Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Prezentace se nahrává, počkejte prosím

Imunofenotypizace lymfatických uzlin D. Starostka, M. Bílý, K. Klaricová, I. Ondrová,, M. Wróbel, L. Novosadová Oddělení klinické hematologie Nemocnice.

Podobné prezentace


Prezentace na téma: "Imunofenotypizace lymfatických uzlin D. Starostka, M. Bílý, K. Klaricová, I. Ondrová,, M. Wróbel, L. Novosadová Oddělení klinické hematologie Nemocnice."— Transkript prezentace:

1 Imunofenotypizace lymfatických uzlin D. Starostka, M. Bílý, K. Klaricová, I. Ondrová,, M. Wróbel, L. Novosadová Oddělení klinické hematologie Nemocnice s poliklinikou Havířov

2 Možnosti laboratorního zpracování lymfatických uzlin Cytomorfologie Cytochemie a imunocytochemie Histologie Imunohistochemie Imunofenotypisace buněčných suspensí Cytogenetika Molekulární biologie Mikrobiologie

3 Postup zpracování lymfatické uzliny Transport vzorku z operačního sálu v gáze zvlhčené pufrem PBS Zhotovení otisku na sklíčko k cytologickému vyšetření Rozstříhání vzorku na drobné části do malého množství PBS Mechanická desintegrace Filtrace Stanovení buněčnosti suspense na hematologickém analyzátoru Měření na průtokovém cytometru

4

5

6

7

8

9

10

11 Cíle imunofenotypizace Hematopoetické buňky (CD45+), nebo CD45- elementy Zastoupení jednotlivých lymfoidních linií Přítomnost monoklonality Charakteristický imunofenotyp

12 Panel pro imunofenotypizaci lymfoproliferací na OKH NsP Havířov Panleukocytární marker : CD45 T – markery : CD 3, CD 4, CD 8, CD 5, CD 7, CD 2, CD 1, TCR B – markery : CD 19, CD 20, CD 21, CD 22, CD 23, CD 25, CD 38, CD 11c, CD 79b, FMC 7, CD 40, CD 28, CD 103, CD 138 NK – markery: CD 16, CD 56 Povrchové, event. intracytoplazmatické imunoglobuliny : těžké řetězce IgG, IgM, IgA, IgD lehké řetězce kappa a lambda

13 Imunofenotyp u chronických B - lymfoproliferací

14 Úskalí přípravy a měření vzorků a interpretace výsledků Odběr uzliny Konsistence uzliny Způsob desintegrace Potenciální nereprezentativnost vyšetřované populace Způsob lýzy erytrocytů Gateování

15 Problém: gate

16 Diagnostický souhrn 1. Iniciály, pohlaví, věk FCMHistologieCytologieKonečná dg. O.K., ž, 46B-NHL, v.s. FL (CD10+)FL, grade INHL, v.s. FLFL P.Š, m, 44B-NHL, v.s. FL (CD10+)FL, grade INHL, v.s. FLFL J.M., ž, 43B-NHL, v.s. LPLExtramedulární nediferencovaný plasmocytom uzliny NHL, v.s. LPLLPL J.P., m, 72B-NHL, FL ?? (CD10 u 30% bb.) DLBCL se značnou příměsí T-lymfocytů NHLDLBCL E.S., m, 51T-lymfocytární predominance (80%), oj. neklonál. B-lymfocyty T-cell rich DLBCLNejasný nálezT-cell rich DLBCL V.S., m, 68B-NHL, v.s. FLFL, grade INHL (FL ?, MZL ?) FL O.K., ž, 48B-NHL, v.s. FL (CD10+)FL, grade INHL, v.s. FLFL A.H., ž, 75B-NHL, v.s. LPLB-NHL - LPLNHL, v.s. LPLLPL J.L., m, 55B-NHL, DLCL ?, FL ?DLBCLDLCLDLBCL L.K., m, 64B-CLL, Matutes 3/5B-CLL, prolymfocytární a paraimunoblastická transformace Richterova transformace B-CLL Richterova transformace B-CLL

17 Diagnostický souhrn 2. Iniciály, pohlaví, věk FCMHistologieCytologieKonečná dg. M.Z., m, 56V.s.monoklonální B-populace, nejednoznačný nález Dif.dg. reaktivní hyperplasie vs. centroblastický B-NHL DLCLNejasný stav, t.č. monoklon. lymfocytóza nejist. významu G.H., ž, 26T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 2.1:1) Hodgkinův lymfom, NSHodgkinův lymfom V.B., ž, 33T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 4.5:1) Hodgkinův lymfom, NSHodgkinův lymfom L.K., m, 70T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 1.1:1) Hodgkinův lymfom, LPHodgkinův lymfom D.B., ž, 25T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 9:1) Hodgkinův lymfom, NSHodgkinův lymfom

18 Diagnostický souhrn 3. Iniciály, pohlaví, věk FCMHistologieCytologieKonečná dg. F.T., m, 56T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 7:1) Reaktivní změnyReaktivní lymfadenitida M.M., ž, 15T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 3:1) SarkoidosaReaktivní lymfadenitida Sarkoidosa K.S., ž, 75Pouze 4% CD45+ buněkMetastasa malobuněčného karcinomu Metastasa karcinomu L.L., m, 68T-lymfocytární predominance (CD4:CD8 = 1.8:1) Metastasa nízce diferencovaného karcinomu Metastasa karcinomu Z.F., m, 58Pouze 7% CD45+ buněkMetastasa karcinomu

19 Kasuistiky – klinická data Kasuistika č. 1: Pacientka O.K., 46 let. Multilokulární lymfadenomegalie s predilekční intraabdominální masou. Leukocytosa (35 x 10 9 /l) s absolutní lymfocytosou (0.70 numfr.). Kasuistika č. 2: Pacientka J.M., 43 let. Sjögrenův syndrom. Během hospitalisace pro bronchopneumonii zjištěna isolovaná cervikální lymfadenomegalie. Sérový paraprotein IgM. Kasuistika č. 3: Pacient L.K., 64 let. B-CLL s malým klonem v periferní krvi (leukopenie), nodulární typ postižení KD. Po půlročním sledování masivní rychle narůstající cervikální lymfadenomegalie („býčí šíje“). Klinické podezření na histologickou transformaci B-CLL v high-grade lymfoproliferaci.

20 Kasuistika č. 1 - cytologický nález

21 Kasuistika č. 1 - imunofenotypisace lymfatické uzliny

22 Kasuistika č. 1 - rozdíly v imunotypu lymfomových buněk uzliny, KD a PK Lymfatická uzlina Kostní dřeň Kostní dřeň Periferní krev Periferní krev 48,0 % 48,0 % 23,4 % 6,0 %

23 Kasuistika č. 2 - cytologický nález

24 Kasuistika č. 2 - imunofenotypisace lymfatické uzliny

25 Kasuistika č. 3 - cytologický nález

26 Kasuistika č. 3 - imunofenotypisace lymfatické uzliny

27 Závěry Rychlá, citlivá a v mnoha případech diagnostická metoda umožňující v závažných případech bezprostřední léčbu Spojení s cytologií otiskového preparátu zvyšuje diagnostickou výtěžnost Odlišení uzlin postižených lymfoproliferacemi od metastatických uzlin (negativita CD45 na metastatických buňkách) Přesná specifikace B- non-hodgkinských lymfomů (B-NHL) podle charakteristického imunofenotypu U non-hodgkinských lymfomů (NHL) vysoký stupeň souladu mezi histologickou diagnózou a typizačním nálezem U Hodgkinova lymfomu vyšetření problematické


Stáhnout ppt "Imunofenotypizace lymfatických uzlin D. Starostka, M. Bílý, K. Klaricová, I. Ondrová,, M. Wróbel, L. Novosadová Oddělení klinické hematologie Nemocnice."

Podobné prezentace


Reklamy Google