Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

PCR Polymerase Chain Reaction PCR Polymerase Chain Reaction Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "PCR Polymerase Chain Reaction PCR Polymerase Chain Reaction Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová."— Transkript prezentace:

1

2 PCR Polymerase Chain Reaction PCR Polymerase Chain Reaction Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová

3 PCR (Polymerase Chain Reaction)

4

5

6

7

8

9 Primery krátké oligonukleotidy krátké oligonukleotidy (18 – 30 nukleotidů) přímý primer x zpětný primer přímý primer x zpětný primer jsou komplementární k sekvencím jsou komplementární k sekvencím na 3´konci odpovídajícího řetězce, ohraničujícím cílovou oblast DNA, kterou chceme amplifikovat

10

11 Anelační teplota T m = [4 x (G+C) + 2 x (A+T)] T m = [4 x (G+C) + 2 x (A+T)] T anneal. = [4 x (G+C) + 2 x (A+T) -5] T anneal. = [4 x (G+C) + 2 x (A+T) -5] 5´ GAGACTCAAGAGAACCTA 3´ T anneal. = ?

12

13

14 Počet kopií požadované oblasti DNA A = 2 n n = počet cyklů

15

16

17 Modifikace PCR nested PCR nested PCR multiplex PCR multiplex PCR se sekvenčně specifickými primery

18 Analýza PCR produktu PCR s obecnými primery : Hybridizace Hybridizace Sekvenování Sekvenování RFLP (Restriction Fragment Length RFLP (Restriction Fragment LengthPolymorphism) RT-PCR (kvantitativní PCR) RT-PCR (kvantitativní PCR) RNA=> cDNA


Stáhnout ppt "PCR Polymerase Chain Reaction PCR Polymerase Chain Reaction Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová."

Podobné prezentace


Reklamy Google