Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Strukturní analýza proteinů pomocí rentgenové difrakce Jan Hrach, Veronika Mašková.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Strukturní analýza proteinů pomocí rentgenové difrakce Jan Hrach, Veronika Mašková."— Transkript prezentace:

1 Strukturní analýza proteinů pomocí rentgenové difrakce Jan Hrach, Veronika Mašková

2 Osnova

3 Proteiny složené z aminokyselin základ živých organismů funkce  zásobní  katalytická (enzymy)  regulační (hormony)  obranná  transportní (hemoglobin)  stavební 1967 vyřešena první struktura enzymu lysozym

4 Krystalizace A – krycí víčko B – krystalizační kapka C – rezervoár D – matečný roztok difuzní metody  metoda visící kapky  metoda sedící kapky v krystalizační kapce je menší koncentrace roztoku než v rezervoáru  difúze par z kapky do rezervoáru  růst koncentrace roztoku v kapce

5  Růst krystalu

6  potvrzení krystalu proteinu metody –destruktivní absorpce barviva dehydratace drcení –nedestruktivní polarizace fluorescence pod UV zářením rentgenová difrakce

7 Difrakce Difraktometr na FZÚ AV v Cukrovarnické ulici   

8 Vlastní práce Cíle 1.krystalizace proteinu 2.sběr difrakčních dat 3.řešení struktury proteinu

9 1. Krystalizace lysozym c = 120 mg/ml NaCl c = 1M octan sodný c = 0,1M polzethylen glykol 30%

10 Fázový diagram

11 protei n NaCl 120 mg/ ml 90 mg/ ml 60 mg/ ml 30 mg/ ml 10 mg/ ml 0,1M 0,2M0,5M 1M2M 3,6M

12 Potvrzení krystalu proteinu

13 Lovení a mražení krystalů velikost smyčky: 400 μm

14 2. Difrakce

15 Difrakční snímek více krystalů

16 3. Vyřešená struktura proteinu

17 Závěr Vypěstovali jsme krystaly proteinu a ověřili fázový diagram. Nasbírali jsme soubor difrakčních dat Vyřešili jsme strukturu lysozymu

18 Poděkování Ing. Monika Kučeráková (FÚ AV ČR) Ing. Jan Stránský (ÚMCH) Leona Švecová (KIPL FJFI) organizátoři Týdne vědy

19 Děkujeme za pozornost!


Stáhnout ppt "Strukturní analýza proteinů pomocí rentgenové difrakce Jan Hrach, Veronika Mašková."

Podobné prezentace


Reklamy Google