasnit, zamontovat odparafinovat, destil.voda 6+6 kapek REAGENT A+REAGENT B 10min neoplachovat, jen slít 10 kapek REAGENT C min krátký oplach destil.vodou 10 kapek REAGENT D min oplach destil.vodou 10 kapek REAGENT E min bez oplachu, jen slít 10 kapek REAGENT F min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 20,79kč Doba barvení 35min Doba barvení 35min

13 Klasická metoda kolagenní vazivo ZELENĚ KIT- MODŘE 1. 2. 3. KIT

14 GÖMORI barvení retikulinových vláken
KIT Silver Impregnation( ) for reticulum Klasická metoda 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. 0,25% MANGANISTAN DRASELNÝ 10min 3. oplach destil.vodou 4. 2% PYROSIŘIČITAN DRASELNÝ min 5. oplach destil.vodou 6. 2% SÍRAN ŽELEZITO-AMONNÝ min 7. pořádný oplach destil.vodou 8. impregnace STŘIBŘICÍM ROZTOKEM 1min 9. pořádný oplach destil.vodou 10.REDUKCE–roztokem formalínu min 11.oplach destil.vodou 12.1% CHLORID ZLATITÝ min 13.oplach destil.vodou 14.5% SÍRNATAN SODNÝ min 15.oplach destil.vodou 16.JÁDROVÁ ČERVEŇ min 17.oplach destil.vodou 18.odvodnit, projasnit, zamontovat řezy odparafinovat, destil.voda 5+5kapek REAGENT A+B min oplach destil.voda 10 kapek REAGENT C min 10 kapek REAGENT D min 10 kapek REAGENT E min 10 kapek REAGENT F min 10 kapek REAGENT G min tekoucí voda min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 35min Doba barevní 45min

15 Klasická metoda retikulinová vlákna ČERNĚ 2. 1. KIT

16 GROCOT barvení plísní Klasická metoda KIT Grocott(04-043823)
1. odparafinovat, destil.voda kapek REAGENT A min 3. krátký oplach tekoucí vodou kapek REAGENT B min 5. tekoucí voda min 6. krátký oplach destil.vodou 7. do Coplinové nádoby smíchat: ml destil.vody +20 kapek REAGENT C +10 kapek REAGENT D +20 kapek REAGENT E inkubace při 60°C hodina 8. vychladnout min 9. krátký oplach destil.voda kapek REAGENT F min 11. oplach destil.voda kapek REAGENT G min 13. oplach tekoucí voda kapek REAGENT H sekund 15. odvodnit, projasnit, zamontovat řezy odparafinovat, destil.voda 5% KYS.CHROMOVÁ hod vypírat pod tekoucí vodou projasnění 1% SIŘIČITAN SODNÝ 1min oplach destil.vodou 3x STŘÍBŘÍCÍ ROZTOK při 56°C 1-2hod 1% CHLORID ZLATITÝ min oplach destil.vodou 5% SIRNATAN SODNÝ min JÁDROVÁ ČERVEŇ min odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 110min Doba barvení cca 145min

17 Klasická metoda plísně ČERNĚ 1. 2. 3. KIT

18 BARVENÍ peroperační biopsie „ZMRAZÁKU“
KIT –hematoxylin Rapid frozen sections( ) REAGENT A min oplach tekoucí voda REAGENT B x oplach REAGENT C sekund oplach 95% etanol oplach čistý líh oplach xylen zamontovat Klasická metoda -hematoxylin HŘEBÍČKOVÝ OLEJ 2-3vteřiny, slít osušit filtračním papírem oplach 70% alkoholem KOĎOUSKŮV HEMATOXYLIN min oplach destil.vodou modrání ve čpavkové vodě min EOSIN min odvodnit, projasnit, zamontovat cena 9,45kč Doba barevní 2-3min Doba barvení 6-8min TOLUIDINOVÁ MODŘ aceton 2-3vteřiny, slít, osušit 1% TOLUIDINOVÁ MODŘ min oplach destil. vodou odvodnit od acetonu, projasnit, zamontovat QUICK MGG QUICK STAIN( ) osušit vzduchem REAGENT A x po 1 sekundě REAGENT B x po 1 sekundě REAGENT C po 1 sekundě oplach vodou cena 12,29kč Doba barvení 20sekund Doba barvení 2-3min

19 Klasická metoda-hematoxylin
KIT-hematoxylin QUICK (MGG QUICK STAIN) TOLUIDINOVÁ MODŘ

20 Klasická metoda-hematoxylin
KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)

21 Klasická metoda-hematoxylin
KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)

22 2000 1995 2005

23 KLASIKA versus KIT Děkujeme za pozornost
AUTOŘI: Daniela Galiová  Petra Mariančíková Fotografické snímky preparátů: MUDr.Libor Kudělka Děkujeme za pozornost